Тест памяти, прошиваемый в ПЗУ
6 / 16 760
Версия для печати
Неисправности, связанные с ОЗУ, занимают «почётную» нишу среди всевозможных причин неработоспособности Спектрумов. Микросхемы памяти относительно ненадёжны и склонны выгорать (в особенности при проблемах с питанием). И особенно если источник питания Спектрума трансформаторный. Уже сколько раз было замечено на моём компьютере Ленинград-1 с трансформаторным блоком питания — случайно перемкнёшь питание компьютера (+5В и массу), и одна-две микросхемы КР565РУ5 уже «вылетели».
Как правило горит микросхема памяти полностью. Т.е. не так, что в ней какой-то один бит не работает, а вообще вся микросхема перестаёт работать. Память Спектрума организована так, что каждая микросхема ОЗУ отвечает за свой бит памяти (для 48К спектрума это 8 микросхем по одному биту, итого имеем 64КБ адресуемой памяти). При старте компьютера ПЗУ производит свой тест памяти, и, если какая-либо ячейка ОЗУ «сбоит», компьютер устанавливает границу доступной памяти на адрес ячейки, предыдущей перед неисправной.
Всё это очень хорошо, но только в том случае, если обнаруженная дефектная ячейка памяти находится не в начале доступного ОЗУ. Дело в том, что для работы BASIC-48 тоже требуется какая-то доступная исправная память. И если дефект памяти выявится в начале ОЗУ, то BASIC просто-напросто не запустится, и мы ничего не сможем узнать. В случае, когда сгорела одна из микросхем ОЗУ полностью, компьютер не запустит BASIC.
Далее остаются только «пляски с бубном», чтобы найти что же в действительности сгорело. Применимо к микросхемам памяти можно попробовать примитивную, но иногда полезную диагностику. Дело в том, что дефектная микросхема памяти (КР565РУ5) может отличаться по температуре от остальных рабочих микросхем. При работе ОЗУ КР565РУ5 греется. Если приложить к микросхемам ОЗУ палец, можно почувствовать, что микросхемы ощутимо тёплые. Неисправная микросхема может греться как утюг, а может быть вообще холодной. Это необязательно будет так, но данный метод можно запомнить и применять от случая к случаю.
Вообще при производстве Спектрумов правилами хорошего тона является установка на панельки микросхемы ПЗУ и процессора. Это очень сильно облегчает жизнь при ремонте компьютера. В данном случае нас интересует микросхема ПЗУ. В «древних» Спектрумах, производимых в конце 80-х (начале 90-х годов) как правило ставилось две микросхемы ПЗУ. Это продиктовано тем, что микросхему ПЗУ объёмом 16К (буржуинское наименование 27128) достать в то время было не так-то просто, поэтому было проще и дешевле заменить её на две микросхемы объёмом по 8К, благо у них был отечественный аналог КР573РФ4, КР573РФ6.
Таки да, нам очень надо, чтобы хотя бы одно ПЗУ было на панельке. Если на плате компьютера вообще одно ПЗУ на панельке, это тоже очень хорошо. Всё дело в том, что ПЗУ можно снять и вместо него поставить своё ПЗУ, в котором «прошит» тест памяти. Тогда при включении компьютера будет запущен нужный нам тест памяти, который явно покажет, что у нас творится с памятью в компьютере.
Очень-очень давно, когда у меня ещё не было программатора ПЗУ, приходилось ехать на радиорынок и там суровые дядьки за соответствующую мзду прошивали в ПЗУ что угодно. Были у них и тесты памяти для Спектрумов.
Так вот, прикупив заветную прошитую микросхему ПЗУ можно было потестить свой компьютер. Однако сперва нужно было решить вопрос — как правильно вставить ПЗУ в панельку? Дело в том, что тест ПЗУ прошивается в микросхему объёмом 2К. Она имеет 24 вывода. В Спектруме используются 28-выводные ПЗУ. В этом случае у микросхемы с тестом поднимались выводы 21 и 24 и объединялись следующим образом:
Вставляется такая микросхема в панельку так, как показано на фотографии:
Думаю, на фотографии всё ясно видно. Контакт 12 ПЗУ (GND) должен совпасть с контактом 14 в панельке. А оттопыренный вывод тестового ПЗУ должен попасть в 28-й контакт панельки (питание +5В).
Можно не уродовать ПЗУ, а сделать переходную плату. Сверху ставим панельку на 24 контакта для тестового ПЗУ, снизу торчат штыри для установки платы в 28-выводную панельку в компьютер. Все требуемые изменения в присоединении 21 и 24 выводов ПЗУ можно сделать прямо на такой плате:
Дальше всё просто — включаем компьютер, и запускается тест, прошитый в микросхему ПЗУ.
В своей практике я часто пользуюсь следующими тестовыми прошивками:
Тестовое ПЗУ для ZX-Spectrum 48K
Как следует из названия, проверяет 48К ОЗУ. Работает очень медленно (порядка 12 минут). Сначала чистятся атрибуты экрана, потом поочерёдно экран закрашивается и очищается, затем показываются результаты теста ОЗУ. После этого идёт тест ПЗУ, но он всегда завершается с ошибкой, но для нас это не играет никакой роли. Главное — проверить ОЗУ.
ВНИМАНИЕ!
У этого теста есть одна «фишка» — если держать при старте теста пробел, то графическая часть с закрашиванием атрибутов пропускается и начинается непосредственно тест ОЗУ. Проверка на нажатый пробел делается в момент, когда заканчивается перебор цветов бордюра в начале теста.
Как проходит тест на исправном компьютере можно посмотреть на следующем видео:
Прохождение теста 48К на исправном компьютере
Прохождение теста, если неисправна одна из микросхем ОЗУ, можно увидеть в первом выпуске Байт Tales #01:
Оставьте свой комментарий
Тест по теме «Устройства внутренней памяти»
Тест по теме «Устройства внутренней памяти»
1. К внутренней памяти не относятся:
а) ОЗУ; в) СМОS;
б) ПЗУ; г) жесткий диск.
2. Свойством ОЗУ является:
а) энергозависимость; в) перезапись информации;
б) энергонезависимость; г) долговременное хранение информации.
3. Свойством ПЗУ является:
а) только чтение информации; в) перезапись информации;
б) энергозависимость; г) кратковременное хранение информации.
4. Свойством СМОS является:
а) энергозависимость; в) перезапись информации;
б) только чтение информации; г) кратковременное хранение информации.
5. Наименьшим элементов оперативной памяти является:
а) ячейка; в) байт;
б) регистр; г) файл.
6. Каждый байт ОЗУ имеет:
а) имя; в) индекс;
б) адрес; г) название.
7. Физически ОЗУ реализуется на:
а) катушках индуктивности; в) триггерах и конденсаторах;
б) резисторах; г) диодах.
8. Наименьшая адресуемая часть оперативной памяти:
а) бит; в) файл;
б) килобайт; г) байт.
9. ОЗУ размещается:
а) в процессоре; в) на магистрали;
б) на жестком диске; г) на материнской плате.
10. Объем ОЗУ измеряется:
а) в ячейках; в) в байтах;
б) в МГц; г) в пикселях.
Разница между ОЗУ и ПЗУ
RAM и ROM оба являются внутренней памятью компьютера. Где RAM — это временная память, ROM — постоянная память компьютера. Существует много различий между ОЗУ и ПЗУ, но основное отличие состоит в том, что ОЗУ — это память для чтения и записи, а ПЗУ — только для чтения. Я обсудил некоторые различия между RAM и ROM с помощью сравнительной таблицы, показанной ниже.Сравнительная таблица
Основа для сравнения | баран | ПЗУ |
---|---|---|
основной | Это память чтения-записи. | Это только для чтения памяти. |
использование | Используется для хранения данных, которые в данный момент должны временно обрабатываться процессором. | В нем хранятся инструкции, необходимые во время начальной загрузки компьютера. |
летучесть | Это летучая память. | Это энергонезависимая память. |
Стенды для | Оперативная память. | Только для чтения памяти. |
модификация | Данные в ПЗУ могут быть изменены. | Данные в ПЗУ не могут быть изменены. |
Вместимость | Объем оперативной памяти от 64 МБ до 4 ГБ. | ПЗУ сравнительно меньше ОЗУ. |
Стоимость | RAM — более дорогая память. | ПЗУ сравнительно дешевле ОЗУ. |
Тип | Типы оперативной памяти: статическая и динамическая. | Типы ПЗУ: ПРОМ, СППЗУ, ЭСППЗУ. |
Определение ОЗУ
RAM — оперативная память ; это означает, что центральный процессор может напрямую обращаться к любому адресу в оперативной памяти. Оперативная память — это быстро доступная память компьютера. Временно хранит данные.
RAM — это энергозависимая память. ОЗУ хранит данные до включения питания. Как только питание ЦП отключается, все данные в ОЗУ стираются. Данные, которые должны быть обработаны в данный момент, должны находиться в оперативной памяти. Объем памяти ОЗУ составляет от 64 МБ до 4 ГБ.
Оперативная память — самая быстрая и самая дорогая память компьютера. Это память чтения-записи компьютера. Процессор может читать инструкции из ОЗУ и записывать результат в ОЗУ. Данные в оперативной памяти могут быть изменены .
Существует два вида оперативной памяти: статическая и динамическая . Статическая RAM — это та, которая требует постоянного потока энергии для сохранения данных внутри нее. Это быстрее и дороже, чем DRAM. Используется как кеш-память для компьютера. Динамическое ОЗУ необходимо обновить, чтобы сохранить данные, которые оно содержит. Это медленнее и дешевле, чем статическая RAM.
Определение ПЗУ
ПЗУ доступно только для чтения . Данные в ПЗУ могут быть прочитаны только процессором, но их нельзя изменить. ЦП не может напрямую обращаться к памяти ПЗУ, данные сначала должны быть переданы в ОЗУ, а затем ЦП может получить доступ к этим данным из ОЗУ.
В ПЗУ хранится инструкция, необходимая компьютеру во время начальной загрузки (процесс загрузки компьютера). Содержимое в ПЗУ не может быть изменено. ПЗУ является энергонезависимой памятью, данные внутри ПЗУ сохраняются даже при отключении питания ЦП.
Емкость ПЗУ сравнительно меньше, чем ОЗУ, она медленнее и дешевле, чем ОЗУ. Существует много видов ПЗУ:
PROM : программируемое ПЗУ, оно может быть изменено пользователем только один раз.
EPROM : стираемое и программируемое ПЗУ, содержимое этого ПЗУ может быть стерто с помощью ультрафиолетовых лучей, а ROm может быть перепрограммирован.
ЭСППЗУ : электрически стираемое и программируемое ПЗУ, оно может быть стерто электрически и перепрограммировано около десяти тысяч раз.
Ключевые различия между RAM и ROM ROM
- Основное различие между ОЗУ и ПЗУ состоит в том, что ОЗУ в основном является памятью для чтения и записи, тогда как ПЗУ является памятью только для чтения.
- В оперативной памяти временно хранятся данные, которые должны обрабатываться процессором в данный момент. С другой стороны, ROM хранит инструкции, необходимые во время начальной загрузки.
- RAM — это энергозависимая память. Тем не менее, ROM является энергонезависимой памятью.
- ОЗУ означает « Память с произвольным доступом», а ПЗУ — « Только чтение» .
- С одной стороны, когда данные в ОЗУ могут быть легко изменены, данные в ПЗУ могут быть почти или никогда не могут быть изменены .
- Объем оперативной памяти может составлять от 64 до 4 ГБ, тогда как объем ПЗУ всегда сравнительно меньше, чем объем ОЗУ.
- ОЗУ дороже, чем ПЗУ.
- ОЗУ можно классифицировать на статическое и динамическое . С другой стороны, ROM можно классифицировать на PROM, EPROM и EEPROM .
Заключение:
RAM и ROM оба являются необходимой памятью для компьютера. ROM необходим для загрузки компьютера. Оперативная память важна для обработки процессора.
точное обнаружение разрыва плодных оболочек на месте оказания медицинской помощи
Med Devices (Auckl). 2016; 9: 69–74.
Ross W McQuivey
1 Клинические вопросы, клинические инновации, Солт-Лейк-Сити, Юта, США
Jon E Block
2 Независимый клинический консультант, Сан-Франциско, Калифорния
3
9008 Клинические вопросы , Clinical Innovations, Солт-Лейк-Сити, Юта, США2 Независимый клинический консультант, Сан-Франциско, Калифорния, США
Адрес для переписки: Jon E Block, 2210 Jackson Street, Suite 401, San Francisco, CA 94115, США, тел. + 1 415 775 7947, электронная почта мок.kcolbnojrd@bjАвторское право © McQuivey and Block, 2016 г. Эта работа опубликована и лицензирована Dove Medical Press Limited. Полные условия лицензии доступны по адресу http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/. Некоммерческое использование работы разрешено без какого-либо дополнительного разрешения от Dove Medical Press Limited при условии, что работа правильно указана. Эта статья цитировалась в других статьях в PMC.Abstract
Точная и своевременная диагностика разрыва плодных оболочек крайне важна для информирования и направления вмешательств в зависимости от гестационного возраста для оптимизации перинатальных исходов и снижения риска серьезных осложнений, включая преждевременные роды и инфекции.ROM Plus — это быстрый качественный иммунохроматографический диагностический тест по месту оказания медицинской помощи, в котором используется уникальный метод моноклональных/поликлональных антител для обнаружения двух различных белков, обнаруженных в амниотической жидкости в высоких концентрациях: альфа-фетопротеина и белка, связывающего инсулиноподобный фактор роста. -1. Результаты клинических исследований неизменно продемонстрировали высокую диагностическую точность и рабочие характеристики этого теста в месте оказания медицинской помощи, который превосходит обычные клинические испытания с внешней лабораторной оценкой.Описание, показания к применению, этапы процедуры, а также лабораторная и клиническая характеристика этого анализа представлены в этой статье.
Ключевые слова: ROM Plus ® , преждевременное излитие плодных оболочек, иммуноанализ в месте оказания медицинской помощи, белок-1, связывающий инсулиноподобный фактор роста, IGFBP-1, плацентарный белок 12, PP12, альфа-фетопротеин, АФП
Введение
За последние несколько десятилетий диагностическое тестирование по месту оказания медицинской помощи произвело революцию в медицинском ведении пациентов с неотложными состояниями в условиях неотложной помощи.1,2 Быстрое предоставление результатов может способствовать более обоснованному принятию клинических решений, повышению приверженности пациентов и большей удовлетворенности пациентов, что приводит к лучшим клиническим результатам. На самом деле, международный опрос врачей первичного звена выявил острую клиническую потребность и потребность в различных тестах по месту оказания медицинской помощи, чтобы более своевременно принимать более точные медицинские решения.3
Были предприняты согласованные усилия для разработать и коммерциализировать экспресс-тесты иммунологического анализа разрыва плодных оболочек по месту оказания медицинской помощи, которые точно выявляют белки, обнаруженные в высоких концентрациях в амниотической жидкости, но в крайне низких фоновых концентрациях в шеечно-влагалищном секрете.4 В первом поколении этих тестов использовался метод моноклональных антител, основное внимание уделялось белку-1, связывающему инсулиноподобный фактор роста (IGFBP-1, также известный как плацентарный белок 12), и плацентарному альфа-микроглобулину-1,5–10. уход и более точная диагностика разрыва плодных оболочек привели к недавней разработке комбинированного иммуноанализа моноклональных/поликлональных антител для обнаружения двух разных белков, обнаруженных в амниотической жидкости в высоких концентрациях.11 Описание, показания к применению, этапы процедуры и лабораторные исследования. и клиническая характеристика этого анализа представлены здесь.
Описание устройства
ROM Plus ® (ROM Plus, Clinical Innovations, Солт-Лейк-Сити, Юта, США) — это быстрый качественный иммунохроматографический тест, предназначенный для оказания медицинской помощи (). В этом диагностическом устройстве используется уникальный метод моноклональных/поликлональных антител для обнаружения двух разных белков, обнаруженных в амниотической жидкости в высоких концентрациях. ROM Plus обнаруживает альфа-фетопротеин (AFP) и IGFBP-1. Комбинация IGFBP-1 и AFP была выбрана не только из-за ее надежной исторической поддержки в литературе в качестве идеальных белковых маркеров для амниотической жидкости, но также из-за уникальных характеристик каждого белка.IGFBP-1 синтезируется децидуальной оболочкой плаценты и достигает очень высокого уровня концентрации в амниотической жидкости в начале первого триместра и остается на этом уровне до родов. , достигает пиковой концентрации в конце второго/начале третьего триместра.20–25 Это увеличивает вероятность того, что белки будут обнаружены, особенно у недоношенных пациенток, когда точная диагностика разрыва плодных оболочек является наиболее важной.
ROM Plus ® Тест на разрыв плодных оболочек.
Сокращения: С, контроль; ФП, амниотическая жидкость.
В дополнение к использованию уникального подхода моноклональных/поликлональных антител, ROM Plus предоставляет несколько функций, разработанных для упрощения использования. В отличие от иммуноанализов первого поколения, предназначенных для оказания медицинской помощи, тест-полоска помещена в удобную кассету, которая размещается горизонтально на столешнице, что снижает риск непреднамеренного проливания пробы. Он также содержит встроенный таймер с красителем, который активируется пальцем.Контрольные образцы помещены в стеклянную ампулу внутри пластикового флакона с крышкой-капельницей; они не требуют заморозки или специального обращения. Чтобы активировать контроль, нужно просто разбить стеклянную ампулу внутри флакона, что высвободит лиофилизированный белок и позволит ему смешаться с буферным раствором. Затем пластиковый флакон с дозатором используется для дозирования образца в лунку кассеты ROM Plus.
Показания к применению
Тест на разрыв плодных оболочек ROM Plus — это быстрый качественный иммунохроматографический тест для выявления in vitro амниотической жидкости во вагинальных выделениях беременных женщин с признаками и симптомами разрыва плодных оболочек.Тест обнаруживает АФП и IGFBP-1 из амниотической жидкости в вагинальном секрете. Тест предназначен для использования медицинскими работниками по рецепту, чтобы помочь в обнаружении разрыва плодных оболочек у беременных женщин в сочетании с другими признаками и симптомами.
Детали процедуры
ROM Plus — это автономный набор для тестирования, который дает качественные результаты для определения разрыва плодных оболочек и может быть выполнен в местах оказания медицинской помощи. Для получения результатов ROM Plus не требуется зеркало. Тест неинвазивный, требуется только простой образец вагинального мазка.
иллюстрирует процедурные детали ROM Plus при использовании в качестве теста по месту оказания медицинской помощи. Вкратце, образец жидкости собирают, помещая тампон на 5–7 см во влагалище на 15 секунд. Затем тампон смешивают во флаконе, содержащем 400 мкл буферного раствора, и разбавленный образец наносят на прокладку тест-полоски через лунку для образца на кассете. Затем активируется встроенный таймер, который визуализируется как удобная функция для указания времени теста. Жидкость движется хроматографически и в одном направлении к впитывающей прокладке.
ROM Plus ® Процедурные этапы.
Примечания: ( A ) Стерильный тампон вынимают из упаковки для сбора образца с поверхности влагалища, стараясь не касаться чего-либо до его введения. Тампон вводят во влагалище на глубину 5–7 см, а затем извлекают минимум через 15 секунд. ( B ) Наконечник тампона помещается во флакон и смешивается с буферным раствором. После отламывания кончика тампона по насечке кончик остается во флаконе.Для применения в местах оказания медицинской помощи используется крышка дозатора капель, а наконечник остается в буферном растворе не менее 15 секунд. ( C ) 4–6 капель образца/буферного раствора добавляют в лунку для образца кассеты ROM Plus и запускают таймер. Результаты можно визуализировать через 5–20 минут. ( D ) Если контрольная линия видна (С), результат теста отрицательный. Если видны и контрольная (C), и тестовая линия (AF), результат положительный.Если линии не видны или видна только тестовая линия (AF), результат теста недействителен и должен быть повторен.
