Диагностика свечей: Диагностика по свече зажигания: bmwservice — LiveJournal

Содержание

Периодичность замены свечей зажигания — Иксора

DENSO  Q20PRU11  Свеча зажигания DENSO Q20PRU11, 1шт  Lada ВАЗ 2110i 16v,NISSAN WU11,PU11,WU11,HR31, WHJR31,NY30,KHGNC22,SUBARU KG1,KG2,HONDA D13B,D15B,ZC,B20A (PGM-FI),MAZDA B6 (DOHC),F8,JF,FE (DOHC) 
DENSO  PK20R11  Свеча зажигания DENSO PK20R11, 1шт TOYOTA STARLET,CERES,COROLLA,LEVIN,SPRINTER,TRUENO,MARINO,CURREN,SCEPTER,ARISTO,SOARER,CELSIOR 
DENSO  K20PRU  Свеча зажигания DENSO K20PRU, 1шт ISUZU GEMINI,SUZUKI CULTUS,ESCUDO,DAIHATSU HIGET,MITSUBISHI MIRAGE,LANCER,LIBERO,GALANT A-E,ETERNA A-E 
DENSO  Q20PRU114  Свеча зажигания DENSO Q20PRU114, 1шт

Lada ВАЗ 2110i 16v,NISSAN WU11,PU11,WU11,HR31, WHJR31,NY30,KHGNC22,SUBARU KG1,KG2,HONDA D13B,D15B,ZC,B20A (PGM-FI),MAZDA B6 (DOHC),F8,JF,FE (DOHC) 

DENSO  KJ16CRL11  Свеча зажигания DENSO KJ16CRL11, 1шт ISUZU GEMINI,ASKA,HONDA LOGO,CIVIC-FERIO,DOMANI,ACCORD,TORNEO,ASCOT,ODYSSEY,PARTNER,MAZDA CAPELLA,SENTIA,TELSTER 4 
DENSO  K20PRU11  Свеча зажигания DENSO K20PRU11, 1шт ISUZU GEMINI,ASKA,BIGHORN,SUZUKI CULTUS,DAIHATSU CHARADE,SUBARU IMPREZA,SUBARU LEGACY,HONDA CIVIC-FERIO,DOMANI,MAZDA FAMILIA,EUNOS 300,TELSTER,MITSUBISHI MIRAGE,CARISMA,ETERNA A-E,LEGNUM,DIAMANTE 
DENSO  XUh30TTI4  Свеча зажигания DENSO XUh30TTI4, 1шт HYUNDAI i10, i20; KIA Picanto, Rio;  
DENSO  K20PRU114  Свеча зажигания DENSO K20PRU114 , 1шт ISUZU GEMINI,ASKA,BIGHORN,SUZUKI CULTUS,DAIHATSU CHARADE,SUBARU IMPREZA,SUBARU LEGACY,HONDA CIVIC-FERIO,DOMANI,MAZDA FAMILIA,EUNOS 300,TELSTER,MITSUBISHI MIRAGE,CARISMA,ETERNA A-E,LEGNUM,DIAMANTE 
DENSO  Kh26TT4  Свеча зажигания DENSO Kh26TT4, 1шт CITROEN C1, C2, C3, C4, C5, Evasion, Jumpy, Xsara; FIAT Scudo, Ulysse; HYUndai ix35, Santa Fe, Sonata; KIA Magentis, Sorento, Sportage; MITSUBISHI Colt; NISSAN Almera, Cube, Micra, Primera, X-Trail; PEUGEOT 107, 206, 307, 308, 406, 407, 607, 806, 807, Expert; RENAULT Laguna, Megane; SUZUKI Grand Vitara, SX4; TOYOTA Aygo, Yaris     
DENSO  VKh30  Свеча зажигания DENSO VKh30, 1шт BMW 1, 3, 5, 6, 7, X1, X3, X5, Z4; CITROEN Berlingo, C2, C3, C4, C5, C8, Jumpy, Xsara; FIAT Ulysse; FORD Kuga, S—Max; HONDA Civic, Insight; LEXUS LS, LX; MERCEDES C, CL, CLC, CLK, E, SL V, SLR; MITSUBISHI Colt, Eclipse, Galant, Grandis, Lancer, Outlander; NISSAN 350, Almera, Murano, Pathfinder, Patrol, Primera, Teana, X-Trail; OPEL Signum, Vectra; PEUGEOT 1007, 206, 207, 307, 308, Partner; RENAULT Clio, Laguna; SUBARU Forester, Impreza, Legacy, Outback; SUZUKI Grand, Kizashi, Swift, SX4; TOYOTA 4Runner, Dyna, Land Cruiser Prado; VOLVO C30, C70, S40, V50, V70
DENSO  K16PSRB8  Свеча зажигания DENSO K16PSRB8, 1шт CITROEN C-Crosser; MITSUBISHI Delica, Outlander, PHEV; PEUGEOT 4007 
DENSO  ITV164  Свеча зажигания DENSO ITV164, 1шт FORD Galaxy, Mondeo, S-Max; MAZDA CX-9, 3, 5, 6;  SAAB 9-5
DENSO  W27ESRU  Свеча зажигания DENSO W27ESRU, 1шт HONDA MBX, MTX, NS; SUZUKI Inazuma, RG, RGV; VESPA Cosa, ET, LX, LXV, S
DENSO  W20EPRU4  Свеча зажигания DENSO W20EPRU4, 1шт Lada ВАЗ 2108-09,ISUZU EA71,G200 (DOHC,4ZC1,G161,G201,DAIHATSU EB60,AB50-51,AB20,NISSAN MA09ERT,Z20,J,SUBARU EA71,EK23,HONDA EH,MITSUBISHI G23B,3G81,4G61,4G63 ,G33B 
DENSO  SXU22HDR84  Свеча зажигания DENSO SXU22HDR84, 1шт HYUNDAI i10, i20; MERCEDES C, CLK, E, GL, GLK, ML, R, S, SL, SLK, Sprinter, Viano, Vito; MITSUBISHI i, Outlander 
DENSO  KJ20DRM114  Свеча зажигания DENSO KJ20DRM114, 1шт HONDA CIVIC (7) STREAM K 20 A1 (DOHC i-VTEC),INTEGRA (LA-DC5) K 20 A (DOHC i-VTEC ) 
NGK  2526  Свеча зажигания NGK 2526, 1шт TOYOTA Corolla, Caldina, Corona, Yaris, Vitz, Will, Prius, Cynos, Marino, Crown 
NGK  3783  Свеча зажигания NGK 3783, 1шт Peugeot 30; Volvo S60
NGK  6953  Свеча зажигания NGK 953, 1шт CHEVROLET Rezzo, Tacuma; HYUNDAI Avante, Elantra, Lantra, Lavita, Matrix; MAZDA 3, 30x, 323, Axela, Etude, Familia, Miata, MX-3, MX-5, MX-6. Xedos; MITSIBISHI Delica, Eclipse, L, Lancer, Lebero, Space; NISSAN Almera, March, Micra, Pathfinder, Primera, Pulsar, Sentra, Terrano; SUBARU Vivio 
NGK  4629  Свеча зажигания NGK 4629, 1шт GEON X-Pit; KYMCO People People 125 GT, People People 125 S 

Замена свечей зажигания в Санкт-Петербурге — Eurorepar Авто Премиум

Производим подбор и замену свечей зажигания на иномарки. Всегда в наличии оригинальные детали, а также качественные аналоги запасных частей по приемлемым ценам.

Вы можете привезти свои свечи для замены, в этом случае мы дадим гарантию только на работу. Поэтому надёжнее приобретать их у нас. На все работы и детали, купленные у нас – даём гарантию до 24 месяцев.

Когда нужно менять свечи?

Срок службы свечей зажигания зависит от разных факторов: качества заправляемого топлива, состояния двигателя, а также от своевременного прохождения техобслуживания автомобиля.

В регламенте к каждому автомобилю прописан обязательный интервал замены, как правило, это каждые 25-30 тыс. км пробега.

Первые признаки износа свечей зажигания:

  • Неравномерная работа двигателя (троит)
  • Снижение динамики автомобиля
  • Увеличение расхода топлива

Все эти признаки указывают на пропуски искры, которые возникают от наличия нагара на свече или недопустимого зазора между электродами (при неправильном подборе свечей).

Нагар не является следствием неисправной свечи, он возникает от некорректно настроенного зажигания. В этом случае будет не лишним провести компьютерную диагностику системы.

Выявляют нагар на свечах путём визуального осмотра, а сделать это можно только после их извлечения. Самостоятельно это сделать непросто, здесь потребуются специальные навыки и оборудование.

При подборе свечей, нужно учитывать значения на маркировке. Отступление от допустимого значения даже на миллиметр в зазоре между электродами может привести к пропускам искры.

Если вы обнаружили похожие признаки в работе автомобиля, советуем обратиться в сервис для определения причин неисправности. Как правило, замена комплекта свечей устранит проблему.

Записывайтесь в наши техцентры на замену свечей. Также, вы можете оставить заявку на подбор нужных деталей.

Другие работы по техническому обслуживанию

Замена свечей зажигания | ZavGar Барнаул

ЗАПИСАТЬСЯ НА ОБСЛУЖИВАНИЕ

Свечи зажигания – необходимый элемент системы зажигания авто, устанавливаемые над цилиндром мотора. Один конец свечки ввинчивается в двигатель, другой подкрепляется высоковольтным проводом.
Функция свечи зажигания заключается в воспламенении образующейся в цилиндрах двигателя топливной смеси. Энергия, которая выделяется, в итоге приводит в движение поршень. Иными словами именно этот элемент дает искру для начала работы мотора. Данное воспламенение должно происходить синхронно в определенный временной цикл.

Поэтому от исправности детали зависит работа мотора. Очень важно, чтобы все свечи были качественны и исправны. В случае перебоя в работе, рекомендовано заменять весь комплект.

Важность замены свечей зажигания обусловлена своевременным естественным износом и искровой эрозии. По мере использования свечи оплавляются, покрываются нагаром. Все это попросту приводит к отсутствию искры и как следствие неработоспособности мотора.

Признаки неисправностей свечей зажигания

  • Заметное увеличение расхода топлива;
  • Изменения в работе двигателя — он троит и подергивается, вследствие чего у автомобиля падает мощность;
  • На свечах обнаружен нагар;
  • Отказ автомобиля заводиться;
  • Двигатель не может набрать необходимые обороты.

Если вы обнаружили хотя бы один из признаков написанных выше, рекомендуем обратиться к нам для более точной диагностики неисправности и помощи в ее решении.

Периодичность замены свечей зажигания

Как ни странно, свечи зажигания относительно быстро выходят из строя, даже при соблюдении правильных условий эксплуатации. Именно поэтому производители автомобилей рекомендуют менять свечи зажигания не реже 30 000 км пробега.
Замена свечей зажигания в нужное время на новые гарантирует их качественное действие и обеспечивает дальнейшую работоспособность мотора.

Наилучшим вариантом при покупке и установке свечей зажигания будет выбор оригинальных деталей, или же дублей от проверенных производителей, которые также рекомендуются заводом изготовителем.

Почему стоит обратиться к нам

  • У нас работают только самые высококвалифицированные рабочие, которые правильно смогут подобрать расходные материалы для вашего автомобиля, заменить их и проконсультировать вас по любому вопросу;
  • Подбираем оригинальные или аналоговые свечи, преимущственно NGK или DENSO;
  • Предоставляем гарантию на наши услуги.

Замена свечей зажигания, цена

Услуга Цена
Замена свечей зажигания от 100 руб/шт.

В таблице представлены ориентировочные цены, окончательную стоимость работ помогут уточнить наши специалисты.

КАТАЛОГ СВЕЧЕЙ ЗАЖИГАНИЯ

Приобрести качественные расходные материалы Вы можете, обратившись к нам в магазин-сервис ZavGar, или оформив заказ на нашем сайте. Наличие можно уточнить по номеру 500-112.

Замена свечей зажигания выполняется в отделах по следующим адресам:

Город Барнаул:

Город Москва:

Замена свечей зажигания — цена 150 рублейв Москве в автосервисе «Наколесах.ру»

Неисправность свечей зажигания приводит к ряду негативных последствий. Поэтому очень важно своевременно проверять и очищать их. Невнимательное отношение к свечам зажигания приводит к необратимым поломкам. Если произвести ремонт не представляется возможным, производится замена неисправных или изношенных устройств на новые.

При отсутствии регулярного контроля изношенные свечи начинают пропускать вспышки в цилиндры. Это становится причиной нескольких проблем, среди которых:

  • перерасход топлива;
  • ухудшение динамики автотранспортного средства;
  • затрудненный или нестабильный пуск;
  • выход из строя каталитического нейтрализатора отработавших газов;
  • ухудшение работы смазывающих устройств;
  • выход из строя свечных проводов, наконечников и индивидуальных катушек зажигания.

Замена свечей зажигания необходима, если пробег достиг отметки от 20 до 100 тысяч километров. Но многие автомобилисты тянут до последнего, пока одно или несколько устройств не перестанут работать. В таком случае замена свечи неизбежна. Обратиться за помощью вы можете к мастерам автосервиса «На колесах.ру». Нашим клиентом может стать любой автолюбитель, так как стоимость предлагаемых услуг доступна каждому.

Когда необходима замена свечей?

Если устройство вышло из строя, это отразится на работе автомобиля. Владельцу транспортного средства следует обратить внимание на следующие признаки:

  • падение мощности;
  • при работе двигатель начинает «троить»;
  • появление детонации;
  • увеличенное количество угарного газа в выхлопе;
  • при прокрутке стартера мотор не заводится.

Если пробег больше 10-15 тысяч километров, то одной прочисткой не обойтись. Необходима полная замена свечей зажигания. Цена данной процедуры варьируется в зависимости от вида и количества комплектующих, сложности работы, модели и марки автомобиля.

У мастеров автосервиса «На колесах.ру» достаточно опыта, чтобы оперативно выявлять причины поломки и устранять неисправности. Для вашего автомобиля будут подобраны соответствующие комплектующие. В своей работы мы используем современное и качественное оборудование. Конечно, вы можете попытаться произвести замену свечей зажигания самостоятельная. Но в 90 % случаев к поломкам устройств приводит их неправильная установка. К тому же процедура требует придерживаться техники безопасности. Снимать старые свечи следует так же бережно и аккуратно, как и устанавливать новые. Поэтому, если вы ответственно относитесь к своему автомобилю, воспользуйтесь услугами специализированного сервиса «На колесах.ру». В целях экономии времени вы можете забронировать визит на автосервис. Заполните специальную форму на сайте, указав вид необходимой услуги, удобные для вас дату и время, а также выберите адрес ближайшего к вам автосервиса. Вам не придется стоять в очереди, так как по прибытии вас уже будет ждать ваш мастер.

Как проводится замена

В принципе, в замене свечей нет ничего сложного – если они на двигателе расположены на виду, как на «Жигулях» или «Ладах». Но иногда для их замены приходится снимать различные кожухи, воздуховоды, блоки катушек зажигания, отсоединять разъемы проводов – и всё потом устанавливать на место.

Чем сложнее конструкция двигателя, тем сложнее процедура замены свечей зажигания.