Сокращение: AF, амниотическая жидкость.
Во время миграции образец реагирует с моно/поликлональными антителами на мембране тест-полоски. Эти антитела иммунореактивны к белкам IGFBP-1 и AFP, которые являются маркерами амниотической жидкости. Когда мембрана впитает жидкий образец, появится контрольная линия, указывающая на то, что было нанесено достаточное количество образца и устройство работает правильно.
Если образец содержит IGFBP-1 и/или АФП, он связывается с антителами тестовой линии, вызывая их появление и указывая на положительный результат теста. Если образец не содержит IGFBP-1 и/или АФП, будет видна только контрольная линия, что указывает на отрицательный результат.
Доклиническая лабораторная разработка
Анализ ROM Plus прошел валидацию по параметрам линейности, предела обнаружения, точности/воспроизводимости, чувствительности, специфичности и перекрестной реактивности.Эффект «ловушки высокой дозы» был определен для оценки верхнего диапазона обнаружения ROM Plus. Концентрации IGFBP-1 были протестированы до 400 000 нг/мл, а АФП — до 200 000 нг/мл с положительными визуальными результатами для 100% образцов образцов ROM Plus. Нижний предел обнаружения составляет 5 нг/мл для IGFBP-1 и 150 нг/мл для АФП.
Воспроизводимость проверялась в разные дни при шести уровнях амниотической жидкости, добавленной в отрицательный контроль. Анализ проводили на трех партиях ROM Plus для определения визуальных положительных результатов.Два низких положительных результата, два средних положительных результата и два высоких положительных результата были проведены на трех партиях ROM Plus в четыре разных дня. Разницы в активности не заметил.
Для определения интерференции и перекрестной реактивности анализа Тайленол, аспирин и три различных продукта для ванн были добавлены в низкий положительный контроль в конечной концентрации 0,1% без визуальной потери активности. Те же самые продукты для ванн были добавлены в отрицательный контроль и показали отрицательный результат. Кроме того, человеческая сперма, моча и кровь были добавлены в слабоположительные образцы при конечной концентрации 10% без потери активности.Человеческая сперма, моча и кровь также были добавлены в отрицательный контроль и показали отрицательный результат. Анализ IGFBP-1 не дает перекрестных реакций с IGFBP-2, -3 или -4 по результатам вестерн-блоттинга. Наконец, было показано, что ROM Plus дал отрицательный результат при тестировании с образцами, которые были положительными на бактериальный вагиноз и распространенные заболевания, передающиеся половым путем. Все образцы тестировали при pH >4,5.
В Медицинском центре Томаса Джефферсона была проведена внешняя независимая оценка ROM Plus для изучения аналитических и рабочих характеристик теста.Были исследованы чувствительность для обнаружения и стабильность контролей, коэффициент разбавления образцов мазков и титр околоплодных вод и биологических жидкостей, обычно обнаруживаемых во влагалище, кроме амниотической жидкости. ROM Plus продемонстрировал отличные аналитические характеристики и удобные функции. В частности, массоемкость тампона для раствора альбумина с концентрацией 7 г/дл составляла в среднем 79±13 мкл при объеме разбавителя 380 мкл, что указывает на среднее минимальное разведение образцов 18%.Положительный контроль (указанные концентрации; AFP = 600 нг/мл, IGFBP-1 = 20 нг/мл) был положительным до разведения 1:30, что соответствовало заявленной аналитической чувствительности ROM Plus (AFP = 150 нг/мл, IGFBP-1 = 5 нг/мл) после учета разбавления. Кроме того, контроль (с титром 1:8) оставался положительным после 10 дней хранения в холодильнике или в замороженном виде. Амниотическая жидкость, собранная у доношенных пациенток, была положительной с титром 1:3000, в то время как моча у доношенных пациенток была отрицательной.
Клинические диагностические характеристики
Thomasino и соавт.11 провели многоцентровое проспективное обсервационное исследование, чтобы сравнить точность ROM Plus с точностью современной традиционной клинической оценки для диагностики разрыва плодных оболочек.Стандартная клиническая оценка включала исследование в зеркалах на предмет скопления амниотической жидкости, папоротника и изменения pH окружающей среды с использованием нитразина. Разрыв плодных оболочек диагностировали, если наблюдали подтекание жидкости из цервикального зева или при наличии двух из трех условий: скопление жидкости, положительный тест на нитразин или папоротник. Разрыв мембраны был подтвержден при просмотре медицинских записей после родов. У 285 пациенток (15–42 нед гестации) частота ложноположительных результатов теста ROM Plus составила 9%, ложноотрицательных — 0.5%, чувствительность 99% и специфичность 91%, с положительной и отрицательной прогностической ценностью 85% и 99% соответственно. Для сравнения, чувствительность традиционной клинической оценки составила 85%, специфичность 98%, с положительными и отрицательными прогностическими значениями 99% и 77%. Чувствительность Фернинга составила 99%, специфичность 72%, с положительными и отрицательными прогностическими значениями 80% и 99%. Наконец, нитразиновые тесты имели чувствительность 93%, специфичность 83% и положительные и отрицательные прогностические значения 90% и 88%.
Rogers и соавт.26 в одном клиническом центре сравнили диагностические характеристики двух методов, используемых для обнаружения разрыва плодных оболочек у одного и того же пациента. Вагинальные выделения оценивали с помощью обычного папоротникового теста, а также теста ROM Plus у 75 беременных с жалобами на разрыв плодных оболочек. Оба теста сравнивались с аналитическим подтверждением разрыва плодных оболочек с использованием трех внешних лабораторных тестов.Диагностические характеристики в равной степени благоприятствовали тесту ROM Plus по сравнению с тестом папоротника: чувствительность (100% против 77,8%), специфичность (94,8% против 79,3%), положительная прогностическая ценность (75% против 36,8%), отрицательная прогностическая ценность (100% против 95,8%). %) и точность (95,5% против 79,1%).
Обсуждение
Самопроизвольный разрыв плодных оболочек может произойти в любом гестационном возрасте и представляет особенно серьезную клиническую проблему, если он происходит до 37 недель беременности, где он является причиной 20–40% преждевременных родов.27–29 Таким образом, точная и своевременная диагностика разрыва плодных оболочек необходима для информирования и направления вмешательств в зависимости от гестационного возраста для оптимизации перинатальных исходов и снижения риска серьезных осложнений, включая преждевременные роды и инфекции, такие как хориоамнионит и неонатальный сепсис.14,30 ,31 Неправильный диагноз разрыва плодных оболочек (т.е. ложноположительный тест) также может иметь серьезные клинические последствия, такие как начало ненужных акушерских вмешательств, которые могут включать госпитализацию, введение лекарств и даже ятрогенные преждевременные роды.32
При подозрении на разрыв плодных оболочек диагноз обычно ставится с использованием стерильного зеркала для выявления подтекания или скопления амниотической жидкости в сочетании с микроскопическим исследованием собранного образца на наличие папоротника/кристаллизации и определением рН жидкости с нитразиновой тест-бумаги.31,33,34 Хотя этот подход оставался стандартом медицинской помощи на протяжении десятилетий, результаты могут быть сомнительными, особенно когда после ПЗУ прошло более часа.35 Кроме того, осмотр в стерильном зеркале является субъективным и интенсивный и, как было показано, имеет недостаточные диагностические характеристики для точного обнаружения разрыва плодных оболочек.31,36–39
Высокий уровень диагностической точности, достигаемый с помощью ROM Plus, особенно важен в случаях сомнительного разрыва плодных оболочек, поскольку почти у четверти всех пациентов, в конечном итоге диагностированных с разрывом плодных оболочек, нет явных клинических признаков разрыва. мембраны при первичном обращении.34
Высокая чувствительность, стабильно достигаемая с помощью теста ROM Plus в клинических исследованиях, в значительной степени обусловлена уникальным подходом моноклональных/поликлональных антител, при котором поликлональные антитела сочетаются с множественными (8–12) аминокислотами. пептиды, содержащиеся в 259 полноразмерных белковых цепях IGFBP-1, в то время как моноклональные тесты сочетаются с одним сайтом эпитопа.Это может обеспечить преимущество по сравнению с другими доступными в настоящее время экспресс-тестами иммуноанализа, основанными на одном моноклональном антителе. Будущие сравнительные оценки различных иммуноанализов будут необходимы для выяснения любых диагностических и/или процедурных преимуществ различных коммерчески доступных тестов.
В заключение следует отметить, что этот уникальный моноклональный/поликлональный иммуноанализ может быть легко и быстро проведен у постели больного различными лицами, осуществляющими уход, без необходимости использования зеркала.
Благодарности
RWM является сотрудником, а JEB является независимым консультантом Clinical Innovations (Солт-Лейк-Сити, Юта).
Сноски
Вклад авторов
Все авторы внесли свой вклад в разработку концепции, выполнение и составление проекта рукописи, а также обеспечили критический пересмотр рукописи на предмет интеллектуального содержания. Все авторы прочитали и окончательно утвердили версию для публикации. Все авторы согласились нести ответственность за все аспекты работы, обеспечивая надлежащее расследование и решение вопросов, связанных с точностью и достоверностью любой части работы.
Раскрытие информации
Авторы сообщают об отсутствии конфликта интересов в этой работе.
Ссылки
1. Ян У.Р., Ван Акен Х. Тестирование рядом с пациентом – по месту оказания медицинской помощи или по стоимости и удобству? Бр Джей Анаст. 2003;90(4):425–427. [PubMed] [Google Scholar]3. Howick J, Cals JW, Jones C, et al. Текущее и будущее использование тестов по месту оказания медицинской помощи в первичной помощи: международное исследование в Австралии, Бельгии, Нидерландах, Великобритании и США. Открытый БМЖ. 2014;4(8):e005611.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]4. Мариона Ф.Г., Каберо Л. Готовы ли мы к новому взгляду на диагностику преждевременного разрыва плодных оболочек? J Matern Fetal Neonatal Med. 2012;25(4):403–407. [PubMed] [Google Scholar]5. Дорет М., Картье Р., Мирибель Дж. и др. Диагностика преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек на ранних сроках беременности: выявление PAMG-1 и IGFBP-1 в амниотической жидкости с помощью биохимических тестов. Клин Биохим. 2013;46(18):1816–1819. [PubMed] [Google Scholar]6. Eleje GU, Ezugwu EC, Ogunyemi D, et al.Точность и анализ стоимости плацентарного альфа-микроглобулина-1 в диагностике преждевременного разрыва плодных оболочек в условиях сообщества с ограниченными ресурсами. J Obstet Gynaecol Res. 2015;41(1):29–38. [PubMed] [Google Scholar]7. Lee SE, Park JS, Norwitz ER, Kim KW, Park HS, Jun JK. Измерение плацентарного альфа-микроглобулина-1 в шеечно-влагалищных выделениях для диагностики разрыва плодных оболочек. Акушерство Гинекол. 2007;109(3):634–640. [PubMed] [Google Scholar]8. Паласио М., Кунерт М., Бергер Р., Лариос К.Л., Марселин Л.Метаанализ исследований биохимических маркерных тестов для диагностики преждевременного разрыва плодных оболочек: сравнение показателей эффективности. BMC Беременность Роды. 2014;14:183. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]9. Рутанен Э.М., Бон Х., Сеппала М. Радиоиммуноанализ плацентарного белка 12: уровни в амниотической жидкости, пуповинной крови и сыворотке здоровых взрослых, беременных женщин и пациентов с трофобластической болезнью. Am J Obstet Gynecol. 1982;144(4):460–463. [PubMed] [Google Scholar] 10. Рутанен Э.М., Пеконен Ф., Карккайнен Т.Измерение белка-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста, в цервикальном/вагинальном секрете: сравнение с иммуноанализом мембран ROM-check при диагностике разрыва плодных оболочек. Клин Чим Акта. 1993;214(1):73–81. [PubMed] [Google Scholar] 11. Томасино Т., Леви С., Дрейпер М., Нойберт А.Г. Диагностика разрыва плодных оболочек с использованием комбинации моноклональных/поликлональных иммунологических белков. J Reprod Med. 2013;58(5–6):187–194. [PubMed] [Google Scholar] 12. Албайрак М., Оздемир И., Коч О., Анкарали Х., Озен О.Сравнение диагностической эффективности двух быстрых прикроватных иммуноанализов и комбинированной клинической традиционной диагностики разрыва плодных оболочек до родов. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 2011;158(2):179–182. [PubMed] [Google Scholar] 13. Darj E, Lyrenas S. Инсулиноподобный фактор роста, связывающий белок-1, быстрый способ обнаружения амниотической жидкости. Acta Obstet Gynecol Scand. 1998;77(3):295–297. [PubMed] [Google Scholar] 14. Di Renzo GC, Roura LC, Facchinetti F, et al. Рекомендации по ведению спонтанных преждевременных родов: выявление спонтанных преждевременных родов, диагностика преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек и средства профилактики преждевременных родов.J Matern Fetal Neonatal Med. 2011;24(5):659–667. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]15. Guibourdenche J, Luton D, Andre E, Noel M, Porquet D. Быстрое обнаружение белка-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста, и фетального фибронектина в цервико-влагалищных выделениях для диагностики преждевременного разрыва мембраны. Энн Клин Биохим. 1999; 36 (часть 3): 388–390. [PubMed] [Google Scholar] 16. Kubota T, Takeuchi H. Оценка инсулиноподобного фактора роста, связывающего белок-1, в качестве диагностического инструмента для разрыва мембран.J Obstet Gynaecol Res. 1998;24(6):411–417. [PubMed] [Google Scholar] 17. Локвуд С.Дж., Вейн Р., Чиен Д., Гидини А., Альварес М., Берковиц Р.Л. Разрыв плодных оболочек связан с присутствием белка-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста, в вагинальном секрете. Am J Obstet Gynecol. 1994;171(1):146–150. [PubMed] [Google Scholar] 18. Марселин Л., Анселем О., Гибурденш Дж. и др. Сравнение двух прикроватных тестов, проведенных на цервиковагинальной жидкости для диагностики преждевременного разрыва плодных оболочек. J Gynecol Obstet Biol Reprod (Париж) 2011;40(7):651–656.[PubMed] [Google Scholar] 19. Рутанен Э.М., Карккайнен Т.Х., Лехтовирта Дж., Уотила Дж.Т., Хинкула М.К., Хартикайнен А.Л. Оценка экспресс-теста на инсулиноподобный фактор роста, связывающий белок-1, в диагностике разрыва плодных оболочек. Клин Чим Акта. 1996; 253(1–2):91–101. [PubMed] [Google Scholar] 20. Кишида Т., Хирао А., Мацуура Т. и др. Диагностика преждевременного разрыва плодных оболочек с помощью улучшенного набора моноклональных антител к альфа-фетопротеину. Клин Хим. 1995;41(10):1500–1503. [PubMed] [Google Scholar] 21.Кишида Т., Ямада Х., Фурута И. и др. Стойкое обнаружение альфа-фетопротеина во влагалище без явного преждевременного разрыва плодных оболочек. Клинические и химические характеристики. Диагностика плода Тер. 2001;16(5):259–264. [PubMed] [Google Scholar] 22. Кишида Т., Ямада Х., Негиши Х., Сагава Т., Макинода С., Фудзимото С. Диагностика преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек с использованием недавно разработанного набора для тестирования моноклональных антител к альфа-фетопротеину. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 1995;58(1):67–72. [PubMed] [Google Scholar] 23.Рочелсон Б.Л., Ричардсон Д.А., Макри Дж.Н. Экспресс-анализ – возможное применение в диагностике преждевременного разрыва плодных оболочек. Акушерство Гинекол. 1983;62(4):414–418. [PubMed] [Google Scholar] 24. Рохельсон Б.Л., Родке Г., Уайт Р., Брасеро Л., Бейкер Д.А. Экспресс-колориметрический тест на моноклональные антитела к альфа-фетопротеину для диагностики преждевременного разрыва плодных оболочек. Акушерство Гинекол. 1987;69(2):163–166. [PubMed] [Google Scholar] 25. Ямада Х., Кишида Т., Негиши Х. и др. Сравнение улучшенного набора АФП с внутриамниотической инъекцией красителя ПСП в сомнительных случаях преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек.J Obstet Gynaecol Res. 1997;23(3):307–311. [PubMed] [Google Scholar] 26. Роджерс Л.С., Скотт Л., Блок Дж.Э. Точное обнаружение разрыва плодных оболочек по месту оказания медицинской помощи: улучшенные диагностические характеристики с помощью моноклонального/поликлонального иммуноанализа. Clin Med Reprod Health. 2016 В прессе. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]27. Бюллетени комитета ACOG по акушерству Практический бюллетень ACOG № 80: преждевременный разрыв плодных оболочек. Клинические рекомендации для акушеров-гинекологов.Акушерство Гинекол. 2007;109(4):1007–1019. [PubMed] [Google Scholar] 28. Мерсер Б.М., Гольденберг Р.Л., Мейс П.Дж. и соавт. Исследование Preterm Prediction Study: прогноз преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек на основе клинических данных и дополнительных тестов. Сеть отделений медицины матери и плода Национального института здоровья ребенка и человеческого развития. Am J Obstet Gynecol. 2000;183(3):738–745. [PubMed] [Google Scholar] 29. Найе Р.Л., Питерс EC. Причины и последствия преждевременного разрыва плодных оболочек. Ланцет.1980;1(8161):192–194. [PubMed] [Google Scholar] 30. Ananth CV, Oyelese Y, Srinivas N, Yeo L, Vintzileos AM. Преждевременный преждевременный разрыв плодных оболочек, внутриутробная инфекция и маловодие: факторы риска отслойки плаценты. Акушерство Гинекол. 2004;104(1):71–77. [PubMed] [Google Scholar] 31. Коги А.Б., Робинсон Д.Н., Норвиц Э.Р. Современная диагностика и лечение преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек. Преподобный акушер-гинеколог. 2008;1(1):11–22. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]32. Гарите Т.Дж.Лечение преждевременного разрыва плодных оболочек. Клин Перинатол. 2001;28(4):837–847. [PubMed] [Google Scholar] 33. де Хаан Х.Х., Офферманс П.М., Смитс Ф., Схоутен Х.Дж., Питерс Л.Л. Ценность теста на папоротник для подтверждения или опровержения диагноза разрыва плодных оболочек невелика у нерожавших женщин с неспецифическими выделениями из влагалища. Ам Дж. Перинатол. 1994;11(1):46–50. [PubMed] [Google Scholar] 34. Эль-Мессиди А., Кэмерон А. Диагностика преждевременного разрыва плодных оболочек: вдохновение из прошлого и взгляды на будущее.J Obstet Gynaecol Can. 2010;32(6):561–569. [PubMed] [Google Scholar] 35. Фридман М.Л., МакЭлин Т.В. Диагностика разрыва плодных оболочек. Клиническое исследование и обзор литературы. Am J Obstet Gynecol. 1969; 104 (4): 544–550. [PubMed] [Google Scholar] 36. Городески И.Г., Хаймовиц Л., Бахари К.М. Переоценка методов окрашивания рН, папоротника и нильского синего сульфата у беременных с преждевременным разрывом плодных оболочек. J Перинат Мед. 1982;10(6):286–292. [PubMed] [Google Scholar] 37. Рис Э.А., Червенак Ф.А., Моя Ф.Р., Хоббинс Дж.К.Арборизация амниотической жидкости: влияние крови, мекония и изменения рН. Акушерство Гинекол. 1984;64(2):248–250. [PubMed] [Google Scholar] 38. Роузмонд Р.Л., Ломбарди С.Дж., Бем Ф.Х. Ферментация амниотической жидкости, загрязненной кровью. Акушерство Гинекол. 1990; 75 (3 ч. 1): 338–340. [PubMed] [Google Scholar] 39. Смит РП. Техника обнаружения разрыва плодных оболочек. Обзор и предварительный отчет. Акушерство Гинекол. 1976;48(2):172–176. [PubMed] [Google Scholar]точное обнаружение разрыва плодных оболочек на месте оказания медицинской помощи
Med Devices (Auckl).2016; 9: 69–74.