Особой сложностью отличается она на оппозитных двигателях автомобилей Subaru. Поэтому на них применяют более надежные и качественные (конечно, дорогие) свечи – чтобы реже их менять.

Для выворачивания свечей обычно применяют высокие торцевые головки «на 21», «на 16» и редкие пока 12-гранные головки «на 14» (Peugeot 308). Лучше использовать специальные «свечные» ключи – они имеют резиновую или магнитную вставку внутри для удерживания свечи при извлечении ее из колодца в двигателе.

Свечи обычно завернуты с большим усилием, при отворачивании следует быть осторожными – перекосив ключ, фарфоровый изолятор свечи можно сломать. Вывернув свечу, нужно закрыть чем-то открывшееся отверстие, чтобы внутрь цилиндра двигателя не попали грязь и посторонние предметы.

При вворачивании свечи будьте внимательны: она должна пойти строго по резьбе. Если свеча идет туго, проверьте, не повреждена ли резьба. Заворачивать свечу нужно плотно, с хорошим усилием (но тоже так, чтобы не сломать). После затяжки надо плотно насадить на каждую свечу наконечник высоковольтного провода или индивидуальной катушки зажигания. Недостаточно плотно установленный наконечник может вызывать перебои в искрообразовании.

Подбор свечей

Чаще всего с этой задачей сталкиваются планирующие самостоятельно провести замену свечей зажигания, автовладельцы ВАЗ, Тойоты, Шкоды, Мицубиси. Главные их параметры – калильное число свечи (заложено в маркировке), шаг резьбы и длина резьбовой части корпуса. Число электродов, между которыми возникает искра, их расположение и материал, из которого они изготовлены (иридий, платиновое напыление и др. ), важны в тех случаях, если тип свечей специально оговорен производителем автомобиля.

Свечи какого производителей лучше? Что выбрать для замены свечей зажигания ВАЗа, Тойоты – Bosch или Beru, Champion или Nippon Denso? А может быть, подойдут российские аналоги?

Специалист-консультант, обладая таблицами взаимозаменяемости свечей, легко подберет свечи именно под вашу модель и модификацию автомобиля, объяснит, почему не даст большого эффекта применение супер-дорогих свечей на вазовской «классике», почему не стоит экономить на свечах для дорогих и престижных автомобилей, а также как влияет на срок службы свечей качество бензина.

Приобретая свечи в крупных магазинах или заказывая их замену в сервисных центрах, вы дополнительно страхуете себя от опасной «встречи» с подделками, которых немало на рынке.

Диагностика

Внешне исправная и чистая от нагара свеча может оказаться нерабочей. Гаражный метод проверки свечи «на искру» чреват не только сильными ударами током по рукам проверяющего, но и возникновением неисправности двигателя (не на всех автомобилях такая проверка допустима).

Отсутствие искры не всегда говорит о неисправности свечи – дело вполне может быть в дефекте высоковольтного провода, его наконечника, «бобины» (катушки зажигания) и др. Поиск и устранение такой неисправности – уж точно удел специалистов сервиса, обладающих необходимым оборудованием.

Также по состоянию свечей мастера могут определить состояние двигателя: качество применяемого топлива, правильность топливоподачи, степень износа мотора. В идеале свеча не должна иметь никаких следов нагара, электроды должны иметь светло- или темно-серый цвет.

Несгоревший бензин, сухой черный нагар (сажа), налет темно-красного цвета, пористые серые или коричневые отложения с резким запахом сероводорода, черные маслянистые отложения – все это свидетельствует о том, что двигатель, мягко говоря, не в порядке. Еще хуже, если свечи в буквальном смысле разрушены: имеют оплавленные или сломанные электроды.

Во всех этих случаях перед заменой свечей зажигания специалисты сервиса обязательно диагностируют мотор, выяснят причину его неправильной работы и предложат ее устранить.

Диагностика свечей зажигания | Автожурнал Мой Автомобиль

Свеча зажигания в бензиновых двигателях считается уникальным устройством с точки зрения диагностики всего двигателя и даже качества топлива. Она является довольно хорошим индикатором, чутко реагирующим на отклонения от нормы в других системах двигателя. Особенно, в топливной и зажигания.

После того, как вы вывернете свечу, для диагностики выполните следующее:

Внешний осмотр

Здесь следует обращать внимание на геометрию, цвет и даже запах. Прежде всего, требует внимания центральный и боковой электроды, изолятор центрального электрода:
На электродах и изоляторе может быть светло-коричневый или светло-серый налёт. Примите поздравления: не только свеча, но и основные системы двигателя, похоже, в норме.
Проверьте промежуток между электродами. У разных изготовителей он разный, но примерно равен приблизительно 0,8-м мм. В процессе эксплуатации этот зазор склонен уменьшаться. Аккуратно исправьте отклонение отверткой, если оно есть.
На электродах и изоляторе – черный налет. Это говорит об отклонениях в работе системы питания (переобогащенная смесь) либо в системе зажигания (раннее или позднее зажигание).
Свеча может быть мокрой и сильно пахнуть бензином. Такой признак означает, что свеча не работает вообще.
Если свеча издает запах сероводорода, то, скорее всего, вы длительное время использовали чрезмерно этилированный бензин.

Проверка свечи «на искру»

Таким образом проверяют не только свечу, но и исправность электрических цепей системы зажигания. Для этого необходимо выполнить следующее:
Перед выворачиванием свечи вы отсоединили от свечи высоковольтный кабель. Теперь присоедините его к вывернутой свече.
Положите свечу так, чтобы ее металлический шестигранник для ключа имел электрический контакт с любой металлической деталью автомобиля (массой), и чтобы хорошо были видны электроды.
Не держите свечу голыми руками даже за диэлектрические детали или высоковольтный кабель – можете получить довольно сильный удар током.
Попросите помощника сесть в кабину и включить стартер, а сами наблюдайте за ритмичным появлением или отсутствием искры. При этом двигатель может завестись с одной вывернутой свечей. Это нормально.
Сильная искра голубоватого цвета – хорошо. Слабая оранжевая или красноватая искра свидетельствует о том, что свеча свой срок отслужила.

Второй способ диагностики, конечно, не дает 100%-ю гарантию, что свеча работает нормально. Условия ее работы довольно тяжелые. Нагревается свеча до 900 градусов, продуцирует искру в среде с огромным давлением. Мы же ее проверяем при температуре окружающей среды и атмосферном давлении. Но отбраковать полностью неисправную свечу или однозначно определить разрыв электрической цепи в зажигании этим способом можно.

Следует также опровергнуть то, что чисткой нагара с электродов и изолятора отмачиванием либо щеткой можно полностью восстановить работоспособность свечи. Электроды покрыты тонким слоем химически пассивных металлов. Таким образом, этот слой будет разрушен, что приведет к нестабильной работе.

www.40kmh.ru

 

Это может быть интересно

Замена свечей зажигания в автомобиле. Услуги по замене свечей в Москве

Замена свечей зажигания в QuickMADE

Замена свечей зажигания в автомобиле, их проверка и очистка являются важнейшими процедурами вне зависимости от возраста и марки Вашего транспортного средства.

Свечи зажигания нужны автомобилю, чтобы искрой, образовавшейся при повороте ключа зажигания, зажечь топливно-воздушную смесь в моторе автомобиля. Поджог этой смеси происходит по средством высоконапряженного электрического разряда, который образуется между электродами свечи.

Нередко возникают дискуссии на тему того, с какой периодичностью нужно менять свечи зажигания. Чаще всего в инструкции к автомобилю указывается средний срок службы свечей – пробег в пятнадцать или двадцать тысяч километров. Многие утверждают, что следует задуматься о замене свечей только после ста тысяч километров. Однако как самостоятельно понять, что пришло время заменить деталь на новую? 5 самых распространенных индикаторов:

  • Если Ваш автомобиль потряхивает как при езде, так и на холостых оборотах, стоит задуматься об обновлении свечей зажигания — «троение» двигателя является одной из самых распространенных причин;
  • В случае проблем при запуске мотора Вашего транспортного средства – если стартер дает сигнал, но зажигание на него не отвечает, — следует обратиться в сервисный центр для замены свечей;
  • Рост показателя расхода топлива при эксплуатации также является поводом для проверки Ваших свечей;
  • Рост выброса СО (углерода) в атмосферу Вашим автомобилем – повод задуматься о замене свечей зажигания;
  • Ухудшились способности двигателя — мотор теряет возможность развить высокую скорость? Пришло время задуматься об износе свечей.

Если Ваш автомобиль хотя бы раз показывал вам перечисленное выше поведение, — срочно обращайтесь в автосервис. Замена свечей зажигания в автомобиле — ответственная работа, которую следует доверить настоящим профессионалам. Быстрая замена свечей зажигания в автомобиле от сервиса QuickMADE поможет Вам избежать проблем с автомобилем, сохранив Ваше здоровье и здоровье Ваших близких.

Закажите услуги по замене свечей зажигания в Москве

Сегодня рынок автомобильных запчастей наполнен самыми разнообразными свечами зажигания. Обратившись в автосервис, обязательно уточните какие свечи будут вставлены в Ваше транспортное средство – от этого зависит как длительность использования, так и особенности использования.

Ключевые параметры, по которым свечи зажигания делятся на рынке:

  • Общая численность электродов;
  • Материал изготовления;
  • Калильное число.

Говоря об общей численности электродов, свечи бывают одноэлектродные и многоэлектродные. Рекомендуется отдавать предпочтение многоэлектродным свечам, т.к. у них имеется несколько дополнительных электродов, который увеличивают срок службы.

Материал изготовления основной части свечи зажигания также многообразен – на рынке представлены изделия из иттрия, вольфрама, платины, иридия, палладия. Иридиевые и платиновые свечи считаются максимально прочными и надежными. Специальное профилирование электрода обеспечивает длительный срок службы. Единственный недостаток – высокая стоимость детали.

Калильное значение свечи зажигания – это временной промежуток, за который свеча дойдет до кондиции калильного зажигания. Нагревание свечи обратно пропорционально длительности ее срока службы. При малых нагрузках лучше выбирать «горячие» свечи, однако при повышении нагрузки такие свечи могут испортить весь двигатель.

Как видите, огромное количество характеристик и категорий свечей зажигания вызывает множество вопросов – какие свечи выбрать именно для Вашего автомобиля. Лучше доверить это дело настоящим профессионалам своего дела. Мы уверены, что наша компания QuickMADE сможет Вам помочь! Наша сервисная служба оказывает услуги по замене свечей в Москве. Индивидуальный подход и быстрая диагностика автомобиля не оставят равнодушными ни одного клиента. Заботясь о Вашем автомобиле, мы заботимся о Вашем здоровье и благополучии. Любые поломки, недомогания вашего транспортного средства мы можем решить в короткие сроки. Быстрая замена свечей зажигания в автомобиле от сервиса QuickMADE. Запись по телефону в Москве: 8 (495) 125-40-14.

Хронический атипичный нейтрофильный дерматоз с липодистрофией и повышенной температурой (CANDLE)