Ross W McQuivey
1 Клинические вопросы, клинические инновации, Солт-Лейк-Сити, Юта, США
Jon E Block
2 Независимый клинический консультант, Сан-Франциско, Калифорния
3
9008 Клинические вопросы , Clinical Innovations, Солт-Лейк-Сити, Юта, США2 Независимый клинический консультант, Сан-Франциско, Калифорния, США
Адрес для переписки: Jon E Block, 2210 Jackson Street, Suite 401, San Francisco, CA 94115, США, тел. + 1 415 775 7947, электронная почта мок.kcolbnojrd@bjАвторское право © McQuivey and Block, 2016 г. Эта работа опубликована и лицензирована Dove Medical Press Limited. Полные условия лицензии доступны по адресу http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/. Некоммерческое использование работы разрешено без какого-либо дополнительного разрешения от Dove Medical Press Limited при условии, что работа правильно указана. Эта статья цитировалась в других статьях в PMC.Abstract
Точная и своевременная диагностика разрыва плодных оболочек крайне важна для информирования и направления вмешательств в зависимости от гестационного возраста для оптимизации перинатальных исходов и снижения риска серьезных осложнений, включая преждевременные роды и инфекции.ROM Plus — это быстрый качественный иммунохроматографический диагностический тест по месту оказания медицинской помощи, в котором используется уникальный метод моноклональных/поликлональных антител для обнаружения двух различных белков, обнаруженных в амниотической жидкости в высоких концентрациях: альфа-фетопротеина и белка, связывающего инсулиноподобный фактор роста. -1. Результаты клинических исследований неизменно продемонстрировали высокую диагностическую точность и рабочие характеристики этого теста в месте оказания медицинской помощи, который превосходит обычные клинические испытания с внешней лабораторной оценкой.Описание, показания к применению, этапы процедуры, а также лабораторная и клиническая характеристика этого анализа представлены в этой статье.
Ключевые слова: ROM Plus ® , преждевременное излитие плодных оболочек, иммуноанализ в месте оказания медицинской помощи, белок-1, связывающий инсулиноподобный фактор роста, IGFBP-1, плацентарный белок 12, PP12, альфа-фетопротеин, АФП
Введение
За последние несколько десятилетий диагностическое тестирование по месту оказания медицинской помощи произвело революцию в медицинском ведении пациентов с неотложными состояниями в условиях неотложной помощи.1,2 Быстрое предоставление результатов может способствовать более обоснованному принятию клинических решений, повышению приверженности пациентов и большей удовлетворенности пациентов, что приводит к лучшим клиническим результатам. На самом деле, международный опрос врачей первичного звена выявил острую клиническую потребность и потребность в различных тестах по месту оказания медицинской помощи, чтобы более своевременно принимать более точные медицинские решения.3
Были предприняты согласованные усилия для разработать и коммерциализировать экспресс-тесты иммунологического анализа разрыва плодных оболочек по месту оказания медицинской помощи, которые точно выявляют белки, обнаруженные в высоких концентрациях в амниотической жидкости, но в крайне низких фоновых концентрациях в шеечно-влагалищном секрете.4 В первом поколении этих тестов использовался метод моноклональных антител, основное внимание уделялось белку-1, связывающему инсулиноподобный фактор роста (IGFBP-1, также известный как плацентарный белок 12), и плацентарному альфа-микроглобулину-1,5–10. уход и более точная диагностика разрыва плодных оболочек привели к недавней разработке комбинированного иммуноанализа моноклональных/поликлональных антител для обнаружения двух разных белков, обнаруженных в амниотической жидкости в высоких концентрациях.11 Описание, показания к применению, этапы процедуры и лабораторные исследования. и клиническая характеристика этого анализа представлены здесь.
Описание устройства
ROM Plus ® (ROM Plus, Clinical Innovations, Солт-Лейк-Сити, Юта, США) — это быстрый качественный иммунохроматографический тест, предназначенный для оказания медицинской помощи (). В этом диагностическом устройстве используется уникальный метод моноклональных/поликлональных антител для обнаружения двух разных белков, обнаруженных в амниотической жидкости в высоких концентрациях. ROM Plus обнаруживает альфа-фетопротеин (AFP) и IGFBP-1. Комбинация IGFBP-1 и AFP была выбрана не только из-за ее надежной исторической поддержки в литературе в качестве идеальных белковых маркеров для амниотической жидкости, но также из-за уникальных характеристик каждого белка.IGFBP-1 синтезируется децидуальной оболочкой плаценты и достигает очень высокого уровня концентрации в амниотической жидкости в начале первого триместра и остается на этом уровне до родов. , достигает пиковой концентрации в конце второго/начале третьего триместра.20–25 Это увеличивает вероятность того, что белки будут обнаружены, особенно у недоношенных пациенток, когда точная диагностика разрыва плодных оболочек является наиболее важной.
ROM Plus ® Тест на разрыв плодных оболочек.
Сокращения: С, контроль; ФП, амниотическая жидкость.
В дополнение к использованию уникального подхода моноклональных/поликлональных антител, ROM Plus предоставляет несколько функций, разработанных для упрощения использования. В отличие от иммуноанализов первого поколения, предназначенных для оказания медицинской помощи, тест-полоска помещена в удобную кассету, которая размещается горизонтально на столешнице, что снижает риск непреднамеренного проливания пробы. Он также содержит встроенный таймер с красителем, который активируется пальцем.Контрольные образцы помещены в стеклянную ампулу внутри пластикового флакона с крышкой-капельницей; они не требуют заморозки или специального обращения. Чтобы активировать контроль, нужно просто разбить стеклянную ампулу внутри флакона, что высвободит лиофилизированный белок и позволит ему смешаться с буферным раствором. Затем пластиковый флакон с дозатором используется для дозирования образца в лунку кассеты ROM Plus.
Показания к применению
Тест на разрыв плодных оболочек ROM Plus — это быстрый качественный иммунохроматографический тест для выявления in vitro амниотической жидкости во вагинальных выделениях беременных женщин с признаками и симптомами разрыва плодных оболочек.Тест обнаруживает АФП и IGFBP-1 из амниотической жидкости в вагинальном секрете. Тест предназначен для использования медицинскими работниками по рецепту, чтобы помочь в обнаружении разрыва плодных оболочек у беременных женщин в сочетании с другими признаками и симптомами.
Детали процедуры
ROM Plus — это автономный набор для тестирования, который дает качественные результаты для определения разрыва плодных оболочек и может быть выполнен в местах оказания медицинской помощи. Для получения результатов ROM Plus не требуется зеркало. Тест неинвазивный, требуется только простой образец вагинального мазка.
иллюстрирует процедурные детали ROM Plus при использовании в качестве теста по месту оказания медицинской помощи. Вкратце, образец жидкости собирают, помещая тампон на 5–7 см во влагалище на 15 секунд. Затем тампон смешивают во флаконе, содержащем 400 мкл буферного раствора, и разбавленный образец наносят на прокладку тест-полоски через лунку для образца на кассете. Затем активируется встроенный таймер, который визуализируется как удобная функция для указания времени теста. Жидкость движется хроматографически и в одном направлении к впитывающей прокладке.
ROM Plus ® Процедурные этапы.
Примечания: ( A ) Стерильный тампон вынимают из упаковки для сбора образца с поверхности влагалища, стараясь не касаться чего-либо до его введения. Тампон вводят во влагалище на глубину 5–7 см, а затем извлекают минимум через 15 секунд. ( B ) Наконечник тампона помещается во флакон и смешивается с буферным раствором. После отламывания кончика тампона по насечке кончик остается во флаконе.Для применения в местах оказания медицинской помощи используется крышка дозатора капель, а наконечник остается в буферном растворе не менее 15 секунд. ( C ) 4–6 капель образца/буферного раствора добавляют в лунку для образца кассеты ROM Plus и запускают таймер. Результаты можно визуализировать через 5–20 минут. ( D ) Если контрольная линия видна (С), результат теста отрицательный. Если видны и контрольная (C), и тестовая линия (AF), результат положительный.Если линии не видны или видна только тестовая линия (AF), результат теста недействителен и должен быть повторен.
Сокращение: AF, амниотическая жидкость.
Во время миграции образец реагирует с моно/поликлональными антителами на мембране тест-полоски. Эти антитела иммунореактивны к белкам IGFBP-1 и AFP, которые являются маркерами амниотической жидкости. Когда мембрана впитает жидкий образец, появится контрольная линия, указывающая на то, что было нанесено достаточное количество образца и устройство работает правильно.
Если образец содержит IGFBP-1 и/или АФП, он связывается с антителами тестовой линии, вызывая их появление и указывая на положительный результат теста. Если образец не содержит IGFBP-1 и/или АФП, будет видна только контрольная линия, что указывает на отрицательный результат.
Доклиническая лабораторная разработка
Анализ ROM Plus прошел валидацию по параметрам линейности, предела обнаружения, точности/воспроизводимости, чувствительности, специфичности и перекрестной реактивности.Эффект «ловушки высокой дозы» был определен для оценки верхнего диапазона обнаружения ROM Plus. Концентрации IGFBP-1 были протестированы до 400 000 нг/мл, а АФП — до 200 000 нг/мл с положительными визуальными результатами для 100% образцов образцов ROM Plus. Нижний предел обнаружения составляет 5 нг/мл для IGFBP-1 и 150 нг/мл для АФП.
Воспроизводимость проверялась в разные дни при шести уровнях амниотической жидкости, добавленной в отрицательный контроль. Анализ проводили на трех партиях ROM Plus для определения визуальных положительных результатов.Два низких положительных результата, два средних положительных результата и два высоких положительных результата были проведены на трех партиях ROM Plus в четыре разных дня. Разницы в активности не заметил.
Для определения интерференции и перекрестной реактивности анализа Тайленол, аспирин и три различных продукта для ванн были добавлены в низкий положительный контроль в конечной концентрации 0,1% без визуальной потери активности. Те же самые продукты для ванн были добавлены в отрицательный контроль и показали отрицательный результат. Кроме того, человеческая сперма, моча и кровь были добавлены в слабоположительные образцы при конечной концентрации 10% без потери активности.Человеческая сперма, моча и кровь также были добавлены в отрицательный контроль и показали отрицательный результат. Анализ IGFBP-1 не дает перекрестных реакций с IGFBP-2, -3 или -4 по результатам вестерн-блоттинга. Наконец, было показано, что ROM Plus дал отрицательный результат при тестировании с образцами, которые были положительными на бактериальный вагиноз и распространенные заболевания, передающиеся половым путем. Все образцы тестировали при pH >4,5.
В Медицинском центре Томаса Джефферсона была проведена внешняя независимая оценка ROM Plus для изучения аналитических и рабочих характеристик теста.Были исследованы чувствительность для обнаружения и стабильность контролей, коэффициент разбавления образцов мазков и титр околоплодных вод и биологических жидкостей, обычно обнаруживаемых во влагалище, кроме амниотической жидкости. ROM Plus продемонстрировал отличные аналитические характеристики и удобные функции. В частности, массоемкость тампона для раствора альбумина с концентрацией 7 г/дл составляла в среднем 79±13 мкл при объеме разбавителя 380 мкл, что указывает на среднее минимальное разведение образцов 18%.Положительный контроль (указанные концентрации; AFP = 600 нг/мл, IGFBP-1 = 20 нг/мл) был положительным до разведения 1:30, что соответствовало заявленной аналитической чувствительности ROM Plus (AFP = 150 нг/мл, IGFBP-1 = 5 нг/мл) после учета разбавления. Кроме того, контроль (с титром 1:8) оставался положительным после 10 дней хранения в холодильнике или в замороженном виде. Амниотическая жидкость, собранная у доношенных пациенток, была положительной с титром 1:3000, в то время как моча у доношенных пациенток была отрицательной.
Клинические диагностические характеристики
Thomasino и соавт.11 провели многоцентровое проспективное обсервационное исследование, чтобы сравнить точность ROM Plus с точностью современной традиционной клинической оценки для диагностики разрыва плодных оболочек.Стандартная клиническая оценка включала исследование в зеркалах на предмет скопления амниотической жидкости, папоротника и изменения pH окружающей среды с использованием нитразина. Разрыв плодных оболочек диагностировали, если наблюдали подтекание жидкости из цервикального зева или при наличии двух из трех условий: скопление жидкости, положительный тест на нитразин или папоротник. Разрыв мембраны был подтвержден при просмотре медицинских записей после родов. У 285 пациенток (15–42 нед гестации) частота ложноположительных результатов теста ROM Plus составила 9%, ложноотрицательных — 0.5%, чувствительность 99% и специфичность 91%, с положительной и отрицательной прогностической ценностью 85% и 99% соответственно. Для сравнения, чувствительность традиционной клинической оценки составила 85%, специфичность 98%, с положительными и отрицательными прогностическими значениями 99% и 77%. Чувствительность Фернинга составила 99%, специфичность 72%, с положительными и отрицательными прогностическими значениями 80% и 99%. Наконец, нитразиновые тесты имели чувствительность 93%, специфичность 83% и положительные и отрицательные прогностические значения 90% и 88%.
Rogers и соавт.26 в одном клиническом центре сравнили диагностические характеристики двух методов, используемых для обнаружения разрыва плодных оболочек у одного и того же пациента. Вагинальные выделения оценивали с помощью обычного папоротникового теста, а также теста ROM Plus у 75 беременных с жалобами на разрыв плодных оболочек. Оба теста сравнивались с аналитическим подтверждением разрыва плодных оболочек с использованием трех внешних лабораторных тестов.Диагностические характеристики в равной степени благоприятствовали тесту ROM Plus по сравнению с тестом папоротника: чувствительность (100% против 77,8%), специфичность (94,8% против 79,3%), положительная прогностическая ценность (75% против 36,8%), отрицательная прогностическая ценность (100% против 95,8%). %) и точность (95,5% против 79,1%).
Обсуждение
Самопроизвольный разрыв плодных оболочек может произойти в любом гестационном возрасте и представляет особенно серьезную клиническую проблему, если он происходит до 37 недель беременности, где он является причиной 20–40% преждевременных родов.27–29 Таким образом, точная и своевременная диагностика разрыва плодных оболочек необходима для информирования и направления вмешательств в зависимости от гестационного возраста для оптимизации перинатальных исходов и снижения риска серьезных осложнений, включая преждевременные роды и инфекции, такие как хориоамнионит и неонатальный сепсис.14,30 ,31 Неправильный диагноз разрыва плодных оболочек (т.е. ложноположительный тест) также может иметь серьезные клинические последствия, такие как начало ненужных акушерских вмешательств, которые могут включать госпитализацию, введение лекарств и даже ятрогенные преждевременные роды.32
При подозрении на разрыв плодных оболочек диагноз обычно ставится с использованием стерильного зеркала для выявления подтекания или скопления амниотической жидкости в сочетании с микроскопическим исследованием собранного образца на наличие папоротника/кристаллизации и определением рН жидкости с нитразиновой тест-бумаги.31,33,34 Хотя этот подход оставался стандартом медицинской помощи на протяжении десятилетий, результаты могут быть сомнительными, особенно когда после ПЗУ прошло более часа.35 Кроме того, осмотр в стерильном зеркале является субъективным и интенсивный и, как было показано, имеет недостаточные диагностические характеристики для точного обнаружения разрыва плодных оболочек.31,36–39
Высокий уровень диагностической точности, достигаемый с помощью ROM Plus, особенно важен в случаях сомнительного разрыва плодных оболочек, поскольку почти у четверти всех пациентов, в конечном итоге диагностированных с разрывом плодных оболочек, нет явных клинических признаков разрыва. мембраны при первичном обращении.34
Высокая чувствительность, стабильно достигаемая с помощью теста ROM Plus в клинических исследованиях, в значительной степени обусловлена уникальным подходом моноклональных/поликлональных антител, при котором поликлональные антитела сочетаются с множественными (8–12) аминокислотами. пептиды, содержащиеся в 259 полноразмерных белковых цепях IGFBP-1, в то время как моноклональные тесты сочетаются с одним сайтом эпитопа.Это может обеспечить преимущество по сравнению с другими доступными в настоящее время экспресс-тестами иммуноанализа, основанными на одном моноклональном антителе. Будущие сравнительные оценки различных иммуноанализов будут необходимы для выяснения любых диагностических и/или процедурных преимуществ различных коммерчески доступных тестов.
В заключение следует отметить, что этот уникальный моноклональный/поликлональный иммуноанализ может быть легко и быстро проведен у постели больного различными лицами, осуществляющими уход, без необходимости использования зеркала.
Благодарности
RWM является сотрудником, а JEB является независимым консультантом Clinical Innovations (Солт-Лейк-Сити, Юта).
Сноски
Вклад авторов
Все авторы внесли свой вклад в разработку концепции, выполнение и составление проекта рукописи, а также обеспечили критический пересмотр рукописи на предмет интеллектуального содержания. Все авторы прочитали и окончательно утвердили версию для публикации. Все авторы согласились нести ответственность за все аспекты работы, обеспечивая надлежащее расследование и решение вопросов, связанных с точностью и достоверностью любой части работы.
Раскрытие информации
Авторы сообщают об отсутствии конфликта интересов в этой работе.