1.1 Что это такое?
Хронический атипичный нейтрофильный дерматоз с липодистрофией и повышенной температурой (CANDLE) — редкое генетическое заболевание. В прошлом у него было несколько других названий, в том числе: синдром Накаджо-Нисимура или японский аутовоспалительный синдром с липодистрофией (JASL) или контрактуры суставов, мышечная атрофия, микроцитарная анемия и панникулит-индуцированная детская липодистрофия (JMP).Больные дети страдают от повторяющихся эпизодов лихорадки, сыпи, которая заживает, оставляя кровоподтеки, атрофию мышц, прогрессирующую потерю слоя жира под кожей (липодистрофия), артралгии и контрактуры суставов. При отсутствии лечения заболевание может привести к тяжелой инвалидности и даже смерти. 1.2 Насколько это распространено?
СВЕЧА – редкое заболевание. В настоящее время в литературе описано почти 60 случаев, но, вероятно, еще больше таких случаев не будет диагностировано. 1.3 Наследуется ли это?
Он наследуется как аутосомно-рецессивное заболевание (это означает, что оно не связано с полом и что ни у одного из родителей не должно быть симптомов заболевания).Этот тип передачи означает, что для того, чтобы иметь СВЕЧУ, человек должен унаследовать один дефектный или мутировавший ген от матери, а другой — от отца. Следовательно, оба родителя являются здоровыми носителями (носитель имеет только одну мутированную копию, но не заболевание). Родители, у которых есть ребенок с синдромом CANDLE, имеют 25-процентный риск того, что у второго ребенка также будет синдром CANDLE. Возможна антенатальная диагностика. 1.4 Почему у моего ребенка это заболевание? Можно ли это предотвратить?
У ребенка болезнь, потому что он родился с мутировавшими генами, вызывающими CANDLE.1.5 Это заразно?
1.6 Каковы основные симптомы?
Дебют заболевания приходится на период от первых 2 нед до 6 мес жизни. В педиатрическом возрасте клинические проявления включают рецидивирующую лихорадку и приступы эритематозных кольцевидных кожных бляшек, которые могут сохраняться от нескольких дней до нескольких недель и оставлять остаточные пурпурные поражения. Веки могут казаться довольно толстыми или опухшими с красновато-фиолетовым цветом, а губы могут выглядеть опухшими.
Периферическая липодистрофия (преимущественно на лице и верхних конечностях) обычно появляется к концу первого года жизни и со временем постепенно ухудшается.
Артралгия без артрита также отмечается у большинства пациентов, и со временем развиваются значительные суставные контрактуры. Менее распространенные признаки болезни включают покраснение глаз, воспаление глубоких тканей уха и носа и приступы головной боли из-за воспаления оболочки головного мозга. Липодистрофия является прогрессирующей и необратимой. 1.7 Какие возможны осложнения?
У младенцев и детей младшего возраста с синдромом CANDLE развивается прогрессирующее увеличение печени и потеря как жира, так и мышц.Другие проблемы, такие как увеличенное сердце, нарушения сердечного ритма (аритмия) и контрактуры суставов, могут возникнуть в более позднем возрасте. 1.8 Является ли заболевание одинаковым у всех детей?
Все пораженные дети, вероятно, будут серьезно больны. Однако симптомы не одинаковы у всех детей. Даже в одной семье не все больные дети будут одинаково больны. 1.9 Отличается ли заболевание у детей от заболевания у взрослых?
Прогрессирующее течение болезни означает, что клиническая картина у детей может несколько отличаться от наблюдаемой у взрослых.Дети обращаются в основном с повторяющимися эпизодами лихорадки, задержкой роста, уникальными чертами лица и сыпью. Мышечная атрофия, контрактуры суставов и периферическая липодистрофия обычно появляются в более позднем детстве и в раннем взрослом возрасте. У взрослых могут даже развиться опасные изменения сердечного ритма, увеличенное и плохо функционирующее сердце.
2.1 Как диагностируется?
Сначала должно быть подозрение на СВЕЧУ по признакам заболевания. CANDLE может быть доказан только генетическим анализом.Диагноз CANDLE подтверждается, если пациент является носителем 2 мутаций, по одной от каждого родителя. Генетический анализ может быть доступен не в каждом центре третичной медицинской помощи. 2.2 Каково значение испытаний?
Анализы крови, такие как скорость оседания эритроцитов (СОЭ), СРБ, общий анализ крови и фибриноген, проводятся во время активности заболевания для оценки степени воспаления и анемии; тесты ферментов печени проводятся для оценки поражения печени.
Эти тесты периодически повторяются, чтобы оценить, вернулись ли результаты к норме или близки к ней.Небольшое количество крови также необходимо для генетического анализа. 2.3 Можно ли это лечить или вылечить?
CANDLE нельзя вылечить, так как это генетическое заболевание. 2.4 Что такое лечение?
Эффективной схемы лечения синдрома CANDLE не существует. Было показано, что высокие дозы стероидов (1-2 мг/кг/день) улучшают некоторые симптомы, включая кожные высыпания, лихорадку и боль в суставах, но после снижения эти проявления часто возвращаются. Ингибиторы фактора некроза опухоли альфа (ФНО-альфа) давали временное улучшение у некоторых пациентов, но вызывали обострение у других.Иммунодепрессант тоцилизумаб показал минимальную эффективность. Экспериментальные исследования с применением ингибиторов JAK-киназы (тофацитиниб) продолжаются. 2.5 Каковы побочные эффекты медикаментозной терапии?
Кортикостероиды связаны с возможными побочными эффектами, такими как увеличение веса, отек лица и перепады настроения. Если стероиды назначают на длительный период, они могут вызвать задержку роста, остеопороз, высокое кровяное давление и диабет.
Ингибиторы TNF-α появились недавно; они могут быть связаны с повышенным риском инфицирования, активацией туберкулеза и возможным развитием заболеваний головного мозга или других иммунных заболеваний.Обсуждается потенциальный риск развития злокачественных новообразований; в настоящее время нет статистических данных, доказывающих повышенный риск развития злокачественных новообразований при применении этих препаратов. 2.6 Как долго должно продолжаться лечение?
2.7 Как насчет нетрадиционных или дополнительных методов лечения?
Нет никаких доказательств относительно этого типа терапии CANDLE-синдрома. 2.8 Какие периодические осмотры необходимы?
Дети должны регулярно (не менее 3 раз в год) наблюдаться у детского ревматолога для наблюдения за контролем заболевания и корректировки медикаментозного лечения.Дети, проходящие лечение, должны сдавать анализы крови и мочи не реже двух раз в год. 2.9 Как долго продлится болезнь?
СВЕЧА – болезнь на всю жизнь. Однако активность заболевания может меняться с течением времени. 2.10 Каков долгосрочный прогноз (прогнозируемый исход и течение) заболевания?
Ожидаемая продолжительность жизни может быть снижена, а смерть часто является результатом мультиорганного воспаления. Качество жизни часто бывает низким, так как пациенты страдают от снижения активности, лихорадки, боли и повторяющихся эпизодов сильного воспаления.2.11 Возможно ли полностью восстановиться?
Нет, потому что это генетическое заболевание.
3.1 Как заболевание может повлиять на ребенка и повседневную жизнь семьи?
Ребёнок и его семья сталкиваются с серьёзными проблемами ещё до того, как болезнь будет диагностирована.
Некоторым детям приходится иметь дело с деформациями костей, которые могут серьезно мешать нормальной деятельности. Ежедневные инъекции могут быть обременительны не только из-за дискомфорта, но и из-за того, что требования к хранению анакинры могут помешать путешествию.
Еще одной проблемой может быть психологическое бремя пожизненного лечения. Программы обучения пациентов и родителей могут решить эту проблему. 3.2 Что насчет школы?
Необходимо продолжать обучение детей с хроническими заболеваниями. Есть несколько факторов, которые могут вызвать проблемы с посещением школы, и поэтому важно объяснить возможные потребности ребенка учителям. Родители и учителя должны сделать все возможное, чтобы позволить ребенку нормально участвовать в школьных мероприятиях, чтобы ребенок не только был успешным в учебе, но и чтобы его принимали и ценили как сверстники, так и взрослые.Будущая интеграция в нормальную взрослую жизнь важна для молодого пациента и является одной из основных целей ухода за хроническими больными. 3.3 Что насчет спорта?
Занятия спортом – неотъемлемая часть повседневной жизни любого ребенка. Одна из целей терапии — дать детям возможность вести максимально нормальную жизнь и считать себя ничем не отличающимися от сверстников. Таким образом, все действия могут выполняться в допустимых пределах. Однако во время острых фаз может потребоваться ограниченная физическая активность или отдых.3.4 Что насчет диеты?
Специальной диеты нет. 3.5 Может ли климат влиять на течение болезни?
Насколько нам известно, климат не может влиять на течение болезни. 3.6 Можно ли вакцинировать ребенка?
Да, вообще ребенка можно вакцинировать. Тем не менее, родителям необходимо обратиться к лечащему врачу для получения живой аттенуированной вакцины. 3.7 Как насчет сексуальной жизни, беременности, контроля над рождаемостью?
До сих пор в литературе нет информации об этом аспекте у взрослых пациентов.Как правило, как и при других аутовоспалительных заболеваниях, лучше планировать беременность, чтобы обсудить влияние заболевания и лечения на развивающегося ребенка.

Температурно-электронная диагностика факела в форме пламени свечи. Свидетельство асимметричного повторного подключения

Аннотация

Вспышки в форме пламени свечи представляют собой архетипические структуры, косвенно свидетельствующие о магнитном пересоединении.Для долгоживущих событий большинство их наблюдаемых особенностей можно объяснить с помощью классической модели магнитного пересоединения солнечных вспышек, модели CSHKP. Вспышка, напоминающая знаменитую вспышку пламени свечи Цунэты 1992 года, произошла 28 января 2011 года; представлены его температурная и электронная диагностика. Эта вспышка наблюдалась с помощью Hinode/XRT, SDO/AIA и STEREO (A)/EUVI, что привело к высокому разрешению, широкому температурному охвату и стереоскопическим изображениям этой знаковой структуры. Наши карты температуры и плотности коэффициента фильтрации XRT подтверждают общий сценарий повторного подключения.Высокотемпературные изображения показывают просветление, которое увеличивается в размерах, образуя башнеобразную структуру в верхней части аркады после вспышки, особенность, которая наблюдалась в других длительных событиях. Эта башня представляет собой локализованное увеличение плотности, как показано на наших картах электронной плотности XRT. Несмотря на обширную работу над стандартным сценарием переподключения, между моделями нет полного согласия относительно природы этой башнеобразной структуры. Карты XRT также показывают, что повторно соединенные петли, которые последовательно соединяются своими вершинами с этой башней, развивают увеличение плотности в одной из своих ветвей, которое может достигать более чем в 2 раза значения плотности другой ветви, создавая вид «полупетлей». ».Тем не менее их плотность все же ниже, чем у башни. Эти скачки плотности длятся дольше, чем несколько акустических времен прохождения по петлям. Мы используем СТЕРЕО-изображения, чтобы показать, что полупетлевое осветление не является эффектом проекции прямой видимости, как это было предложено Форбсом и Актоном (1996). Это указывало бы на то, что асимметричное пересоединение имело место между петлями, изначально принадлежавшими системам с разными напряженностями магнитного поля, плотностями и температурами. Мы предполагаем, что тепло, генерируемое медленными толчками пересоединения, затем передается каждому плечу петли с разной скоростью.Следовательно, увеличение электронной плотности за счет хромосферного испарения в каждой ветви различно. Баланс теплового давления между ногами предотвращается ударной плазмой в верхней части петель. Мы также представляем предварительные результаты сравнения нового быстрого метода DEM, использующего данные SDO/AIA, с методом отношения фильтров XRT. Оба метода дополняют друг друга, они согласуются в перекрытии температурных характеристик своих приборов (3-12 МК), в то время как метод SDO/AIA хорошо работает при более низких температурах, а метод XRT – при более высоких температурах.