Ссылки
1. Ян У.Р., Ван Акен Х. Тестирование рядом с пациентом – по месту оказания медицинской помощи или по стоимости и удобству? Бр Джей Анаст. 2003;90(4):425–427. [PubMed] [Google Scholar]3. Howick J, Cals JW, Jones C, et al. Текущее и будущее использование тестов по месту оказания медицинской помощи в первичной помощи: международное исследование в Австралии, Бельгии, Нидерландах, Великобритании и США. Открытый БМЖ. 2014;4(8):e005611.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]4. Мариона Ф.Г., Каберо Л. Готовы ли мы к новому взгляду на диагностику преждевременного разрыва плодных оболочек? J Matern Fetal Neonatal Med. 2012;25(4):403–407. [PubMed] [Google Scholar]5. Дорет М., Картье Р., Мирибель Дж. и др. Диагностика преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек на ранних сроках беременности: выявление PAMG-1 и IGFBP-1 в амниотической жидкости с помощью биохимических тестов. Клин Биохим. 2013;46(18):1816–1819. [PubMed] [Google Scholar]6. Eleje GU, Ezugwu EC, Ogunyemi D, et al.Точность и анализ стоимости плацентарного альфа-микроглобулина-1 в диагностике преждевременного разрыва плодных оболочек в условиях сообщества с ограниченными ресурсами. J Obstet Gynaecol Res. 2015;41(1):29–38. [PubMed] [Google Scholar]7. Lee SE, Park JS, Norwitz ER, Kim KW, Park HS, Jun JK. Измерение плацентарного альфа-микроглобулина-1 в шеечно-влагалищных выделениях для диагностики разрыва плодных оболочек. Акушерство Гинекол. 2007;109(3):634–640. [PubMed] [Google Scholar]8. Паласио М., Кунерт М., Бергер Р., Лариос К.Л., Марселин Л.Метаанализ исследований биохимических маркерных тестов для диагностики преждевременного разрыва плодных оболочек: сравнение показателей эффективности. BMC Беременность Роды. 2014;14:183. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]9. Рутанен Э.М., Бон Х., Сеппала М. Радиоиммуноанализ плацентарного белка 12: уровни в амниотической жидкости, пуповинной крови и сыворотке здоровых взрослых, беременных женщин и пациентов с трофобластической болезнью. Am J Obstet Gynecol. 1982;144(4):460–463. [PubMed] [Google Scholar] 10. Рутанен Э.М., Пеконен Ф., Карккайнен Т.Измерение белка-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста, в цервикальном/вагинальном секрете: сравнение с иммуноанализом мембран ROM-check при диагностике разрыва плодных оболочек. Клин Чим Акта. 1993;214(1):73–81. [PubMed] [Google Scholar] 11. Томасино Т., Леви С., Дрейпер М., Нойберт А.Г. Диагностика разрыва плодных оболочек с использованием комбинации моноклональных/поликлональных иммунологических белков. J Reprod Med. 2013;58(5–6):187–194. [PubMed] [Google Scholar] 12. Албайрак М., Оздемир И., Коч О., Анкарали Х., Озен О.Сравнение диагностической эффективности двух быстрых прикроватных иммуноанализов и комбинированной клинической традиционной диагностики разрыва плодных оболочек до родов. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 2011;158(2):179–182. [PubMed] [Google Scholar] 13. Darj E, Lyrenas S. Инсулиноподобный фактор роста, связывающий белок-1, быстрый способ обнаружения амниотической жидкости. Acta Obstet Gynecol Scand. 1998;77(3):295–297. [PubMed] [Google Scholar] 14. Di Renzo GC, Roura LC, Facchinetti F, et al. Рекомендации по ведению спонтанных преждевременных родов: выявление спонтанных преждевременных родов, диагностика преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек и средства профилактики преждевременных родов.J Matern Fetal Neonatal Med. 2011;24(5):659–667. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]15. Guibourdenche J, Luton D, Andre E, Noel M, Porquet D. Быстрое обнаружение белка-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста, и фетального фибронектина в цервико-влагалищных выделениях для диагностики преждевременного разрыва мембраны. Энн Клин Биохим. 1999; 36 (часть 3): 388–390. [PubMed] [Google Scholar] 16. Kubota T, Takeuchi H. Оценка инсулиноподобного фактора роста, связывающего белок-1, в качестве диагностического инструмента для разрыва мембран.J Obstet Gynaecol Res. 1998;24(6):411–417. [PubMed] [Google Scholar] 17. Локвуд С.Дж., Вейн Р., Чиен Д., Гидини А., Альварес М., Берковиц Р.Л. Разрыв плодных оболочек связан с присутствием белка-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста, в вагинальном секрете. Am J Obstet Gynecol. 1994;171(1):146–150. [PubMed] [Google Scholar] 18. Марселин Л., Анселем О., Гибурденш Дж. и др. Сравнение двух прикроватных тестов, проведенных на цервиковагинальной жидкости для диагностики преждевременного разрыва плодных оболочек. J Gynecol Obstet Biol Reprod (Париж) 2011;40(7):651–656.[PubMed] [Google Scholar] 19. Рутанен Э.М., Карккайнен Т.Х., Лехтовирта Дж., Уотила Дж.Т., Хинкула М.К., Хартикайнен А.Л. Оценка экспресс-теста на инсулиноподобный фактор роста, связывающий белок-1, в диагностике разрыва плодных оболочек. Клин Чим Акта. 1996; 253(1–2):91–101. [PubMed] [Google Scholar] 20. Кишида Т., Хирао А., Мацуура Т. и др. Диагностика преждевременного разрыва плодных оболочек с помощью улучшенного набора моноклональных антител к альфа-фетопротеину. Клин Хим. 1995;41(10):1500–1503. [PubMed] [Google Scholar] 21.Кишида Т., Ямада Х., Фурута И. и др. Стойкое обнаружение альфа-фетопротеина во влагалище без явного преждевременного разрыва плодных оболочек. Клинические и химические характеристики. Диагностика плода Тер. 2001;16(5):259–264. [PubMed] [Google Scholar] 22. Кишида Т., Ямада Х., Негиши Х., Сагава Т., Макинода С., Фудзимото С. Диагностика преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек с использованием недавно разработанного набора для тестирования моноклональных антител к альфа-фетопротеину. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 1995;58(1):67–72. [PubMed] [Google Scholar] 23.Рочелсон Б.Л., Ричардсон Д.А., Макри Дж.Н. Экспресс-анализ – возможное применение в диагностике преждевременного разрыва плодных оболочек. Акушерство Гинекол. 1983;62(4):414–418. [PubMed] [Google Scholar] 24. Рохельсон Б.Л., Родке Г., Уайт Р., Брасеро Л., Бейкер Д.А. Экспресс-колориметрический тест на моноклональные антитела к альфа-фетопротеину для диагностики преждевременного разрыва плодных оболочек. Акушерство Гинекол. 1987;69(2):163–166. [PubMed] [Google Scholar] 25. Ямада Х., Кишида Т., Негиши Х. и др. Сравнение улучшенного набора АФП с внутриамниотической инъекцией красителя ПСП в сомнительных случаях преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек.J Obstet Gynaecol Res. 1997;23(3):307–311. [PubMed] [Google Scholar] 26. Роджерс Л.С., Скотт Л., Блок Дж.Э. Точное обнаружение разрыва плодных оболочек по месту оказания медицинской помощи: улучшенные диагностические характеристики с помощью моноклонального/поликлонального иммуноанализа. Clin Med Reprod Health. 2016 В прессе. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]27. Бюллетени комитета ACOG по акушерству Практический бюллетень ACOG № 80: преждевременный разрыв плодных оболочек. Клинические рекомендации для акушеров-гинекологов.Акушерство Гинекол. 2007;109(4):1007–1019. [PubMed] [Google Scholar] 28. Мерсер Б.М., Гольденберг Р.Л., Мейс П.Дж. и соавт. Исследование Preterm Prediction Study: прогноз преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек на основе клинических данных и дополнительных тестов. Сеть отделений медицины матери и плода Национального института здоровья ребенка и человеческого развития. Am J Obstet Gynecol. 2000;183(3):738–745. [PubMed] [Google Scholar] 29. Найе Р.Л., Питерс EC. Причины и последствия преждевременного разрыва плодных оболочек. Ланцет.1980;1(8161):192–194. [PubMed] [Google Scholar] 30. Ananth CV, Oyelese Y, Srinivas N, Yeo L, Vintzileos AM. Преждевременный преждевременный разрыв плодных оболочек, внутриутробная инфекция и маловодие: факторы риска отслойки плаценты. Акушерство Гинекол. 2004;104(1):71–77. [PubMed] [Google Scholar] 31. Коги А.Б., Робинсон Д.Н., Норвиц Э.Р. Современная диагностика и лечение преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек. Преподобный акушер-гинеколог. 2008;1(1):11–22. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]32. Гарите Т.Дж.Лечение преждевременного разрыва плодных оболочек. Клин Перинатол. 2001;28(4):837–847. [PubMed] [Google Scholar] 33. де Хаан Х.Х., Офферманс П.М., Смитс Ф., Схоутен Х.Дж., Питерс Л.Л. Ценность теста на папоротник для подтверждения или опровержения диагноза разрыва плодных оболочек невелика у нерожавших женщин с неспецифическими выделениями из влагалища. Ам Дж. Перинатол. 1994;11(1):46–50. [PubMed] [Google Scholar] 34. Эль-Мессиди А., Кэмерон А. Диагностика преждевременного разрыва плодных оболочек: вдохновение из прошлого и взгляды на будущее.J Obstet Gynaecol Can. 2010;32(6):561–569. [PubMed] [Google Scholar] 35. Фридман М.Л., МакЭлин Т.В. Диагностика разрыва плодных оболочек. Клиническое исследование и обзор литературы. Am J Obstet Gynecol. 1969; 104 (4): 544–550. [PubMed] [Google Scholar] 36. Городески И.Г., Хаймовиц Л., Бахари К.М. Переоценка методов окрашивания рН, папоротника и нильского синего сульфата у беременных с преждевременным разрывом плодных оболочек. J Перинат Мед. 1982;10(6):286–292. [PubMed] [Google Scholar] 37. Рис Э.А., Червенак Ф.А., Моя Ф.Р., Хоббинс Дж.К.Арборизация амниотической жидкости: влияние крови, мекония и изменения рН. Акушерство Гинекол. 1984;64(2):248–250. [PubMed] [Google Scholar] 38. Роузмонд Р.Л., Ломбарди С.Дж., Бем Ф.Х. Ферментация амниотической жидкости, загрязненной кровью. Акушерство Гинекол. 1990; 75 (3 ч. 1): 338–340. [PubMed] [Google Scholar] 39. Смит РП. Техника обнаружения разрыва плодных оболочек. Обзор и предварительный отчет. Акушерство Гинекол. 1976;48(2):172–176. [PubMed] [Google Scholar]точное обнаружение разрыва плодных оболочек на месте оказания медицинской помощи
Med Devices (Auckl).2016; 9: 69–74.
Ross W McQuivey
1 Клинические вопросы, клинические инновации, Солт-Лейк-Сити, Юта, США
Jon E Block
2 Независимый клинический консультант, Сан-Франциско, Калифорния
3
9008 Клинические вопросы , Clinical Innovations, Солт-Лейк-Сити, Юта, США2 Независимый клинический консультант, Сан-Франциско, Калифорния, США
Адрес для переписки: Jon E Block, 2210 Jackson Street, Suite 401, San Francisco, CA 94115, США, тел. + 1 415 775 7947, электронная почта мок.kcolbnojrd@bjАвторское право © McQuivey and Block, 2016 г. Эта работа опубликована и лицензирована Dove Medical Press Limited. Полные условия лицензии доступны по адресу http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/. Некоммерческое использование работы разрешено без какого-либо дополнительного разрешения от Dove Medical Press Limited при условии, что работа правильно указана. Эта статья цитировалась в других статьях в PMC.Abstract
Точная и своевременная диагностика разрыва плодных оболочек крайне важна для информирования и направления вмешательств в зависимости от гестационного возраста для оптимизации перинатальных исходов и снижения риска серьезных осложнений, включая преждевременные роды и инфекции.ROM Plus — это быстрый качественный иммунохроматографический диагностический тест по месту оказания медицинской помощи, в котором используется уникальный метод моноклональных/поликлональных антител для обнаружения двух различных белков, обнаруженных в амниотической жидкости в высоких концентрациях: альфа-фетопротеина и белка, связывающего инсулиноподобный фактор роста. -1. Результаты клинических исследований неизменно продемонстрировали высокую диагностическую точность и рабочие характеристики этого теста в месте оказания медицинской помощи, который превосходит обычные клинические испытания с внешней лабораторной оценкой.Описание, показания к применению, этапы процедуры, а также лабораторная и клиническая характеристика этого анализа представлены в этой статье.
Ключевые слова: ROM Plus ® , преждевременное излитие плодных оболочек, иммуноанализ в месте оказания медицинской помощи, белок-1, связывающий инсулиноподобный фактор роста, IGFBP-1, плацентарный белок 12, PP12, альфа-фетопротеин, АФП
Введение
За последние несколько десятилетий диагностическое тестирование по месту оказания медицинской помощи произвело революцию в медицинском ведении пациентов с неотложными состояниями в условиях неотложной помощи.1,2 Быстрое предоставление результатов может способствовать более обоснованному принятию клинических решений, повышению приверженности пациентов и большей удовлетворенности пациентов, что приводит к лучшим клиническим результатам. На самом деле, международный опрос врачей первичного звена выявил острую клиническую потребность и потребность в различных тестах по месту оказания медицинской помощи, чтобы более своевременно принимать более точные медицинские решения.3
Были предприняты согласованные усилия для разработать и коммерциализировать экспресс-тесты иммунологического анализа разрыва плодных оболочек по месту оказания медицинской помощи, которые точно выявляют белки, обнаруженные в высоких концентрациях в амниотической жидкости, но в крайне низких фоновых концентрациях в шеечно-влагалищном секрете.4 В первом поколении этих тестов использовался метод моноклональных антител, основное внимание уделялось белку-1, связывающему инсулиноподобный фактор роста (IGFBP-1, также известный как плацентарный белок 12), и плацентарному альфа-микроглобулину-1,5–10. уход и более точная диагностика разрыва плодных оболочек привели к недавней разработке комбинированного иммуноанализа моноклональных/поликлональных антител для обнаружения двух разных белков, обнаруженных в амниотической жидкости в высоких концентрациях.11 Описание, показания к применению, этапы процедуры и лабораторные исследования. и клиническая характеристика этого анализа представлены здесь.
Описание устройства
ROM Plus ® (ROM Plus, Clinical Innovations, Солт-Лейк-Сити, Юта, США) — это быстрый качественный иммунохроматографический тест, предназначенный для оказания медицинской помощи (). В этом диагностическом устройстве используется уникальный метод моноклональных/поликлональных антител для обнаружения двух разных белков, обнаруженных в амниотической жидкости в высоких концентрациях. ROM Plus обнаруживает альфа-фетопротеин (AFP) и IGFBP-1. Комбинация IGFBP-1 и AFP была выбрана не только из-за ее надежной исторической поддержки в литературе в качестве идеальных белковых маркеров для амниотической жидкости, но также из-за уникальных характеристик каждого белка.IGFBP-1 синтезируется децидуальной оболочкой плаценты и достигает очень высокого уровня концентрации в амниотической жидкости в начале первого триместра и остается на этом уровне до родов. , достигает пиковой концентрации в конце второго/начале третьего триместра.20–25 Это увеличивает вероятность того, что белки будут обнаружены, особенно у недоношенных пациенток, когда точная диагностика разрыва плодных оболочек является наиболее важной.
ROM Plus ® Тест на разрыв плодных оболочек.
Сокращения: С, контроль; ФП, амниотическая жидкость.
В дополнение к использованию уникального подхода моноклональных/поликлональных антител, ROM Plus предоставляет несколько функций, разработанных для упрощения использования. В отличие от иммуноанализов первого поколения, предназначенных для оказания медицинской помощи, тест-полоска помещена в удобную кассету, которая размещается горизонтально на столешнице, что снижает риск непреднамеренного проливания пробы. Он также содержит встроенный таймер с красителем, который активируется пальцем.Контрольные образцы помещены в стеклянную ампулу внутри пластикового флакона с крышкой-капельницей; они не требуют заморозки или специального обращения. Чтобы активировать контроль, нужно просто разбить стеклянную ампулу внутри флакона, что высвободит лиофилизированный белок и позволит ему смешаться с буферным раствором. Затем пластиковый флакон с дозатором используется для дозирования образца в лунку кассеты ROM Plus.
Показания к применению
Тест на разрыв плодных оболочек ROM Plus — это быстрый качественный иммунохроматографический тест для выявления in vitro амниотической жидкости во вагинальных выделениях беременных женщин с признаками и симптомами разрыва плодных оболочек.Тест обнаруживает АФП и IGFBP-1 из амниотической жидкости в вагинальном секрете. Тест предназначен для использования медицинскими работниками по рецепту, чтобы помочь в обнаружении разрыва плодных оболочек у беременных женщин в сочетании с другими признаками и симптомами.
Детали процедуры
ROM Plus — это автономный набор для тестирования, который дает качественные результаты для определения разрыва плодных оболочек и может быть выполнен в местах оказания медицинской помощи. Для получения результатов ROM Plus не требуется зеркало. Тест неинвазивный, требуется только простой образец вагинального мазка.
иллюстрирует процедурные детали ROM Plus при использовании в качестве теста по месту оказания медицинской помощи. Вкратце, образец жидкости собирают, помещая тампон на 5–7 см во влагалище на 15 секунд. Затем тампон смешивают во флаконе, содержащем 400 мкл буферного раствора, и разбавленный образец наносят на прокладку тест-полоски через лунку для образца на кассете. Затем активируется встроенный таймер, который визуализируется как удобная функция для указания времени теста. Жидкость движется хроматографически и в одном направлении к впитывающей прокладке.
ROM Plus ® Процедурные этапы.
Примечания: ( A ) Стерильный тампон вынимают из упаковки для сбора образца с поверхности влагалища, стараясь не касаться чего-либо до его введения. Тампон вводят во влагалище на глубину 5–7 см, а затем извлекают минимум через 15 секунд. ( B ) Наконечник тампона помещается во флакон и смешивается с буферным раствором. После отламывания кончика тампона по насечке кончик остается во флаконе.Для применения в местах оказания медицинской помощи используется крышка дозатора капель, а наконечник остается в буферном растворе не менее 15 секунд. ( C ) 4–6 капель образца/буферного раствора добавляют в лунку для образца кассеты ROM Plus и запускают таймер. Результаты можно визуализировать через 5–20 минут. ( D ) Если контрольная линия видна (С), результат теста отрицательный. Если видны и контрольная (C), и тестовая линия (AF), результат положительный.Если линии не видны или видна только тестовая линия (AF), результат теста недействителен и должен быть повторен.
Сокращение: AF, амниотическая жидкость.
Во время миграции образец реагирует с моно/поликлональными антителами на мембране тест-полоски. Эти антитела иммунореактивны к белкам IGFBP-1 и AFP, которые являются маркерами амниотической жидкости. Когда мембрана впитает жидкий образец, появится контрольная линия, указывающая на то, что было нанесено достаточное количество образца и устройство работает правильно.
Если образец содержит IGFBP-1 и/или АФП, он связывается с антителами тестовой линии, вызывая их появление и указывая на положительный результат теста. Если образец не содержит IGFBP-1 и/или АФП, будет видна только контрольная линия, что указывает на отрицательный результат.
Доклиническая лабораторная разработка
Анализ ROM Plus прошел валидацию по параметрам линейности, предела обнаружения, точности/воспроизводимости, чувствительности, специфичности и перекрестной реактивности.Эффект «ловушки высокой дозы» был определен для оценки верхнего диапазона обнаружения ROM Plus. Концентрации IGFBP-1 были протестированы до 400 000 нг/мл, а АФП — до 200 000 нг/мл с положительными визуальными результатами для 100% образцов образцов ROM Plus. Нижний предел обнаружения составляет 5 нг/мл для IGFBP-1 и 150 нг/мл для АФП.
Воспроизводимость проверялась в разные дни при шести уровнях амниотической жидкости, добавленной в отрицательный контроль. Анализ проводили на трех партиях ROM Plus для определения визуальных положительных результатов.Два низких положительных результата, два средних положительных результата и два высоких положительных результата были проведены на трех партиях ROM Plus в четыре разных дня. Разницы в активности не заметил.
Для определения интерференции и перекрестной реактивности анализа Тайленол, аспирин и три различных продукта для ванн были добавлены в низкий положительный контроль в конечной концентрации 0,1% без визуальной потери активности. Те же самые продукты для ванн были добавлены в отрицательный контроль и показали отрицательный результат. Кроме того, человеческая сперма, моча и кровь были добавлены в слабоположительные образцы при конечной концентрации 10% без потери активности.Человеческая сперма, моча и кровь также были добавлены в отрицательный контроль и показали отрицательный результат. Анализ IGFBP-1 не дает перекрестных реакций с IGFBP-2, -3 или -4 по результатам вестерн-блоттинга. Наконец, было показано, что ROM Plus дал отрицательный результат при тестировании с образцами, которые были положительными на бактериальный вагиноз и распространенные заболевания, передающиеся половым путем. Все образцы тестировали при pH >4,5.
В Медицинском центре Томаса Джефферсона была проведена внешняя независимая оценка ROM Plus для изучения аналитических и рабочих характеристик теста.Были исследованы чувствительность для обнаружения и стабильность контролей, коэффициент разбавления образцов мазков и титр околоплодных вод и биологических жидкостей, обычно обнаруживаемых во влагалище, кроме амниотической жидкости. ROM Plus продемонстрировал отличные аналитические характеристики и удобные функции. В частности, массоемкость тампона для раствора альбумина с концентрацией 7 г/дл составляла в среднем 79±13 мкл при объеме разбавителя 380 мкл, что указывает на среднее минимальное разведение образцов 18%.Положительный контроль (указанные концентрации; AFP = 600 нг/мл, IGFBP-1 = 20 нг/мл) был положительным до разведения 1:30, что соответствовало заявленной аналитической чувствительности ROM Plus (AFP = 150 нг/мл, IGFBP-1 = 5 нг/мл) после учета разбавления. Кроме того, контроль (с титром 1:8) оставался положительным после 10 дней хранения в холодильнике или в замороженном виде. Амниотическая жидкость, собранная у доношенных пациенток, была положительной с титром 1:3000, в то время как моча у доношенных пациенток была отрицательной.
Клинические диагностические характеристики
Thomasino и соавт.11 провели многоцентровое проспективное обсервационное исследование, чтобы сравнить точность ROM Plus с точностью современной традиционной клинической оценки для диагностики разрыва плодных оболочек.Стандартная клиническая оценка включала исследование в зеркалах на предмет скопления амниотической жидкости, папоротника и изменения pH окружающей среды с использованием нитразина. Разрыв плодных оболочек диагностировали, если наблюдали подтекание жидкости из цервикального зева или при наличии двух из трех условий: скопление жидкости, положительный тест на нитразин или папоротник. Разрыв мембраны был подтвержден при просмотре медицинских записей после родов. У 285 пациенток (15–42 нед гестации) частота ложноположительных результатов теста ROM Plus составила 9%, ложноотрицательных — 0.5%, чувствительность 99% и специфичность 91%, с положительной и отрицательной прогностической ценностью 85% и 99% соответственно. Для сравнения, чувствительность традиционной клинической оценки составила 85%, специфичность 98%, с положительными и отрицательными прогностическими значениями 99% и 77%. Чувствительность Фернинга составила 99%, специфичность 72%, с положительными и отрицательными прогностическими значениями 80% и 99%. Наконец, нитразиновые тесты имели чувствительность 93%, специфичность 83% и положительные и отрицательные прогностические значения 90% и 88%.
Rogers и соавт.26 в одном клиническом центре сравнили диагностические характеристики двух методов, используемых для обнаружения разрыва плодных оболочек у одного и того же пациента. Вагинальные выделения оценивали с помощью обычного папоротникового теста, а также теста ROM Plus у 75 беременных с жалобами на разрыв плодных оболочек. Оба теста сравнивались с аналитическим подтверждением разрыва плодных оболочек с использованием трех внешних лабораторных тестов.Диагностические характеристики в равной степени благоприятствовали тесту ROM Plus по сравнению с тестом папоротника: чувствительность (100% против 77,8%), специфичность (94,8% против 79,3%), положительная прогностическая ценность (75% против 36,8%), отрицательная прогностическая ценность (100% против 95,8%). %) и точность (95,5% против 79,1%).
Обсуждение
Самопроизвольный разрыв плодных оболочек может произойти в любом гестационном возрасте и представляет особенно серьезную клиническую проблему, если он происходит до 37 недель беременности, где он является причиной 20–40% преждевременных родов.27–29 Таким образом, точная и своевременная диагностика разрыва плодных оболочек необходима для информирования и направления вмешательств в зависимости от гестационного возраста для оптимизации перинатальных исходов и снижения риска серьезных осложнений, включая преждевременные роды и инфекции, такие как хориоамнионит и неонатальный сепсис.14,30 ,31 Неправильный диагноз разрыва плодных оболочек (т.е. ложноположительный тест) также может иметь серьезные клинические последствия, такие как начало ненужных акушерских вмешательств, которые могут включать госпитализацию, введение лекарств и даже ятрогенные преждевременные роды.32
При подозрении на разрыв плодных оболочек диагноз обычно ставится с использованием стерильного зеркала для выявления подтекания или скопления амниотической жидкости в сочетании с микроскопическим исследованием собранного образца на наличие папоротника/кристаллизации и определением рН жидкости с нитразиновой тест-бумаги.31,33,34 Хотя этот подход оставался стандартом медицинской помощи на протяжении десятилетий, результаты могут быть сомнительными, особенно когда после ПЗУ прошло более часа.35 Кроме того, осмотр в стерильном зеркале является субъективным и интенсивный и, как было показано, имеет недостаточные диагностические характеристики для точного обнаружения разрыва плодных оболочек.31,36–39
Высокий уровень диагностической точности, достигаемый с помощью ROM Plus, особенно важен в случаях сомнительного разрыва плодных оболочек, поскольку почти у четверти всех пациентов, в конечном итоге диагностированных с разрывом плодных оболочек, нет явных клинических признаков разрыва. мембраны при первичном обращении.34
Высокая чувствительность, стабильно достигаемая с помощью теста ROM Plus в клинических исследованиях, в значительной степени обусловлена уникальным подходом моноклональных/поликлональных антител, при котором поликлональные антитела сочетаются с множественными (8–12) аминокислотами. пептиды, содержащиеся в 259 полноразмерных белковых цепях IGFBP-1, в то время как моноклональные тесты сочетаются с одним сайтом эпитопа.Это может обеспечить преимущество по сравнению с другими доступными в настоящее время экспресс-тестами иммуноанализа, основанными на одном моноклональном антителе. Будущие сравнительные оценки различных иммуноанализов будут необходимы для выяснения любых диагностических и/или процедурных преимуществ различных коммерчески доступных тестов.
В заключение следует отметить, что этот уникальный моноклональный/поликлональный иммуноанализ может быть легко и быстро проведен у постели больного различными лицами, осуществляющими уход, без необходимости использования зеркала.
Благодарности
RWM является сотрудником, а JEB является независимым консультантом Clinical Innovations (Солт-Лейк-Сити, Юта).
Сноски
Вклад авторов
Все авторы внесли свой вклад в разработку концепции, выполнение и составление проекта рукописи, а также обеспечили критический пересмотр рукописи на предмет интеллектуального содержания. Все авторы прочитали и окончательно утвердили версию для публикации. Все авторы согласились нести ответственность за все аспекты работы, обеспечивая надлежащее расследование и решение вопросов, связанных с точностью и достоверностью любой части работы.
Раскрытие информации
Авторы сообщают об отсутствии конфликта интересов в этой работе.
Ссылки
1. Ян У.Р., Ван Акен Х. Тестирование рядом с пациентом – по месту оказания медицинской помощи или по стоимости и удобству? Бр Джей Анаст. 2003;90(4):425–427. [PubMed] [Google Scholar]3. Howick J, Cals JW, Jones C, et al. Текущее и будущее использование тестов по месту оказания медицинской помощи в первичной помощи: международное исследование в Австралии, Бельгии, Нидерландах, Великобритании и США. Открытый БМЖ. 2014;4(8):e005611.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]4. Мариона Ф.Г., Каберо Л. Готовы ли мы к новому взгляду на диагностику преждевременного разрыва плодных оболочек? J Matern Fetal Neonatal Med. 2012;25(4):403–407. [PubMed] [Google Scholar]5. Дорет М., Картье Р., Мирибель Дж. и др. Диагностика преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек на ранних сроках беременности: выявление PAMG-1 и IGFBP-1 в амниотической жидкости с помощью биохимических тестов. Клин Биохим. 2013;46(18):1816–1819. [PubMed] [Google Scholar]6. Eleje GU, Ezugwu EC, Ogunyemi D, et al.Точность и анализ стоимости плацентарного альфа-микроглобулина-1 в диагностике преждевременного разрыва плодных оболочек в условиях сообщества с ограниченными ресурсами. J Obstet Gynaecol Res. 2015;41(1):29–38. [PubMed] [Google Scholar]7. Lee SE, Park JS, Norwitz ER, Kim KW, Park HS, Jun JK. Измерение плацентарного альфа-микроглобулина-1 в шеечно-влагалищных выделениях для диагностики разрыва плодных оболочек. Акушерство Гинекол. 2007;109(3):634–640. [PubMed] [Google Scholar]8. Паласио М., Кунерт М., Бергер Р., Лариос К.Л., Марселин Л.Метаанализ исследований биохимических маркерных тестов для диагностики преждевременного разрыва плодных оболочек: сравнение показателей эффективности. BMC Беременность Роды. 2014;14:183. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]9. Рутанен Э.М., Бон Х., Сеппала М. Радиоиммуноанализ плацентарного белка 12: уровни в амниотической жидкости, пуповинной крови и сыворотке здоровых взрослых, беременных женщин и пациентов с трофобластической болезнью. Am J Obstet Gynecol. 1982;144(4):460–463. [PubMed] [Google Scholar] 10. Рутанен Э.М., Пеконен Ф., Карккайнен Т.Измерение белка-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста, в цервикальном/вагинальном секрете: сравнение с иммуноанализом мембран ROM-check при диагностике разрыва плодных оболочек. Клин Чим Акта. 1993;214(1):73–81. [PubMed] [Google Scholar] 11. Томасино Т., Леви С., Дрейпер М., Нойберт А.Г. Диагностика разрыва плодных оболочек с использованием комбинации моноклональных/поликлональных иммунологических белков. J Reprod Med. 2013;58(5–6):187–194. [PubMed] [Google Scholar] 12. Албайрак М., Оздемир И., Коч О., Анкарали Х., Озен О.Сравнение диагностической эффективности двух быстрых прикроватных иммуноанализов и комбинированной клинической традиционной диагностики разрыва плодных оболочек до родов. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 2011;158(2):179–182. [PubMed] [Google Scholar] 13. Darj E, Lyrenas S. Инсулиноподобный фактор роста, связывающий белок-1, быстрый способ обнаружения амниотической жидкости. Acta Obstet Gynecol Scand. 1998;77(3):295–297. [PubMed] [Google Scholar] 14. Di Renzo GC, Roura LC, Facchinetti F, et al. Рекомендации по ведению спонтанных преждевременных родов: выявление спонтанных преждевременных родов, диагностика преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек и средства профилактики преждевременных родов.J Matern Fetal Neonatal Med. 2011;24(5):659–667. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]15. Guibourdenche J, Luton D, Andre E, Noel M, Porquet D. Быстрое обнаружение белка-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста, и фетального фибронектина в цервико-влагалищных выделениях для диагностики преждевременного разрыва мембраны. Энн Клин Биохим. 1999; 36 (часть 3): 388–390. [PubMed] [Google Scholar] 16. Kubota T, Takeuchi H. Оценка инсулиноподобного фактора роста, связывающего белок-1, в качестве диагностического инструмента для разрыва мембран.J Obstet Gynaecol Res. 1998;24(6):411–417. [PubMed] [Google Scholar] 17. Локвуд С.Дж., Вейн Р., Чиен Д., Гидини А., Альварес М., Берковиц Р.Л. Разрыв плодных оболочек связан с присутствием белка-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста, в вагинальном секрете. Am J Obstet Gynecol. 1994;171(1):146–150. [PubMed] [Google Scholar] 18. Марселин Л., Анселем О., Гибурденш Дж. и др. Сравнение двух прикроватных тестов, проведенных на цервиковагинальной жидкости для диагностики преждевременного разрыва плодных оболочек. J Gynecol Obstet Biol Reprod (Париж) 2011;40(7):651–656.[PubMed] [Google Scholar] 19. Рутанен Э.М., Карккайнен Т.Х., Лехтовирта Дж., Уотила Дж.Т., Хинкула М.К., Хартикайнен А.Л. Оценка экспресс-теста на инсулиноподобный фактор роста, связывающий белок-1, в диагностике разрыва плодных оболочек. Клин Чим Акта. 1996; 253(1–2):91–101. [PubMed] [Google Scholar] 20. Кишида Т., Хирао А., Мацуура Т. и др. Диагностика преждевременного разрыва плодных оболочек с помощью улучшенного набора моноклональных антител к альфа-фетопротеину. Клин Хим. 1995;41(10):1500–1503. [PubMed] [Google Scholar] 21.Кишида Т., Ямада Х., Фурута И. и др. Стойкое обнаружение альфа-фетопротеина во влагалище без явного преждевременного разрыва плодных оболочек. Клинические и химические характеристики. Диагностика плода Тер. 2001;16(5):259–264. [PubMed] [Google Scholar] 22. Кишида Т., Ямада Х., Негиши Х., Сагава Т., Макинода С., Фудзимото С. Диагностика преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек с использованием недавно разработанного набора для тестирования моноклональных антител к альфа-фетопротеину. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 1995;58(1):67–72. [PubMed] [Google Scholar] 23.Рочелсон Б.Л., Ричардсон Д.А., Макри Дж.Н. Экспресс-анализ – возможное применение в диагностике преждевременного разрыва плодных оболочек. Акушерство Гинекол. 1983;62(4):414–418. [PubMed] [Google Scholar] 24. Рохельсон Б.Л., Родке Г., Уайт Р., Брасеро Л., Бейкер Д.А. Экспресс-колориметрический тест на моноклональные антитела к альфа-фетопротеину для диагностики преждевременного разрыва плодных оболочек. Акушерство Гинекол. 1987;69(2):163–166. [PubMed] [Google Scholar] 25. Ямада Х., Кишида Т., Негиши Х. и др. Сравнение улучшенного набора АФП с внутриамниотической инъекцией красителя ПСП в сомнительных случаях преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек.J Obstet Gynaecol Res. 1997;23(3):307–311. [PubMed] [Google Scholar] 26. Роджерс Л.С., Скотт Л., Блок Дж.Э. Точное обнаружение разрыва плодных оболочек по месту оказания медицинской помощи: улучшенные диагностические характеристики с помощью моноклонального/поликлонального иммуноанализа. Clin Med Reprod Health. 2016 В прессе. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]27. Бюллетени комитета ACOG по акушерству Практический бюллетень ACOG № 80: преждевременный разрыв плодных оболочек. Клинические рекомендации для акушеров-гинекологов.Акушерство Гинекол. 2007;109(4):1007–1019. [PubMed] [Google Scholar] 28. Мерсер Б.М., Гольденберг Р.Л., Мейс П.Дж. и соавт. Исследование Preterm Prediction Study: прогноз преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек на основе клинических данных и дополнительных тестов. Сеть отделений медицины матери и плода Национального института здоровья ребенка и человеческого развития. Am J Obstet Gynecol. 2000;183(3):738–745. [PubMed] [Google Scholar] 29. Найе Р.Л., Питерс EC. Причины и последствия преждевременного разрыва плодных оболочек. Ланцет.1980;1(8161):192–194. [PubMed] [Google Scholar] 30. Ananth CV, Oyelese Y, Srinivas N, Yeo L, Vintzileos AM. Преждевременный преждевременный разрыв плодных оболочек, внутриутробная инфекция и маловодие: факторы риска отслойки плаценты. Акушерство Гинекол. 2004;104(1):71–77. [PubMed] [Google Scholar] 31. Коги А.Б., Робинсон Д.Н., Норвиц Э.Р. Современная диагностика и лечение преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек. Преподобный акушер-гинеколог. 2008;1(1):11–22. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]32. Гарите Т.Дж.Лечение преждевременного разрыва плодных оболочек. Клин Перинатол. 2001;28(4):837–847. [PubMed] [Google Scholar] 33. де Хаан Х.Х., Офферманс П.М., Смитс Ф., Схоутен Х.Дж., Питерс Л.Л. Ценность теста на папоротник для подтверждения или опровержения диагноза разрыва плодных оболочек невелика у нерожавших женщин с неспецифическими выделениями из влагалища. Ам Дж. Перинатол. 1994;11(1):46–50. [PubMed] [Google Scholar] 34. Эль-Мессиди А., Кэмерон А. Диагностика преждевременного разрыва плодных оболочек: вдохновение из прошлого и взгляды на будущее.J Obstet Gynaecol Can. 2010;32(6):561–569. [PubMed] [Google Scholar] 35. Фридман М.Л., МакЭлин Т.В. Диагностика разрыва плодных оболочек. Клиническое исследование и обзор литературы. Am J Obstet Gynecol. 1969; 104 (4): 544–550. [PubMed] [Google Scholar] 36. Городески И.Г., Хаймовиц Л., Бахари К.М. Переоценка методов окрашивания рН, папоротника и нильского синего сульфата у беременных с преждевременным разрывом плодных оболочек. J Перинат Мед. 1982;10(6):286–292. [PubMed] [Google Scholar] 37. Рис Э.А., Червенак Ф.А., Моя Ф.Р., Хоббинс Дж.К.Арборизация амниотической жидкости: влияние крови, мекония и изменения рН. Акушерство Гинекол. 1984;64(2):248–250. [PubMed] [Google Scholar] 38. Роузмонд Р.Л., Ломбарди С.Дж., Бем Ф.Х. Ферментация амниотической жидкости, загрязненной кровью. Акушерство Гинекол. 1990; 75 (3 ч. 1): 338–340. [PubMed] [Google Scholar] 39. Смит РП. Техника обнаружения разрыва плодных оболочек. Обзор и предварительный отчет. Акушерство Гинекол. 1976;48(2):172–176. [PubMed] [Google Scholar]точное обнаружение разрыва плодных оболочек на месте оказания медицинской помощи
Med Devices (Auckl).2016; 9: 69–74.
Ross W McQuivey
1 Клинические вопросы, клинические инновации, Солт-Лейк-Сити, Юта, США
Jon E Block
2 Независимый клинический консультант, Сан-Франциско, Калифорния
3
9008 Клинические вопросы , Clinical Innovations, Солт-Лейк-Сити, Юта, США2 Независимый клинический консультант, Сан-Франциско, Калифорния, США
Адрес для переписки: Jon E Block, 2210 Jackson Street, Suite 401, San Francisco, CA 94115, США, тел. + 1 415 775 7947, электронная почта мок.kcolbnojrd@bjАвторское право © McQuivey and Block, 2016 г. Эта работа опубликована и лицензирована Dove Medical Press Limited. Полные условия лицензии доступны по адресу http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/. Некоммерческое использование работы разрешено без какого-либо дополнительного разрешения от Dove Medical Press Limited при условии, что работа правильно указана. Эта статья цитировалась в других статьях в PMC.Abstract
Точная и своевременная диагностика разрыва плодных оболочек крайне важна для информирования и направления вмешательств в зависимости от гестационного возраста для оптимизации перинатальных исходов и снижения риска серьезных осложнений, включая преждевременные роды и инфекции.ROM Plus — это быстрый качественный иммунохроматографический диагностический тест по месту оказания медицинской помощи, в котором используется уникальный метод моноклональных/поликлональных антител для обнаружения двух различных белков, обнаруженных в амниотической жидкости в высоких концентрациях: альфа-фетопротеина и белка, связывающего инсулиноподобный фактор роста. -1. Результаты клинических исследований неизменно продемонстрировали высокую диагностическую точность и рабочие характеристики этого теста в месте оказания медицинской помощи, который превосходит обычные клинические испытания с внешней лабораторной оценкой.Описание, показания к применению, этапы процедуры, а также лабораторная и клиническая характеристика этого анализа представлены в этой статье.