Температурно-электронная диагностика факела в форме пламени свечи

Аннотация

Вспышки в форме пламени свечи являются архетипическими структурами, косвенно свидетельствующими о магнитном пересоединении. Вспышка, напоминающая знаменитую вспышку пламени свечи Цунэты 1992 года, произошла 28 января 2011 года; представлены его температурная и электронная диагностика. Эта вспышка наблюдалась с помощью Обсерватории солнечной динамики/Сборки атмосферных изображений (SDO/AIA), Hinode/Рентгеновского телескопа (XRT) и Солнечно-земной обсерватории впереди (STEREO-A)/Extreme Ultraviolet Imager, что привело к высокому разрешению, широкий температурный охват и стереоскопические виды этой культовой структуры.На высокотемпературных изображениях видно просветление, которое увеличивается в размерах, образуя башнеобразную структуру в верхней части аркады послевспышечной вспышки, особенность, которая наблюдалась в других длительных событиях. Несмотря на обширную работу над стандартным сценарием пересоединения, между моделями нет полного согласия относительно природы этой высокоинтенсивной удлиненной структуры. Карты электронной плотности показывают, что пересоединенные петли, которые последовательно соединяются своими вершинами с башней, имеют асимметрию плотности примерно в два раза между двумя опорами, создавая вид «полупетлей».» Мы рассчитываем средние температуры с помощью нового метода быстрой дифференциальной оценки эмиссии (DEM), который использует данные SDO/AIA и анализирует нагрев и охлаждение характерных особенностей вспышки. Используя наблюдения STEREO, мы показываем, что яркость башни и полупетли не являются эффектом проекции прямой видимости того типа, который изучали Forbes & Acton.Этот вывод открывает дверь для основанных на физике объяснений этих загадочных повторяющихся особенностей солнечных вспышек, ранее приписываемых эффектам проекции.Мы подтверждаем результаты нашего DEM-анализа, сравнивая их с температурными анализами Hinode/XRT.

CANDLE-синдром: расширенный клинический спектр | Ревматология

S ir , Хронический атипичный нейтрофильный дерматоз с липодистрофией и синдромом повышенной температуры (CANDLE) — аутовоспалительное заболевание, описанное у детей в последние годы [1–3]. Помимо раннего начала возвратной лихорадки, пурпурного поражения кожи и прогрессирующей липодистрофии на первом году жизни, ранее в двух случаях наблюдались двусторонние кальцификации базальных ганглиев [3].Сообщаем о девочке с похожими проявлениями. Ее дополнительные особенности, в том числе инсулинорезистентный сахарный диабет, раннее начало суставных контрактур и обширные внутричерепные кальцификации за пределами базальных ганглиев, описаны с обзором подобных синдромов.

Евразийская девочка родилась в 41 неделю после неосложненной беременности у кровнородственной пары. Масса тела при рождении 3015 г, без врожденных аномалий. У нее был старший брат, который страдал периодической лихорадкой, рецидивирующим артритом и пурпурными узелками на коже и умер в возрасте 10 лет.

Начиная с 5-месячного возраста у нее появились рецидивирующая лихорадка и сыпь. Поражение кожи состояло из генерализованных фиолетовых папул и узелков и фиолетовых опухших век с обеих сторон. При поступлении в 3 года по поводу пневмонии у нее впервые отмечались задержка развития, гепатоспленомегалия, гипотиреоз и периоральные отеки. В 4 года у нее развился активный артрит как крупных (оба коленных), так и мелких (ПМФ и ДМФ на обеих кистях) суставов. Было отмечено натяжение ахиллова сухожилия, которое через 1 год прогрессировало до двусторонних контрактур голеностопного сустава.К 8 годам были зарегистрированы генерализованная липодистрофия, мышечная атрофия и алопеция. На девятом году жизни у нее развился инсулинорезистентный сахарный диабет, эпилептический статус с генерализованными тонико-клоническими (ГТК) судорогами, синдромом активации макрофагов и панкреатитом. В следующем году она перенесла еще один эпизод приступов GTC с субарахноидальным кровоизлиянием и отеком мозга, предполагаемым МРТ.

Повторные лабораторные исследования подтвердили повышенную СОЭ (до >170 мм/ч), повышение сывороточной аспартатаминотрансферазы (АСТ) и аланинаминотрансферазы (АЛТ) (143 ЕД/л и 68 ЕД/л соответственно), гипертриглицеридемию (повышение до 70.2 ммоль/л), гипотиреоз [свободный Т4 11,0 пмоль/л, тиреотропный гормон (ТТГ) 5,68 мМЕ/л] и персистирующая микроцитарная гипохромная анемия [средний корпускулярный объем (MCV) 65,2 фл, гемоглобин 5,7 г/дл], несмотря на прием препаратов железа . Стойко повышенный гемоглобин A1C (до 10,1%) начался с 9-летнего возраста, что соответствовало непереносимости глюкозы. Аутоантитела не обнаружены.

На КТ головного мозга в возрасте 8 лет выявлены плотные кальцификации в билатеральных базальных ганглиях и лобно-височно-теменных долях глубокого/подкоркового белого вещества (рис.1). Аспират костного мозга и биопсия не выявили злокачественных новообразований или атипичных изменений. Биопсия кожи показала васкулит с лейкоцитоклазией и выраженной нейтрофильной инфильтрацией. Кроме того, ее стеатоз с портальным, перипортальным и перицеллюлярным фиброзом был показан при биопсии печени. У нее был нормальный кариотип и не было обнаружено мутации в гене CIAS1 [холодовой аутовоспалительный синдром 1, ассоциированный с хроническим детским неврологическим кожно-суставным синдромом (CINCA)/мультисистемным воспалительным заболеванием с неонатальным началом (NOMID)].

Рис. 1

При аксиальной, сагиттальной, коронарной обзорной КТ головного мозга пациента выявлены двусторонние почти симметричные плотные кальцификаты с вовлечением базальных ганглиев

Двусторонние линейные и дугообразные плотные кальцификаты белого вещества в лобно-височно-теменных долях.

Рис. 1

При аксиальной, сагиттальной, коронарной обзорной КТ головного мозга пациента выявлены двусторонние почти симметричные плотные кальцификаты с вовлечением базальных ганглиев

Двусторонние линейные и дугообразные плотные кальцификаты белого вещества в лобно-височно-теменных долях.

Девочка не ответила ни на одно лечение, включая CSA, анакинру, этанерцепт, талидомид, канакинумаб и тоцилизумаб. Хотя ее часто госпитализировали для пульсовой инфузии метилпреднизолона по поводу обострений, ее болезнь неуклонно прогрессировала. Через два месяца после своего 10-летия она была госпитализирована с тяжелым рецидивирующим панкреатитом. У больного развился диабетический кетоацидоз, септический шок и полиорганная недостаточность, в последующем он скончался в реанимационном отделении. Диагноз синдрома CANDLE был подтвержден на основании обнаружения ее гомозиготности по миссенс-мутации c.224C>T в гене PSMB8 после ее смерти (Goldbach-Mansky R, Секция трансляционных аутовоспалительных заболеваний, Национальные институты здравоохранения, Национальный институт артрита, костно-мышечных и кожных заболеваний, Бетесда, Мэриленд, США).

Насколько нам известно, это первое сообщение о сахарном диабете при синдроме CANDLE. Хотя известно, что геномный полиморфизм (G/T 37360) в том же гене PSMB8 независимо связан с сахарным диабетом 1 типа [6], это наблюдение может выявить более широкий спектр систем органов, пораженных этим заболеванием.

У вышеуказанного пациента распространение внутричерепных кальцинатов на подкорковое белое вещество может свидетельствовать о естественном прогрессировании кальцификации в базальных ганглиях, патогенез которых неизвестен. Это рентгенологическое открытие было замечено не только у пациентов с синдромом CANDLE [1], но также и при недавно зарегистрированных контрактурах суставов, мышечной атрофии, микроцитарной анемии и панникулит-индуцированном синдроме детской липодистрофии (JMP) [4]. Хотя сообщалось об общих клинических особенностях этих двух состояний [наиболее заметные различия включают более поздний возраст начала заболевания (6–14 лет), более позднее начало контрактур суставов и отсутствие рецидивирующей лихорадки при ЮМП], насколько нам известно, это впервые раннее начало суставных контрактур четко наблюдалось при синдроме CANDLE, который ранее постулировался как отличительная черта синдрома JMP [3].

На сегодняшний день из семи детей с синдромом CANDLE с генетическими исследованиями это пятый пациент с мутацией (c.224C>T) в гене PSMB8 , общем для синдрома JMP [3]. Наряду с выделенным IFN-γ-ассоциированным аутовоспалительным ответом при обоих заболеваниях [ 3 , 5 ] разумно предположить, что контрактура суставов является поздним проявлением заболевания, и эти два состояния могут быть объединены как спектр одной и той же иммунопротеасомной реакции. ассоциированное аутовоспалительное расстройство с дополнительными доказательствами.Действительно, синдром CANDLE, синдром Nakajo-Nishimura и синдром JMP являются клинически фенотипическими вариациями мутаций гена PSMB8 [1-7].

Заявление о раскрытии информации : Авторы заявили об отсутствии конфликта интересов.

Каталожные номера

1,  ,  , и др.

Хронический атипичный нейтрофильный дерматоз с липодистрофией и синдромом повышенной температуры (CANDLE)

62

 (стр. 

489

95

)2,  ,  ,  ,  .

Хронический атипичный нейтрофильный дерматоз с липодистрофией и синдромом повышенной температуры: история болезни

28

 (стр. 

538

41

)3,  ,  , и др.

Мутации в субъединице протеасомы β типа 8 вызывают хронический атипичный нейтрофильный дерматоз с липодистрофией и повышенной температурой с признаками генетической и фенотипической гетерогенности

64

 (стр. 

895

907

)4,  ,  , и др.

Аутосомно-рецессивный синдром контрактур суставов, мышечной атрофии, микроцитарной анемии и липодистрофии, связанной с панникулитом

95

 (стр. 

E58

63

)5,  ,  , и др.

PSMB8, кодирующий субъединицу протеасомы β5i, мутирует при контрактурах суставов, мышечной атрофии, микроцитарной анемии и синдроме липодистрофии, вызванной панникулитом

87

 (стр. 

866

72

)6,  ,  ,  .

Ассоциация генов LMP2 и LMP7 в главном комплексе гистосовместимости с инсулинозависимым сахарным диабетом: популяционные и семейные исследования

,

Am J Hum Genet

,

1995

, vol.

56

 (стр. 

528

34

)7,  ,  , и др.

Новый детский случай синдрома Накаджо-Нишимура с генетической мутацией в субъединице иммунопротеасомы: перекрывающаяся сущность с синдромом JMP и CANDLE, связанная с мутациями PSMB8

227

 (стр. 

26

30

)

© Автор, 2014 г. Опубликовано Oxford University Press от имени Британского общества ревматологов. Все права защищены. Чтобы получить разрешения, отправьте электронное письмо по адресу: [email protected]

.

Техник-механик 2 смены — Yankee Candle

в Newell Brands в Саут-Дирфилде, Массачусетс, США.

Должностная инструкция

Должность: Техник-механик

Местонахождение: Южный Дирфилд, Массачусетс,

Смена: 2-я смена, с понедельника по пятницу с 14:00 до 22:00

Сводка заданий :

Техник-механик занимается обслуживанием, модификацией и новой установкой оборудования и механических систем.Техник-механик будет обслуживать производственное оборудование, выполняя общее техническое обслуживание, проверки, необходимый ремонт и устранение неполадок.

Обязанности:

+ Общается и работает напрямую с инженерами по ремонту/ диагностике и модификациям оборудования. Может читать и понимать основные механические чертежи и чертежи.

+ Поддерживает все заводское и производственное оборудование с помощью аналитического поиска и устранения неисправностей, в частности, механических компонентов и систем.

+ Работает с техниками-электриками и помогает с электронным и механическим ремонтом или диагностикой машин и систем.

+ Устанавливает компоненты, узлы и механические устройства в соответствии со спецификациями.

+ Использует базовое понимание механики, механических систем и робототехники для диагностики проблем.

+ Используются ручные, электрические и пневматические инструменты, а также электронное испытательное оборудование.

+ При содействии изготавливает или модифицирует механические компоненты, приспособления и испытательные приспособления под руководством или на основе предоставленных эскизов, чертежей или чертежей.

Квалификация:

+ Степень технического специалиста по механическим технологиям HS или эквивалентный сертификат или эквивалентный опыт

+ Умение читать и писать на английском языке

+ Требуются сапоги со стальным носком

+ Способность стоять более 8 часов и часто поднимать до 60 фунтов

+ Должен уметь читать и следовать сложным механическим деталям, схемам и чертежам

+ Знание и использование ручных инструментов, станков и различных других аналитических устройств для поиска и устранения неисправностей механических систем

Предпочтительная квалификация:

+ Опыт работы в сфере ремонта и обслуживания промышленного оборудования.

+ Уверенные навыки работы с компьютером и умение использовать Microsoft Windows, Excel и Word.

+ Предыдущий опыт работы с CMMS

Newell Brands — работодатель, предоставляющий равные возможности и поддерживающий позитивные действия. Мы предоставляем всем сотрудникам и претендентам на работу равные возможности трудоустройства независимо от расы, цвета кожи, религии, пола, возраста, национального происхождения, сексуальной ориентации, гендерной идентичности, гражданства, иммиграционного статуса, семейного положения, военного статуса, любого застрахованного статуса ветерана, статус инвалидности, генетическая информация, обязанности по уходу или любые другие основания, запрещенные законом.

Чтобы просмотреть полную информацию и подать заявку, пожалуйста, войдите или создайте учетную запись соискателя. Как подать заявку Копировать ссылку

Вакансия: JC196349281

Опубликовано: 31 окт. 2021 г.

Дата обновления: 28 февраля 2022 г.

Лабораторное руководство по менингиту: Идентификация и характеристика Neisseria

Версия для печати pdf icon[15 страниц]

Н.meningitidis представляют собой грамотрицательные диплококки в форме кофейных зерен, которые могут находиться внутри или вне клеток в лейкоцитах PMN. N. meningitidis — привередливый организм, который лучше всего растет при температуре 35-37°C и ~5% CO 2 (или в банке со свечой). Он может расти как на чашке с кровяным агаром (BAP), так и на чашке с шоколадным агаром (CAP). Колонии N. meningitidis на БАТ серые, непигментированные, круглые, гладкие, влажные, блестящие, выпуклые, с четко очерченным краем. N. meningitidis выглядят как большие непрозрачные колонии от бесцветного до серого цвета на CAP. Перед процедурами тестирования идентификации и характеризации изоляты всегда должны проверяться на чистоту роста, и, при необходимости, одна колония должна быть повторно высеяна штрихом, чтобы получить чистую культуру. Для следующих процедур идентификации и характеризации тестирование следует проводить на 18–24-часовом росте из BAP (рис. 1) или CAP (рис. 2) при 35–37°C с ~5% CO 2 (или в свечка-кувшин).