Ключевые слова: ROM Plus ® , преждевременное излитие плодных оболочек, иммуноанализ в месте оказания медицинской помощи, белок-1, связывающий инсулиноподобный фактор роста, IGFBP-1, плацентарный белок 12, PP12, альфа-фетопротеин, АФП
Введение
За последние несколько десятилетий диагностическое тестирование по месту оказания медицинской помощи произвело революцию в медицинском ведении пациентов с неотложными состояниями в условиях неотложной помощи.1,2 Быстрое предоставление результатов может способствовать более обоснованному принятию клинических решений, повышению приверженности пациентов и большей удовлетворенности пациентов, что приводит к лучшим клиническим результатам. На самом деле, международный опрос врачей первичного звена выявил острую клиническую потребность и потребность в различных тестах по месту оказания медицинской помощи, чтобы более своевременно принимать более точные медицинские решения.3
Были предприняты согласованные усилия для разработать и коммерциализировать экспресс-тесты иммунологического анализа разрыва плодных оболочек по месту оказания медицинской помощи, которые точно выявляют белки, обнаруженные в высоких концентрациях в амниотической жидкости, но в крайне низких фоновых концентрациях в шеечно-влагалищном секрете.4 В первом поколении этих тестов использовался метод моноклональных антител, основное внимание уделялось белку-1, связывающему инсулиноподобный фактор роста (IGFBP-1, также известный как плацентарный белок 12), и плацентарному альфа-микроглобулину-1,5–10. уход и более точная диагностика разрыва плодных оболочек привели к недавней разработке комбинированного иммуноанализа моноклональных/поликлональных антител для обнаружения двух разных белков, обнаруженных в амниотической жидкости в высоких концентрациях.11 Описание, показания к применению, этапы процедуры и лабораторные исследования. и клиническая характеристика этого анализа представлены здесь.
Описание устройства
ROM Plus ® (ROM Plus, Clinical Innovations, Солт-Лейк-Сити, Юта, США) — это быстрый качественный иммунохроматографический тест, предназначенный для оказания медицинской помощи (). В этом диагностическом устройстве используется уникальный метод моноклональных/поликлональных антител для обнаружения двух разных белков, обнаруженных в амниотической жидкости в высоких концентрациях. ROM Plus обнаруживает альфа-фетопротеин (AFP) и IGFBP-1. Комбинация IGFBP-1 и AFP была выбрана не только из-за ее надежной исторической поддержки в литературе в качестве идеальных белковых маркеров для амниотической жидкости, но также из-за уникальных характеристик каждого белка.IGFBP-1 синтезируется децидуальной оболочкой плаценты и достигает очень высокого уровня концентрации в амниотической жидкости в начале первого триместра и остается на этом уровне до родов. , достигает пиковой концентрации в конце второго/начале третьего триместра.20–25 Это увеличивает вероятность того, что белки будут обнаружены, особенно у недоношенных пациенток, когда точная диагностика разрыва плодных оболочек является наиболее важной.
ROM Plus ® Тест на разрыв плодных оболочек.
Сокращения: С, контроль; ФП, амниотическая жидкость.
В дополнение к использованию уникального подхода моноклональных/поликлональных антител, ROM Plus предоставляет несколько функций, разработанных для упрощения использования. В отличие от иммуноанализов первого поколения, предназначенных для оказания медицинской помощи, тест-полоска помещена в удобную кассету, которая размещается горизонтально на столешнице, что снижает риск непреднамеренного проливания пробы. Он также содержит встроенный таймер с красителем, который активируется пальцем.Контрольные образцы помещены в стеклянную ампулу внутри пластикового флакона с крышкой-капельницей; они не требуют заморозки или специального обращения. Чтобы активировать контроль, нужно просто разбить стеклянную ампулу внутри флакона, что высвободит лиофилизированный белок и позволит ему смешаться с буферным раствором. Затем пластиковый флакон с дозатором используется для дозирования образца в лунку кассеты ROM Plus.
Показания к применению
Тест на разрыв плодных оболочек ROM Plus — это быстрый качественный иммунохроматографический тест для выявления in vitro амниотической жидкости во вагинальных выделениях беременных женщин с признаками и симптомами разрыва плодных оболочек.Тест обнаруживает АФП и IGFBP-1 из амниотической жидкости в вагинальном секрете. Тест предназначен для использования медицинскими работниками по рецепту, чтобы помочь в обнаружении разрыва плодных оболочек у беременных женщин в сочетании с другими признаками и симптомами.
Детали процедуры
ROM Plus — это автономный набор для тестирования, который дает качественные результаты для определения разрыва плодных оболочек и может быть выполнен в местах оказания медицинской помощи. Для получения результатов ROM Plus не требуется зеркало. Тест неинвазивный, требуется только простой образец вагинального мазка.
иллюстрирует процедурные детали ROM Plus при использовании в качестве теста по месту оказания медицинской помощи. Вкратце, образец жидкости собирают, помещая тампон на 5–7 см во влагалище на 15 секунд. Затем тампон смешивают во флаконе, содержащем 400 мкл буферного раствора, и разбавленный образец наносят на прокладку тест-полоски через лунку для образца на кассете. Затем активируется встроенный таймер, который визуализируется как удобная функция для указания времени теста. Жидкость движется хроматографически и в одном направлении к впитывающей прокладке.
ROM Plus ® Процедурные этапы.
Примечания: ( A ) Стерильный тампон вынимают из упаковки для сбора образца с поверхности влагалища, стараясь не касаться чего-либо до его введения. Тампон вводят во влагалище на глубину 5–7 см, а затем извлекают минимум через 15 секунд. ( B ) Наконечник тампона помещается во флакон и смешивается с буферным раствором. После отламывания кончика тампона по насечке кончик остается во флаконе.Для применения в местах оказания медицинской помощи используется крышка дозатора капель, а наконечник остается в буферном растворе не менее 15 секунд. ( C ) 4–6 капель образца/буферного раствора добавляют в лунку для образца кассеты ROM Plus и запускают таймер. Результаты можно визуализировать через 5–20 минут. ( D ) Если контрольная линия видна (С), результат теста отрицательный. Если видны и контрольная (C), и тестовая линия (AF), результат положительный.Если линии не видны или видна только тестовая линия (AF), результат теста недействителен и должен быть повторен.
Сокращение: AF, амниотическая жидкость.
Во время миграции образец реагирует с моно/поликлональными антителами на мембране тест-полоски. Эти антитела иммунореактивны к белкам IGFBP-1 и AFP, которые являются маркерами амниотической жидкости. Когда мембрана впитает жидкий образец, появится контрольная линия, указывающая на то, что было нанесено достаточное количество образца и устройство работает правильно.
Если образец содержит IGFBP-1 и/или АФП, он связывается с антителами тестовой линии, вызывая их появление и указывая на положительный результат теста. Если образец не содержит IGFBP-1 и/или АФП, будет видна только контрольная линия, что указывает на отрицательный результат.
Доклиническая лабораторная разработка
Анализ ROM Plus прошел валидацию по параметрам линейности, предела обнаружения, точности/воспроизводимости, чувствительности, специфичности и перекрестной реактивности.Эффект «ловушки высокой дозы» был определен для оценки верхнего диапазона обнаружения ROM Plus. Концентрации IGFBP-1 были протестированы до 400 000 нг/мл, а АФП — до 200 000 нг/мл с положительными визуальными результатами для 100% образцов образцов ROM Plus. Нижний предел обнаружения составляет 5 нг/мл для IGFBP-1 и 150 нг/мл для АФП.
Воспроизводимость проверялась в разные дни при шести уровнях амниотической жидкости, добавленной в отрицательный контроль. Анализ проводили на трех партиях ROM Plus для определения визуальных положительных результатов.Два низких положительных результата, два средних положительных результата и два высоких положительных результата были проведены на трех партиях ROM Plus в четыре разных дня. Разницы в активности не заметил.
Для определения интерференции и перекрестной реактивности анализа Тайленол, аспирин и три различных продукта для ванн были добавлены в низкий положительный контроль в конечной концентрации 0,1% без визуальной потери активности. Те же самые продукты для ванн были добавлены в отрицательный контроль и показали отрицательный результат. Кроме того, человеческая сперма, моча и кровь были добавлены в слабоположительные образцы при конечной концентрации 10% без потери активности.Человеческая сперма, моча и кровь также были добавлены в отрицательный контроль и показали отрицательный результат. Анализ IGFBP-1 не дает перекрестных реакций с IGFBP-2, -3 или -4 по результатам вестерн-блоттинга. Наконец, было показано, что ROM Plus дал отрицательный результат при тестировании с образцами, которые были положительными на бактериальный вагиноз и распространенные заболевания, передающиеся половым путем. Все образцы тестировали при pH >4,5.
В Медицинском центре Томаса Джефферсона была проведена внешняя независимая оценка ROM Plus для изучения аналитических и рабочих характеристик теста.Были исследованы чувствительность для обнаружения и стабильность контролей, коэффициент разбавления образцов мазков и титр околоплодных вод и биологических жидкостей, обычно обнаруживаемых во влагалище, кроме амниотической жидкости. ROM Plus продемонстрировал отличные аналитические характеристики и удобные функции. В частности, массоемкость тампона для раствора альбумина с концентрацией 7 г/дл составляла в среднем 79±13 мкл при объеме разбавителя 380 мкл, что указывает на среднее минимальное разведение образцов 18%.Положительный контроль (указанные концентрации; AFP = 600 нг/мл, IGFBP-1 = 20 нг/мл) был положительным до разведения 1:30, что соответствовало заявленной аналитической чувствительности ROM Plus (AFP = 150 нг/мл, IGFBP-1 = 5 нг/мл) после учета разбавления. Кроме того, контроль (с титром 1:8) оставался положительным после 10 дней хранения в холодильнике или в замороженном виде. Амниотическая жидкость, собранная у доношенных пациенток, была положительной с титром 1:3000, в то время как моча у доношенных пациенток была отрицательной.
Клинические диагностические характеристики
Thomasino и соавт.11 провели многоцентровое проспективное обсервационное исследование, чтобы сравнить точность ROM Plus с точностью современной традиционной клинической оценки для диагностики разрыва плодных оболочек.Стандартная клиническая оценка включала исследование в зеркалах на предмет скопления амниотической жидкости, папоротника и изменения pH окружающей среды с использованием нитразина. Разрыв плодных оболочек диагностировали, если наблюдали подтекание жидкости из цервикального зева или при наличии двух из трех условий: скопление жидкости, положительный тест на нитразин или папоротник. Разрыв мембраны был подтвержден при просмотре медицинских записей после родов. У 285 пациенток (15–42 нед гестации) частота ложноположительных результатов теста ROM Plus составила 9%, ложноотрицательных — 0.5%, чувствительность 99% и специфичность 91%, с положительной и отрицательной прогностической ценностью 85% и 99% соответственно. Для сравнения, чувствительность традиционной клинической оценки составила 85%, специфичность 98%, с положительными и отрицательными прогностическими значениями 99% и 77%. Чувствительность Фернинга составила 99%, специфичность 72%, с положительными и отрицательными прогностическими значениями 80% и 99%. Наконец, нитразиновые тесты имели чувствительность 93%, специфичность 83% и положительные и отрицательные прогностические значения 90% и 88%.
Rogers и соавт.26 в одном клиническом центре сравнили диагностические характеристики двух методов, используемых для обнаружения разрыва плодных оболочек у одного и того же пациента. Вагинальные выделения оценивали с помощью обычного папоротникового теста, а также теста ROM Plus у 75 беременных с жалобами на разрыв плодных оболочек. Оба теста сравнивались с аналитическим подтверждением разрыва плодных оболочек с использованием трех внешних лабораторных тестов.Диагностические характеристики в равной степени благоприятствовали тесту ROM Plus по сравнению с тестом папоротника: чувствительность (100% против 77,8%), специфичность (94,8% против 79,3%), положительная прогностическая ценность (75% против 36,8%), отрицательная прогностическая ценность (100% против 95,8%). %) и точность (95,5% против 79,1%).
Обсуждение
Самопроизвольный разрыв плодных оболочек может произойти в любом гестационном возрасте и представляет особенно серьезную клиническую проблему, если он происходит до 37 недель беременности, где он является причиной 20–40% преждевременных родов.27–29 Таким образом, точная и своевременная диагностика разрыва плодных оболочек необходима для информирования и направления вмешательств в зависимости от гестационного возраста для оптимизации перинатальных исходов и снижения риска серьезных осложнений, включая преждевременные роды и инфекции, такие как хориоамнионит и неонатальный сепсис.14,30 ,31 Неправильный диагноз разрыва плодных оболочек (т.е. ложноположительный тест) также может иметь серьезные клинические последствия, такие как начало ненужных акушерских вмешательств, которые могут включать госпитализацию, введение лекарств и даже ятрогенные преждевременные роды.32
При подозрении на разрыв плодных оболочек диагноз обычно ставится с использованием стерильного зеркала для выявления подтекания или скопления амниотической жидкости в сочетании с микроскопическим исследованием собранного образца на наличие папоротника/кристаллизации и определением рН жидкости с нитразиновой тест-бумаги.31,33,34 Хотя этот подход оставался стандартом медицинской помощи на протяжении десятилетий, результаты могут быть сомнительными, особенно когда после ПЗУ прошло более часа.35 Кроме того, осмотр в стерильном зеркале является субъективным и интенсивный и, как было показано, имеет недостаточные диагностические характеристики для точного обнаружения разрыва плодных оболочек.31,36–39
Высокий уровень диагностической точности, достигаемый с помощью ROM Plus, особенно важен в случаях сомнительного разрыва плодных оболочек, поскольку почти у четверти всех пациентов, в конечном итоге диагностированных с разрывом плодных оболочек, нет явных клинических признаков разрыва. мембраны при первичном обращении.34
Высокая чувствительность, стабильно достигаемая с помощью теста ROM Plus в клинических исследованиях, в значительной степени обусловлена уникальным подходом моноклональных/поликлональных антител, при котором поликлональные антитела сочетаются с множественными (8–12) аминокислотами. пептиды, содержащиеся в 259 полноразмерных белковых цепях IGFBP-1, в то время как моноклональные тесты сочетаются с одним сайтом эпитопа.Это может обеспечить преимущество по сравнению с другими доступными в настоящее время экспресс-тестами иммуноанализа, основанными на одном моноклональном антителе. Будущие сравнительные оценки различных иммуноанализов будут необходимы для выяснения любых диагностических и/или процедурных преимуществ различных коммерчески доступных тестов.
В заключение следует отметить, что этот уникальный моноклональный/поликлональный иммуноанализ может быть легко и быстро проведен у постели больного различными лицами, осуществляющими уход, без необходимости использования зеркала.
Благодарности
RWM является сотрудником, а JEB является независимым консультантом Clinical Innovations (Солт-Лейк-Сити, Юта).
Сноски
Вклад авторов
Все авторы внесли свой вклад в разработку концепции, выполнение и составление проекта рукописи, а также обеспечили критический пересмотр рукописи на предмет интеллектуального содержания. Все авторы прочитали и окончательно утвердили версию для публикации. Все авторы согласились нести ответственность за все аспекты работы, обеспечивая надлежащее расследование и решение вопросов, связанных с точностью и достоверностью любой части работы.
Раскрытие информации
Авторы сообщают об отсутствии конфликта интересов в этой работе.
Ссылки
1. Ян У.Р., Ван Акен Х. Тестирование рядом с пациентом – по месту оказания медицинской помощи или по стоимости и удобству? Бр Джей Анаст. 2003;90(4):425–427. [PubMed] [Google Scholar]3. Howick J, Cals JW, Jones C, et al. Текущее и будущее использование тестов по месту оказания медицинской помощи в первичной помощи: международное исследование в Австралии, Бельгии, Нидерландах, Великобритании и США. Открытый БМЖ. 2014;4(8):e005611.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]4. Мариона Ф.Г., Каберо Л. Готовы ли мы к новому взгляду на диагностику преждевременного разрыва плодных оболочек? J Matern Fetal Neonatal Med. 2012;25(4):403–407. [PubMed] [Google Scholar]5. Дорет М., Картье Р., Мирибель Дж. и др. Диагностика преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек на ранних сроках беременности: выявление PAMG-1 и IGFBP-1 в амниотической жидкости с помощью биохимических тестов. Клин Биохим. 2013;46(18):1816–1819. [PubMed] [Google Scholar]6. Eleje GU, Ezugwu EC, Ogunyemi D, et al.Точность и анализ стоимости плацентарного альфа-микроглобулина-1 в диагностике преждевременного разрыва плодных оболочек в условиях сообщества с ограниченными ресурсами. J Obstet Gynaecol Res. 2015;41(1):29–38. [PubMed] [Google Scholar]7. Lee SE, Park JS, Norwitz ER, Kim KW, Park HS, Jun JK. Измерение плацентарного альфа-микроглобулина-1 в шеечно-влагалищных выделениях для диагностики разрыва плодных оболочек. Акушерство Гинекол. 2007;109(3):634–640. [PubMed] [Google Scholar]8. Паласио М., Кунерт М., Бергер Р., Лариос К.Л., Марселин Л.Метаанализ исследований биохимических маркерных тестов для диагностики преждевременного разрыва плодных оболочек: сравнение показателей эффективности. BMC Беременность Роды. 2014;14:183. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]9. Рутанен Э.М., Бон Х., Сеппала М. Радиоиммуноанализ плацентарного белка 12: уровни в амниотической жидкости, пуповинной крови и сыворотке здоровых взрослых, беременных женщин и пациентов с трофобластической болезнью. Am J Obstet Gynecol. 1982;144(4):460–463. [PubMed] [Google Scholar] 10. Рутанен Э.М., Пеконен Ф., Карккайнен Т.Измерение белка-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста, в цервикальном/вагинальном секрете: сравнение с иммуноанализом мембран ROM-check при диагностике разрыва плодных оболочек. Клин Чим Акта. 1993;214(1):73–81. [PubMed] [Google Scholar] 11. Томасино Т., Леви С., Дрейпер М., Нойберт А.Г. Диагностика разрыва плодных оболочек с использованием комбинации моноклональных/поликлональных иммунологических белков. J Reprod Med. 2013;58(5–6):187–194. [PubMed] [Google Scholar] 12. Албайрак М., Оздемир И., Коч О., Анкарали Х., Озен О.Сравнение диагностической эффективности двух быстрых прикроватных иммуноанализов и комбинированной клинической традиционной диагностики разрыва плодных оболочек до родов. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 2011;158(2):179–182. [PubMed] [Google Scholar] 13. Darj E, Lyrenas S. Инсулиноподобный фактор роста, связывающий белок-1, быстрый способ обнаружения амниотической жидкости. Acta Obstet Gynecol Scand. 1998;77(3):295–297. [PubMed] [Google Scholar] 14. Di Renzo GC, Roura LC, Facchinetti F, et al. Рекомендации по ведению спонтанных преждевременных родов: выявление спонтанных преждевременных родов, диагностика преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек и средства профилактики преждевременных родов.J Matern Fetal Neonatal Med. 2011;24(5):659–667. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]15. Guibourdenche J, Luton D, Andre E, Noel M, Porquet D. Быстрое обнаружение белка-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста, и фетального фибронектина в цервико-влагалищных выделениях для диагностики преждевременного разрыва мембраны. Энн Клин Биохим. 1999; 36 (часть 3): 388–390. [PubMed] [Google Scholar] 16. Kubota T, Takeuchi H. Оценка инсулиноподобного фактора роста, связывающего белок-1, в качестве диагностического инструмента для разрыва мембран.J Obstet Gynaecol Res. 1998;24(6):411–417. [PubMed] [Google Scholar] 17. Локвуд С.Дж., Вейн Р., Чиен Д., Гидини А., Альварес М., Берковиц Р.Л. Разрыв плодных оболочек связан с присутствием белка-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста, в вагинальном секрете. Am J Obstet Gynecol. 1994;171(1):146–150. [PubMed] [Google Scholar] 18. Марселин Л., Анселем О., Гибурденш Дж. и др. Сравнение двух прикроватных тестов, проведенных на цервиковагинальной жидкости для диагностики преждевременного разрыва плодных оболочек. J Gynecol Obstet Biol Reprod (Париж) 2011;40(7):651–656.[PubMed] [Google Scholar] 19. Рутанен Э.М., Карккайнен Т.Х., Лехтовирта Дж., Уотила Дж.Т., Хинкула М.К., Хартикайнен А.Л. Оценка экспресс-теста на инсулиноподобный фактор роста, связывающий белок-1, в диагностике разрыва плодных оболочек. Клин Чим Акта. 1996; 253(1–2):91–101. [PubMed] [Google Scholar] 20. Кишида Т., Хирао А., Мацуура Т. и др. Диагностика преждевременного разрыва плодных оболочек с помощью улучшенного набора моноклональных антител к альфа-фетопротеину. Клин Хим. 1995;41(10):1500–1503. [PubMed] [Google Scholar] 21.Кишида Т., Ямада Х., Фурута И. и др. Стойкое обнаружение альфа-фетопротеина во влагалище без явного преждевременного разрыва плодных оболочек. Клинические и химические характеристики. Диагностика плода Тер. 2001;16(5):259–264. [PubMed] [Google Scholar] 22. Кишида Т., Ямада Х., Негиши Х., Сагава Т., Макинода С., Фудзимото С. Диагностика преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек с использованием недавно разработанного набора для тестирования моноклональных антител к альфа-фетопротеину. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 1995;58(1):67–72. [PubMed] [Google Scholar] 23.Рочелсон Б.Л., Ричардсон Д.А., Макри Дж.Н. Экспресс-анализ – возможное применение в диагностике преждевременного разрыва плодных оболочек. Акушерство Гинекол. 1983;62(4):414–418. [PubMed] [Google Scholar] 24. Рохельсон Б.Л., Родке Г., Уайт Р., Брасеро Л., Бейкер Д.А. Экспресс-колориметрический тест на моноклональные антитела к альфа-фетопротеину для диагностики преждевременного разрыва плодных оболочек. Акушерство Гинекол. 1987;69(2):163–166. [PubMed] [Google Scholar] 25. Ямада Х., Кишида Т., Негиши Х. и др. Сравнение улучшенного набора АФП с внутриамниотической инъекцией красителя ПСП в сомнительных случаях преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек.J Obstet Gynaecol Res. 1997;23(3):307–311. [PubMed] [Google Scholar] 26. Роджерс Л.С., Скотт Л., Блок Дж.Э. Точное обнаружение разрыва плодных оболочек по месту оказания медицинской помощи: улучшенные диагностические характеристики с помощью моноклонального/поликлонального иммуноанализа. Clin Med Reprod Health. 2016 В прессе. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]27. Бюллетени комитета ACOG по акушерству Практический бюллетень ACOG № 80: преждевременный разрыв плодных оболочек. Клинические рекомендации для акушеров-гинекологов.Акушерство Гинекол. 2007;109(4):1007–1019. [PubMed] [Google Scholar] 28. Мерсер Б.М., Гольденберг Р.Л., Мейс П.Дж. и соавт. Исследование Preterm Prediction Study: прогноз преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек на основе клинических данных и дополнительных тестов. Сеть отделений медицины матери и плода Национального института здоровья ребенка и человеческого развития. Am J Obstet Gynecol. 2000;183(3):738–745. [PubMed] [Google Scholar] 29. Найе Р.Л., Питерс EC. Причины и последствия преждевременного разрыва плодных оболочек. Ланцет.1980;1(8161):192–194. [PubMed] [Google Scholar] 30. Ananth CV, Oyelese Y, Srinivas N, Yeo L, Vintzileos AM. Преждевременный преждевременный разрыв плодных оболочек, внутриутробная инфекция и маловодие: факторы риска отслойки плаценты. Акушерство Гинекол. 2004;104(1):71–77. [PubMed] [Google Scholar] 31. Коги А.Б., Робинсон Д.Н., Норвиц Э.Р. Современная диагностика и лечение преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек. Преподобный акушер-гинеколог. 2008;1(1):11–22. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]32. Гарите Т.Дж.Лечение преждевременного разрыва плодных оболочек. Клин Перинатол. 2001;28(4):837–847. [PubMed] [Google Scholar] 33. де Хаан Х.Х., Офферманс П.М., Смитс Ф., Схоутен Х.Дж., Питерс Л.Л. Ценность теста на папоротник для подтверждения или опровержения диагноза разрыва плодных оболочек невелика у нерожавших женщин с неспецифическими выделениями из влагалища. Ам Дж. Перинатол. 1994;11(1):46–50. [PubMed] [Google Scholar] 34. Эль-Мессиди А., Кэмерон А. Диагностика преждевременного разрыва плодных оболочек: вдохновение из прошлого и взгляды на будущее.J Obstet Gynaecol Can. 2010;32(6):561–569. [PubMed] [Google Scholar] 35. Фридман М.Л., МакЭлин Т.В. Диагностика разрыва плодных оболочек. Клиническое исследование и обзор литературы. Am J Obstet Gynecol. 1969; 104 (4): 544–550. [PubMed] [Google Scholar] 36. Городески И.Г., Хаймовиц Л., Бахари К.М. Переоценка методов окрашивания рН, папоротника и нильского синего сульфата у беременных с преждевременным разрывом плодных оболочек. J Перинат Мед. 1982;10(6):286–292. [PubMed] [Google Scholar] 37. Рис Э.А., Червенак Ф.А., Моя Ф.Р., Хоббинс Дж.К.Арборизация амниотической жидкости: влияние крови, мекония и изменения рН. Акушерство Гинекол. 1984;64(2):248–250. [PubMed] [Google Scholar] 38. Роузмонд Р.Л., Ломбарди С.Дж., Бем Ф.Х. Ферментация амниотической жидкости, загрязненной кровью. Акушерство Гинекол. 1990; 75 (3 ч. 1): 338–340. [PubMed] [Google Scholar] 39. Смит РП. Техника обнаружения разрыва плодных оболочек. Обзор и предварительный отчет. Акушерство Гинекол. 1976;48(2):172–176. [PubMed] [Google Scholar]точное обнаружение разрыва плодных оболочек на месте оказания медицинской помощи
Med Devices (Auckl).2016; 9: 69–74.
Ross W McQuivey
1 Клинические вопросы, клинические инновации, Солт-Лейк-Сити, Юта, США
Jon E Block
2 Независимый клинический консультант, Сан-Франциско, Калифорния
3
9008 Клинические вопросы , Clinical Innovations, Солт-Лейк-Сити, Юта, США2 Независимый клинический консультант, Сан-Франциско, Калифорния, США
Адрес для переписки: Jon E Block, 2210 Jackson Street, Suite 401, San Francisco, CA 94115, США, тел. + 1 415 775 7947, электронная почта мок.kcolbnojrd@bjАвторское право © McQuivey and Block, 2016 г. Эта работа опубликована и лицензирована Dove Medical Press Limited. Полные условия лицензии доступны по адресу http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/. Некоммерческое использование работы разрешено без какого-либо дополнительного разрешения от Dove Medical Press Limited при условии, что работа правильно указана. Эта статья цитировалась в других статьях в PMC.Abstract
Точная и своевременная диагностика разрыва плодных оболочек крайне важна для информирования и направления вмешательств в зависимости от гестационного возраста для оптимизации перинатальных исходов и снижения риска серьезных осложнений, включая преждевременные роды и инфекции.ROM Plus — это быстрый качественный иммунохроматографический диагностический тест по месту оказания медицинской помощи, в котором используется уникальный метод моноклональных/поликлональных антител для обнаружения двух различных белков, обнаруженных в амниотической жидкости в высоких концентрациях: альфа-фетопротеина и белка, связывающего инсулиноподобный фактор роста. -1. Результаты клинических исследований неизменно продемонстрировали высокую диагностическую точность и рабочие характеристики этого теста в месте оказания медицинской помощи, который превосходит обычные клинические испытания с внешней лабораторной оценкой.Описание, показания к применению, этапы процедуры, а также лабораторная и клиническая характеристика этого анализа представлены в этой статье.
Ключевые слова: ROM Plus ® , преждевременное излитие плодных оболочек, иммуноанализ в месте оказания медицинской помощи, белок-1, связывающий инсулиноподобный фактор роста, IGFBP-1, плацентарный белок 12, PP12, альфа-фетопротеин, АФП
Введение
За последние несколько десятилетий диагностическое тестирование по месту оказания медицинской помощи произвело революцию в медицинском ведении пациентов с неотложными состояниями в условиях неотложной помощи.1,2 Быстрое предоставление результатов может способствовать более обоснованному принятию клинических решений, повышению приверженности пациентов и большей удовлетворенности пациентов, что приводит к лучшим клиническим результатам. На самом деле, международный опрос врачей первичного звена выявил острую клиническую потребность и потребность в различных тестах по месту оказания медицинской помощи, чтобы более своевременно принимать более точные медицинские решения.3
Были предприняты согласованные усилия для разработать и коммерциализировать экспресс-тесты иммунологического анализа разрыва плодных оболочек по месту оказания медицинской помощи, которые точно выявляют белки, обнаруженные в высоких концентрациях в амниотической жидкости, но в крайне низких фоновых концентрациях в шеечно-влагалищном секрете.4 В первом поколении этих тестов использовался метод моноклональных антител, основное внимание уделялось белку-1, связывающему инсулиноподобный фактор роста (IGFBP-1, также известный как плацентарный белок 12), и плацентарному альфа-микроглобулину-1,5–10. уход и более точная диагностика разрыва плодных оболочек привели к недавней разработке комбинированного иммуноанализа моноклональных/поликлональных антител для обнаружения двух разных белков, обнаруженных в амниотической жидкости в высоких концентрациях.11 Описание, показания к применению, этапы процедуры и лабораторные исследования. и клиническая характеристика этого анализа представлены здесь.
Описание устройства
ROM Plus ® (ROM Plus, Clinical Innovations, Солт-Лейк-Сити, Юта, США) — это быстрый качественный иммунохроматографический тест, предназначенный для оказания медицинской помощи (). В этом диагностическом устройстве используется уникальный метод моноклональных/поликлональных антител для обнаружения двух разных белков, обнаруженных в амниотической жидкости в высоких концентрациях. ROM Plus обнаруживает альфа-фетопротеин (AFP) и IGFBP-1. Комбинация IGFBP-1 и AFP была выбрана не только из-за ее надежной исторической поддержки в литературе в качестве идеальных белковых маркеров для амниотической жидкости, но также из-за уникальных характеристик каждого белка.IGFBP-1 синтезируется децидуальной оболочкой плаценты и достигает очень высокого уровня концентрации в амниотической жидкости в начале первого триместра и остается на этом уровне до родов. , достигает пиковой концентрации в конце второго/начале третьего триместра.20–25 Это увеличивает вероятность того, что белки будут обнаружены, особенно у недоношенных пациенток, когда точная диагностика разрыва плодных оболочек является наиболее важной.
ROM Plus ® Тест на разрыв плодных оболочек.
Сокращения: С, контроль; ФП, амниотическая жидкость.
В дополнение к использованию уникального подхода моноклональных/поликлональных антител, ROM Plus предоставляет несколько функций, разработанных для упрощения использования. В отличие от иммуноанализов первого поколения, предназначенных для оказания медицинской помощи, тест-полоска помещена в удобную кассету, которая размещается горизонтально на столешнице, что снижает риск непреднамеренного проливания пробы. Он также содержит встроенный таймер с красителем, который активируется пальцем.Контрольные образцы помещены в стеклянную ампулу внутри пластикового флакона с крышкой-капельницей; они не требуют заморозки или специального обращения. Чтобы активировать контроль, нужно просто разбить стеклянную ампулу внутри флакона, что высвободит лиофилизированный белок и позволит ему смешаться с буферным раствором. Затем пластиковый флакон с дозатором используется для дозирования образца в лунку кассеты ROM Plus.
Показания к применению
Тест на разрыв плодных оболочек ROM Plus — это быстрый качественный иммунохроматографический тест для выявления in vitro амниотической жидкости во вагинальных выделениях беременных женщин с признаками и симптомами разрыва плодных оболочек.Тест обнаруживает АФП и IGFBP-1 из амниотической жидкости в вагинальном секрете. Тест предназначен для использования медицинскими работниками по рецепту, чтобы помочь в обнаружении разрыва плодных оболочек у беременных женщин в сочетании с другими признаками и симптомами.
Детали процедуры
ROM Plus — это автономный набор для тестирования, который дает качественные результаты для определения разрыва плодных оболочек и может быть выполнен в местах оказания медицинской помощи. Для получения результатов ROM Plus не требуется зеркало. Тест неинвазивный, требуется только простой образец вагинального мазка.
иллюстрирует процедурные детали ROM Plus при использовании в качестве теста по месту оказания медицинской помощи. Вкратце, образец жидкости собирают, помещая тампон на 5–7 см во влагалище на 15 секунд. Затем тампон смешивают во флаконе, содержащем 400 мкл буферного раствора, и разбавленный образец наносят на прокладку тест-полоски через лунку для образца на кассете. Затем активируется встроенный таймер, который визуализируется как удобная функция для указания времени теста. Жидкость движется хроматографически и в одном направлении к впитывающей прокладке.
ROM Plus ® Процедурные этапы.
Примечания: ( A ) Стерильный тампон вынимают из упаковки для сбора образца с поверхности влагалища, стараясь не касаться чего-либо до его введения. Тампон вводят во влагалище на глубину 5–7 см, а затем извлекают минимум через 15 секунд. ( B ) Наконечник тампона помещается во флакон и смешивается с буферным раствором. После отламывания кончика тампона по насечке кончик остается во флаконе.Для применения в местах оказания медицинской помощи используется крышка дозатора капель, а наконечник остается в буферном растворе не менее 15 секунд. ( C ) 4–6 капель образца/буферного раствора добавляют в лунку для образца кассеты ROM Plus и запускают таймер. Результаты можно визуализировать через 5–20 минут. ( D ) Если контрольная линия видна (С), результат теста отрицательный. Если видны и контрольная (C), и тестовая линия (AF), результат положительный.Если линии не видны или видна только тестовая линия (AF), результат теста недействителен и должен быть повторен.
Сокращение: AF, амниотическая жидкость.
Во время миграции образец реагирует с моно/поликлональными антителами на мембране тест-полоски. Эти антитела иммунореактивны к белкам IGFBP-1 и AFP, которые являются маркерами амниотической жидкости. Когда мембрана впитает жидкий образец, появится контрольная линия, указывающая на то, что было нанесено достаточное количество образца и устройство работает правильно.
Если образец содержит IGFBP-1 и/или АФП, он связывается с антителами тестовой линии, вызывая их появление и указывая на положительный результат теста. Если образец не содержит IGFBP-1 и/или АФП, будет видна только контрольная линия, что указывает на отрицательный результат.
Доклиническая лабораторная разработка
Анализ ROM Plus прошел валидацию по параметрам линейности, предела обнаружения, точности/воспроизводимости, чувствительности, специфичности и перекрестной реактивности.Эффект «ловушки высокой дозы» был определен для оценки верхнего диапазона обнаружения ROM Plus. Концентрации IGFBP-1 были протестированы до 400 000 нг/мл, а АФП — до 200 000 нг/мл с положительными визуальными результатами для 100% образцов образцов ROM Plus. Нижний предел обнаружения составляет 5 нг/мл для IGFBP-1 и 150 нг/мл для АФП.
Воспроизводимость проверялась в разные дни при шести уровнях амниотической жидкости, добавленной в отрицательный контроль. Анализ проводили на трех партиях ROM Plus для определения визуальных положительных результатов.Два низких положительных результата, два средних положительных результата и два высоких положительных результата были проведены на трех партиях ROM Plus в четыре разных дня. Разницы в активности не заметил.
Для определения интерференции и перекрестной реактивности анализа Тайленол, аспирин и три различных продукта для ванн были добавлены в низкий положительный контроль в конечной концентрации 0,1% без визуальной потери активности. Те же самые продукты для ванн были добавлены в отрицательный контроль и показали отрицательный результат. Кроме того, человеческая сперма, моча и кровь были добавлены в слабоположительные образцы при конечной концентрации 10% без потери активности.Человеческая сперма, моча и кровь также были добавлены в отрицательный контроль и показали отрицательный результат. Анализ IGFBP-1 не дает перекрестных реакций с IGFBP-2, -3 или -4 по результатам вестерн-блоттинга. Наконец, было показано, что ROM Plus дал отрицательный результат при тестировании с образцами, которые были положительными на бактериальный вагиноз и распространенные заболевания, передающиеся половым путем. Все образцы тестировали при pH >4,5.
В Медицинском центре Томаса Джефферсона была проведена внешняя независимая оценка ROM Plus для изучения аналитических и рабочих характеристик теста.Были исследованы чувствительность для обнаружения и стабильность контролей, коэффициент разбавления образцов мазков и титр околоплодных вод и биологических жидкостей, обычно обнаруживаемых во влагалище, кроме амниотической жидкости. ROM Plus продемонстрировал отличные аналитические характеристики и удобные функции. В частности, массоемкость тампона для раствора альбумина с концентрацией 7 г/дл составляла в среднем 79±13 мкл при объеме разбавителя 380 мкл, что указывает на среднее минимальное разведение образцов 18%.Положительный контроль (указанные концентрации; AFP = 600 нг/мл, IGFBP-1 = 20 нг/мл) был положительным до разведения 1:30, что соответствовало заявленной аналитической чувствительности ROM Plus (AFP = 150 нг/мл, IGFBP-1 = 5 нг/мл) после учета разбавления. Кроме того, контроль (с титром 1:8) оставался положительным после 10 дней хранения в холодильнике или в замороженном виде. Амниотическая жидкость, собранная у доношенных пациенток, была положительной с титром 1:3000, в то время как моча у доношенных пациенток была отрицательной.
Клинические диагностические характеристики
Thomasino и соавт.11 провели многоцентровое проспективное обсервационное исследование, чтобы сравнить точность ROM Plus с точностью современной традиционной клинической оценки для диагностики разрыва плодных оболочек.Стандартная клиническая оценка включала исследование в зеркалах на предмет скопления амниотической жидкости, папоротника и изменения pH окружающей среды с использованием нитразина. Разрыв плодных оболочек диагностировали, если наблюдали подтекание жидкости из цервикального зева или при наличии двух из трех условий: скопление жидкости, положительный тест на нитразин или папоротник. Разрыв мембраны был подтвержден при просмотре медицинских записей после родов. У 285 пациенток (15–42 нед гестации) частота ложноположительных результатов теста ROM Plus составила 9%, ложноотрицательных — 0.5%, чувствительность 99% и специфичность 91%, с положительной и отрицательной прогностической ценностью 85% и 99% соответственно. Для сравнения, чувствительность традиционной клинической оценки составила 85%, специфичность 98%, с положительными и отрицательными прогностическими значениями 99% и 77%. Чувствительность Фернинга составила 99%, специфичность 72%, с положительными и отрицательными прогностическими значениями 80% и 99%. Наконец, нитразиновые тесты имели чувствительность 93%, специфичность 83% и положительные и отрицательные прогностические значения 90% и 88%.
Rogers и соавт.26 в одном клиническом центре сравнили диагностические характеристики двух методов, используемых для обнаружения разрыва плодных оболочек у одного и того же пациента. Вагинальные выделения оценивали с помощью обычного папоротникового теста, а также теста ROM Plus у 75 беременных с жалобами на разрыв плодных оболочек. Оба теста сравнивались с аналитическим подтверждением разрыва плодных оболочек с использованием трех внешних лабораторных тестов.Диагностические характеристики в равной степени благоприятствовали тесту ROM Plus по сравнению с тестом папоротника: чувствительность (100% против 77,8%), специфичность (94,8% против 79,3%), положительная прогностическая ценность (75% против 36,8%), отрицательная прогностическая ценность (100% против 95,8%). %) и точность (95,5% против 79,1%).
Обсуждение
Самопроизвольный разрыв плодных оболочек может произойти в любом гестационном возрасте и представляет особенно серьезную клиническую проблему, если он происходит до 37 недель беременности, где он является причиной 20–40% преждевременных родов.27–29 Таким образом, точная и своевременная диагностика разрыва плодных оболочек необходима для информирования и направления вмешательств в зависимости от гестационного возраста для оптимизации перинатальных исходов и снижения риска серьезных осложнений, включая преждевременные роды и инфекции, такие как хориоамнионит и неонатальный сепсис.14,30 ,31 Неправильный диагноз разрыва плодных оболочек (т.е. ложноположительный тест) также может иметь серьезные клинические последствия, такие как начало ненужных акушерских вмешательств, которые могут включать госпитализацию, введение лекарств и даже ятрогенные преждевременные роды.32
При подозрении на разрыв плодных оболочек диагноз обычно ставится с использованием стерильного зеркала для выявления подтекания или скопления амниотической жидкости в сочетании с микроскопическим исследованием собранного образца на наличие папоротника/кристаллизации и определением рН жидкости с нитразиновой тест-бумаги.31,33,34 Хотя этот подход оставался стандартом медицинской помощи на протяжении десятилетий, результаты могут быть сомнительными, особенно когда после ПЗУ прошло более часа.35 Кроме того, осмотр в стерильном зеркале является субъективным и интенсивный и, как было показано, имеет недостаточные диагностические характеристики для точного обнаружения разрыва плодных оболочек.31,36–39
Высокий уровень диагностической точности, достигаемый с помощью ROM Plus, особенно важен в случаях сомнительного разрыва плодных оболочек, поскольку почти у четверти всех пациентов, в конечном итоге диагностированных с разрывом плодных оболочек, нет явных клинических признаков разрыва. мембраны при первичном обращении.34
Высокая чувствительность, стабильно достигаемая с помощью теста ROM Plus в клинических исследованиях, в значительной степени обусловлена уникальным подходом моноклональных/поликлональных антител, при котором поликлональные антитела сочетаются с множественными (8–12) аминокислотами. пептиды, содержащиеся в 259 полноразмерных белковых цепях IGFBP-1, в то время как моноклональные тесты сочетаются с одним сайтом эпитопа.Это может обеспечить преимущество по сравнению с другими доступными в настоящее время экспресс-тестами иммуноанализа, основанными на одном моноклональном антителе. Будущие сравнительные оценки различных иммуноанализов будут необходимы для выяснения любых диагностических и/или процедурных преимуществ различных коммерчески доступных тестов.
В заключение следует отметить, что этот уникальный моноклональный/поликлональный иммуноанализ может быть легко и быстро проведен у постели больного различными лицами, осуществляющими уход, без необходимости использования зеркала.
Благодарности
RWM является сотрудником, а JEB является независимым консультантом Clinical Innovations (Солт-Лейк-Сити, Юта).
Сноски
Вклад авторов
Все авторы внесли свой вклад в разработку концепции, выполнение и составление проекта рукописи, а также обеспечили критический пересмотр рукописи на предмет интеллектуального содержания. Все авторы прочитали и окончательно утвердили версию для публикации. Все авторы согласились нести ответственность за все аспекты работы, обеспечивая надлежащее расследование и решение вопросов, связанных с точностью и достоверностью любой части работы.
Раскрытие информации
Авторы сообщают об отсутствии конфликта интересов в этой работе.
Ссылки
1. Ян У.Р., Ван Акен Х. Тестирование рядом с пациентом – по месту оказания медицинской помощи или по стоимости и удобству? Бр Джей Анаст. 2003;90(4):425–427. [PubMed] [Google Scholar]3. Howick J, Cals JW, Jones C, et al. Текущее и будущее использование тестов по месту оказания медицинской помощи в первичной помощи: международное исследование в Австралии, Бельгии, Нидерландах, Великобритании и США. Открытый БМЖ. 2014;4(8):e005611.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]4. Мариона Ф.Г., Каберо Л. Готовы ли мы к новому взгляду на диагностику преждевременного разрыва плодных оболочек? J Matern Fetal Neonatal Med. 2012;25(4):403–407. [PubMed] [Google Scholar]5. Дорет М., Картье Р., Мирибель Дж. и др. Диагностика преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек на ранних сроках беременности: выявление PAMG-1 и IGFBP-1 в амниотической жидкости с помощью биохимических тестов. Клин Биохим. 2013;46(18):1816–1819. [PubMed] [Google Scholar]6. Eleje GU, Ezugwu EC, Ogunyemi D, et al.Точность и анализ стоимости плацентарного альфа-микроглобулина-1 в диагностике преждевременного разрыва плодных оболочек в условиях сообщества с ограниченными ресурсами. J Obstet Gynaecol Res. 2015;41(1):29–38. [PubMed] [Google Scholar]7. Lee SE, Park JS, Norwitz ER, Kim KW, Park HS, Jun JK. Измерение плацентарного альфа-микроглобулина-1 в шеечно-влагалищных выделениях для диагностики разрыва плодных оболочек. Акушерство Гинекол. 2007;109(3):634–640. [PubMed] [Google Scholar]8. Паласио М., Кунерт М., Бергер Р., Лариос К.Л., Марселин Л.Метаанализ исследований биохимических маркерных тестов для диагностики преждевременного разрыва плодных оболочек: сравнение показателей эффективности. BMC Беременность Роды. 2014;14:183. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]9. Рутанен Э.М., Бон Х., Сеппала М. Радиоиммуноанализ плацентарного белка 12: уровни в амниотической жидкости, пуповинной крови и сыворотке здоровых взрослых, беременных женщин и пациентов с трофобластической болезнью. Am J Obstet Gynecol. 1982;144(4):460–463. [PubMed] [Google Scholar] 10. Рутанен Э.М., Пеконен Ф., Карккайнен Т.Измерение белка-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста, в цервикальном/вагинальном секрете: сравнение с иммуноанализом мембран ROM-check при диагностике разрыва плодных оболочек. Клин Чим Акта. 1993;214(1):73–81. [PubMed] [Google Scholar] 11. Томасино Т., Леви С., Дрейпер М., Нойберт А.Г. Диагностика разрыва плодных оболочек с использованием комбинации моноклональных/поликлональных иммунологических белков. J Reprod Med. 2013;58(5–6):187–194. [PubMed] [Google Scholar] 12. Албайрак М., Оздемир И., Коч О., Анкарали Х., Озен О.Сравнение диагностической эффективности двух быстрых прикроватных иммуноанализов и комбинированной клинической традиционной диагностики разрыва плодных оболочек до родов. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 2011;158(2):179–182. [PubMed] [Google Scholar] 13. Darj E, Lyrenas S. Инсулиноподобный фактор роста, связывающий белок-1, быстрый способ обнаружения амниотической жидкости. Acta Obstet Gynecol Scand. 1998;77(3):295–297. [PubMed] [Google Scholar] 14. Di Renzo GC, Roura LC, Facchinetti F, et al. Рекомендации по ведению спонтанных преждевременных родов: выявление спонтанных преждевременных родов, диагностика преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек и средства профилактики преждевременных родов.J Matern Fetal Neonatal Med. 2011;24(5):659–667. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]15. Guibourdenche J, Luton D, Andre E, Noel M, Porquet D. Быстрое обнаружение белка-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста, и фетального фибронектина в цервико-влагалищных выделениях для диагностики преждевременного разрыва мембраны. Энн Клин Биохим. 1999; 36 (часть 3): 388–390. [PubMed] [Google Scholar] 16. Kubota T, Takeuchi H. Оценка инсулиноподобного фактора роста, связывающего белок-1, в качестве диагностического инструмента для разрыва мембран.J Obstet Gynaecol Res. 1998;24(6):411–417. [PubMed] [Google Scholar] 17. Локвуд С.Дж., Вейн Р., Чиен Д., Гидини А., Альварес М., Берковиц Р.Л. Разрыв плодных оболочек связан с присутствием белка-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста, в вагинальном секрете. Am J Obstet Gynecol. 1994;171(1):146–150. [PubMed] [Google Scholar] 18. Марселин Л., Анселем О., Гибурденш Дж. и др. Сравнение двух прикроватных тестов, проведенных на цервиковагинальной жидкости для диагностики преждевременного разрыва плодных оболочек. J Gynecol Obstet Biol Reprod (Париж) 2011;40(7):651–656.[PubMed] [Google Scholar] 19. Рутанен Э.М., Карккайнен Т.Х., Лехтовирта Дж., Уотила Дж.Т., Хинкула М.К., Хартикайнен А.Л. Оценка экспресс-теста на инсулиноподобный фактор роста, связывающий белок-1, в диагностике разрыва плодных оболочек. Клин Чим Акта. 1996; 253(1–2):91–101. [PubMed] [Google Scholar] 20. Кишида Т., Хирао А., Мацуура Т. и др. Диагностика преждевременного разрыва плодных оболочек с помощью улучшенного набора моноклональных антител к альфа-фетопротеину. Клин Хим. 1995;41(10):1500–1503. [PubMed] [Google Scholar] 21.Кишида Т., Ямада Х., Фурута И. и др. Стойкое обнаружение альфа-фетопротеина во влагалище без явного преждевременного разрыва плодных оболочек. Клинические и химические характеристики. Диагностика плода Тер. 2001;16(5):259–264. [PubMed] [Google Scholar] 22. Кишида Т., Ямада Х., Негиши Х., Сагава Т., Макинода С., Фудзимото С. Диагностика преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек с использованием недавно разработанного набора для тестирования моноклональных антител к альфа-фетопротеину. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 1995;58(1):67–72. [PubMed] [Google Scholar] 23.Рочелсон Б.Л., Ричардсон Д.А., Макри Дж.Н. Экспресс-анализ – возможное применение в диагностике преждевременного разрыва плодных оболочек. Акушерство Гинекол. 1983;62(4):414–418. [PubMed] [Google Scholar] 24. Рохельсон Б.Л., Родке Г., Уайт Р., Брасеро Л., Бейкер Д.А. Экспресс-колориметрический тест на моноклональные антитела к альфа-фетопротеину для диагностики преждевременного разрыва плодных оболочек. Акушерство Гинекол. 1987;69(2):163–166. [PubMed] [Google Scholar] 25. Ямада Х., Кишида Т., Негиши Х. и др. Сравнение улучшенного набора АФП с внутриамниотической инъекцией красителя ПСП в сомнительных случаях преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек.J Obstet Gynaecol Res. 1997;23(3):307–311. [PubMed] [Google Scholar] 26. Роджерс Л.С., Скотт Л., Блок Дж.Э. Точное обнаружение разрыва плодных оболочек по месту оказания медицинской помощи: улучшенные диагностические характеристики с помощью моноклонального/поликлонального иммуноанализа. Clin Med Reprod Health. 2016 В прессе. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]27. Бюллетени комитета ACOG по акушерству Практический бюллетень ACOG № 80: преждевременный разрыв плодных оболочек. Клинические рекомендации для акушеров-гинекологов.Акушерство Гинекол. 2007;109(4):1007–1019. [PubMed] [Google Scholar] 28. Мерсер Б.М., Гольденберг Р.Л., Мейс П.Дж. и соавт. Исследование Preterm Prediction Study: прогноз преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек на основе клинических данных и дополнительных тестов. Сеть отделений медицины матери и плода Национального института здоровья ребенка и человеческого развития. Am J Obstet Gynecol. 2000;183(3):738–745. [PubMed] [Google Scholar] 29. Найе Р.Л., Питерс EC. Причины и последствия преждевременного разрыва плодных оболочек. Ланцет.1980;1(8161):192–194. [PubMed] [Google Scholar] 30. Ananth CV, Oyelese Y, Srinivas N, Yeo L, Vintzileos AM. Преждевременный преждевременный разрыв плодных оболочек, внутриутробная инфекция и маловодие: факторы риска отслойки плаценты. Акушерство Гинекол. 2004;104(1):71–77. [PubMed] [Google Scholar] 31. Коги А.Б., Робинсон Д.Н., Норвиц Э.Р. Современная диагностика и лечение преждевременного преждевременного разрыва плодных оболочек. Преподобный акушер-гинеколог. 2008;1(1):11–22. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]32. Гарите Т.Дж.Лечение преждевременного разрыва плодных оболочек. Клин Перинатол. 2001;28(4):837–847. [PubMed] [Google Scholar] 33. де Хаан Х.Х., Офферманс П.М., Смитс Ф., Схоутен Х.Дж., Питерс Л.Л. Ценность теста на папоротник для подтверждения или опровержения диагноза разрыва плодных оболочек невелика у нерожавших женщин с неспецифическими выделениями из влагалища. Ам Дж. Перинатол. 1994;11(1):46–50. [PubMed] [Google Scholar] 34. Эль-Мессиди А., Кэмерон А. Диагностика преждевременного разрыва плодных оболочек: вдохновение из прошлого и взгляды на будущее.J Obstet Gynaecol Can. 2010;32(6):561–569. [PubMed] [Google Scholar] 35. Фридман М.Л., МакЭлин Т.В. Диагностика разрыва плодных оболочек. Клиническое исследование и обзор литературы. Am J Obstet Gynecol. 1969; 104 (4): 544–550. [PubMed] [Google Scholar] 36. Городески И.Г., Хаймовиц Л., Бахари К.М. Переоценка методов окрашивания рН, папоротника и нильского синего сульфата у беременных с преждевременным разрывом плодных оболочек. J Перинат Мед. 1982;10(6):286–292. [PubMed] [Google Scholar] 37. Рис Э.А., Червенак Ф.А., Моя Ф.Р., Хоббинс Дж.К.Арборизация амниотической жидкости: влияние крови, мекония и изменения рН. Акушерство Гинекол. 1984;64(2):248–250. [PubMed] [Google Scholar] 38. Роузмонд Р.Л., Ломбарди С.Дж., Бем Ф.Х. Ферментация амниотической жидкости, загрязненной кровью. Акушерство Гинекол. 1990; 75 (3 ч. 1): 338–340. [PubMed] [Google Scholar] 39. Смит РП. Техника обнаружения разрыва плодных оболочек. Обзор и предварительный отчет. Акушерство Гинекол. 1976;48(2):172–176. [PubMed] [Google Scholar]AmniSure ROM Test (тест на разрыв [плодных] оболочек)
Преждевременный разрыв плодных оболочек (PROM) происходит примерно в 10% беременностей и представляет собой одну из наиболее важных терапевтических дилемм в современной акушерской практике. (2).Ведение пациентов с PROM и pPROM (преждевременный PROM, возникающий до 37 недель беременности) является дорогостоящим и остается важной перинатальной дилеммой, поскольку клиницист пытается сбалансировать риск продления беременности с риском инфекции (2).
Риски PROM в срок связаны с серьезными неонатальными последствиями, такими как преждевременные роды, дистресс плода, выпадение пуповины, отслойка плаценты и инфекция (2). pPROM составляет от 20% до 40% случаев PROM и связан с 20% до 50% преждевременных родов.Осложнения pPROM включают инфекционную заболеваемость матери и плода, легочную гипоплазию плода, выпадение пуповины, развитие деформаций плода и постнатальный эндометрит (2). Все эти последствия значительно повышают риск заболеваемости и смертности плода и матери.
Набор AmniSure ROM Test Kit представляет собой автономную систему, которая может служить частью вашей общей клинической оценки PROM, что имеет решающее значение для обеспечения принятия соответствующих акушерских мер в случае разрыва.Невыявление пациентов с ПЗУ может привести к невозможности адекватного вмешательства.
И наоборот, ложный диагноз ROM может привести к неадекватным вмешательствам (например, госпитализации или индукции родов). Поэтому правильная и своевременная диагностика ROM имеет решающее значение для клинициста (2). Однако точная диагностика разрыва плодных оболочек остается частой клинической проблемой в акушерстве (2-4).
Другие доступные тесты имеют ограничения или являются в некоторой степени инвазивными (2).Тест AmniSure ROM — это быстрый неинвазивный тест амниотической жидкости, который может помочь в обнаружении ROM, обеспечивая быстрые, простые для интерпретации и своевременные результаты. В качестве альтернативы традиционным методам определения ПЗУ тест AmniSure имеет 99% чувствительность и 98% специфичность, что обеспечивает точность отрицательных и положительных клинических результатов ПЗУ.FDA предостерегает от «неправильного» использования тестов ROM у беременных женщин
WASHINGTON — Тесты, которые обнаруживают разрыв плодных оболочек (ROM) у беременных женщин, не должны использоваться сами по себе для диагностики этого состояния, сообщило FDA в среду.
Ссылаясь на 15 внутриутробных смертей и многочисленные сообщения об осложнениях со здоровьем у беременных женщин, связанных с неправильным использованием этих тестов, агентство повторило, что тесты ROM следует использовать только в сочетании с другими клиническими оценками для ведения пациентов.
«Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) получило информацию, которая указывает на то, что поставщики медицинских услуг могут чрезмерно полагаться на результаты теста ROM при принятии важных решений по ведению пациентов, несмотря на маркировку инструкций, предупреждающих об этой практике», — говорится в письме агентству к поставщикам медицинских услуг. .
В пресс-релизе FDA заявило, что эти тесты могут давать ложноотрицательный результат, и «поставщики могут ошибочно предположить, что ПЗУ не произошло» без дополнительной клинической оценки.
«Наш анализ рисков, связанных с неправильным использованием этих тестов ROM, продолжается, но мы хотим быть прозрачными с поставщиками и пациентами в отношении имеющейся у нас информации, указывающей на проблему, и предоставить рекомендации по минимизации рисков», — Кортни Лиас, Об этом говорится в заявлении доктора философии, директора отдела химических и токсикологических устройств в Центре устройств и радиологического здоровья FDA.
Агентство сообщило, что тесты ROMпредставляют собой диагностику в месте оказания медицинской помощи, которая анализирует вагинальные выделения и может помочь сообщить поставщику медицинских услуг, когда произошел разрыв плодных оболочек. Но они добавили, что, когда эти устройства были рассмотрены в рамках предпродажной очистки, они «согласились с рекомендациями производителей по маркировке, предупреждающими поставщиков не использовать эти тесты независимо».
Кроме того, FDA добавило уведомление о добровольном отзыве тест-полосок Amnisure ROM и о том, что 40 500 тестов Amnisure были отозваны из-за «неисправности устройства».«Однако отзыв не связан с неправильным использованием тестов, и им «не известно о неблагоприятных событиях, связанных с отзываемыми продуктами».
Включите JavaScript, чтобы просматривать комментарии с помощью Disqus. .