Следующие тесты рекомендуются для подтверждения идентичности культур, которые морфологически выглядят как N. meningitidis (рис. 3). N. meningitidis можно идентифицировать с помощью теста Ковача на оксидазу и использования углеводов. Если тест на оксидазу положительный, следует провести тест на использование углеводов. Если тест утилизации углеводов показывает, что изолят может быть N. meningitidis , следует провести серологические тесты для определения серогруппы.Эта последовательность тестирования является эффективным способом экономии дорогостоящих антисывороток и времени. Дополнительные методы идентификации и характеристики N. meningitidis с использованием молекулярных инструментов описаны в Главе 10: Методы ПЦР и Главе 12: Молекулярные методы.

Для работы с изолятами N. meningitidis требуется соблюдение 2-го уровня биологической безопасности (BSL-2), поскольку этот микроорганизм представляет потенциальную опасность для лабораторного персонала и окружающей рабочей среды.Пожалуйста, обратитесь к Главе 4: Биобезопасность, чтобы следовать рекомендациям, установленным для лабораторий, работающих в учреждениях BSL-2, так как многие тесты, описанные в этой главе, требуют открывания чашек с живыми культурами и часто выполняются вне бокса биобезопасности ( БСК). Молекулярные инструменты описаны в Главе 10: Методы ПЦР и Главе 12: Молекулярные методы.

Рисунок 1. Колонии N. meningitidis на БАТ

Рисунок 2. Н.meningitidis колонии на CAP

Рисунок 3. Блок-схема идентификации и характеристики изолята N. meningitidi s

  1. Тест Ковача на оксидазу Тест Ковача на оксидазу определяет наличие цитохромоксидазы. Реагент оксидазы Ковача, тетраметил-п-фенилендиамин дигидрохлорид, превращается в пурпурное соединение организмами, содержащими цитохром с в составе их дыхательной цепи. Этот тест помогает распознать N. meningitidis , но другие представители рода Neisseria, , а также неродственные виды бактерий также могут давать положительную реакцию.Штаммы с положительным и отрицательным контролем качества (КК) следует тестировать вместе с неизвестными изолятами, чтобы убедиться, что реагент оксидазы работает должным образом.
    1. Приготовление 1% оксидазного реагента из порошка оксидазы Во избежание порчи стандартного порошка оксидазы его следует хранить в плотно закрытом эксикаторе в прохладном темном месте. Реактив оксидазы Ковача предназначен только для диагностического использования in vitro. Избегайте контакта с глазами и кожей, так как это может вызвать раздражение.В случае случайного контакта немедленно промойте глаза или кожу водой в течение не менее 15 минут.
      1. Приготовьте 1,0% реактив оксидазы Ковача, растворив 0,1 г тетраметил-п-фенилендиамина дигидрохлорида в 10 мл стерильной дистиллированной воды.
      2. Хорошо перемешайте и дайте постоять 15 минут.
        • Раствор следует ежедневно готовить свежим, а неиспользованную часть следует выбрасывать.
        • В качестве альтернативы реагент можно разделить на аликвоты по 1 мл и хранить в замороженном виде при температуре -20°C.Перед использованием аликвоты следует вынуть из морозильной камеры и разморозить. Выбрасывайте неиспользованную часть каждый день после оттаивания реагента.
    2. Проведение оксидазного теста Ковача
      Метод с фильтровальной бумагой
      1. Выращивайте тестируемый(е) изолят(ы) в течение 18-24 часов на BAP при 35-37°C с ~5% CO 2 (или в банке со свечой).
      2. На непористую поверхность (например, на чашку Петри или стеклянную пластину) смочите полоску фильтровальной бумаги несколькими каплями реактива оксидазы Ковача.
      3. Дайте полоске фильтровальной бумаги высохнуть на воздухе перед использованием.
      4. Используйте одноразовую пластиковую петлю, платиновую инокуляционную петлю или деревянную палочку-аппликатор, чтобы взять часть колонии, выросшей в течение ночи на BAP, и втереть ее в обработанную фильтровальную бумагу (рис. 4).
        • Не используйте нихромовую петлю, так как это может привести к ложноположительной реакции.
      5. Осмотрите фильтровальную бумагу на изменение цвета на фиолетовый.
      6. Выполните шаги 3 и 4 с положительным и отрицательным штаммом QC, чтобы убедиться, что реагент оксидазы работает правильно.

      Рисунок 4. Тест Ковача на оксидазу: отрицательная и положительная реакция на фильтровальной бумаге Метод планшета

      Пластинчатый метод
      1. Выращивайте тестируемый(е) изолят(ы) в течение 18-24 часов на BAP при 35-37°C с ~5% CO 2 (или в банке со свечой).
      2. Нанесите несколько капель реагента оксидазы Ковача непосредственно на несколько подозрительных колоний, растущих на 18-24-часовом BAP.
        • Не заливайте всю чашку, так как бактерии, подвергшиеся воздействию реагента, обычно нежизнеспособны для пересева.
      3. Наклоните чашку и наблюдайте за изменением цвета колоний на фиолетовый.
      4. Выполните шаги 1 и 2 с положительным и отрицательным штаммом QC, чтобы убедиться, что реагент оксидазы работает правильно.
    3. Чтение результатов теста на оксидазу
      • Положительные реакции развиваются в течение 10 секунд в виде пурпурного окрашивания в местах, где бактерии были нанесены на обработанную фильтровальную бумагу. Отсроченные реакции маловероятны при использовании N. meningitidis .
      • Отрицательные реакции не приведут к изменению цвета обработанной фильтровальной бумаги.
  2. Утилизация углеводов штаммом N. meningitidis : метод цистин-триптиказного агара (CTA) Тесты на утилизацию углеводов используются для подтверждения идентификации штамма N. meningitidis . Для этой процедуры 4 различных углевода (глюкоза [также называемая декстрозой], мальтоза, лактоза и сахароза) добавляют в пробирки, содержащие основу СТА, до конечной концентрации 1%.В среду также включен индикатор феноловый красный. Это чувствительный индикатор, который окрашивается в желтый цвет в присутствии кислоты при рН 6,8 или ниже. Панель из четырех пробирок, каждая из которых содержит разные углеводы, используется для тестирования каждого изолята. Neisseria spp. производят кислоту из углеводов путем окисления, а не ферментации. N. meningitidis окисляет глюкозу и мальтозу, но не лактозу или сахарозу. Хотя это крайне редко, штаммы N. meningitidis , как сообщается, используют либо глюкозу, либо мальтозу, но не то и другое одновременно.Хорошо охарактеризованные штаммы QC следует тестировать вместе с неизвестными изолятами, чтобы убедиться, что сахара CTA работают должным образом. Изоляты N. meningitidis и/или N. lactamica следует использовать для контроля качества сахарной среды СТА. Методы приготовления сахарных сред СТА включены в Приложение. Сахар CTA следует хранить при температуре 4°C и нагревать до комнатной температуры (25°C) перед использованием.
    1. Проведение теста CTA на содержание сахара
      1. Выращивайте тестируемый(е) изолят(ы) в течение 18-24 часов на BAP при 35-37°C с ~5% CO 2 (или в банке со свечой).
      2. Дайте 4 сахарам CTA, глюкозе (также называемой декстрозой), мальтозе, лактозе и сахарозе нагреться до комнатной температуры (25°C) и пометьте пробирки идентификационным номером лаборатории.
      3. Удалите 3–5 колоний из ночного роста на BAP с помощью одноразовой петли объемом 1 мкл.
      4. Несколько раз воткните сахар СТА в верхние 10 мм среды. Достаточно примерно 8 уколов одной и той же петлей.
        • Используйте отдельную одноразовую петлю для инокуляции каждого тестируемого углевода.
      5. Неплотно завинтите завинчивающуюся крышку каждой пробирки и поместите пробирки в инкубатор при 35–37°C без CO 2 . Инкубируйте сахара CTA в течение не менее 72 часов (и до 5 дней), прежде чем отбрасывать их как отрицательные.
      6. Наблюдайте за сахарами СТА на предмет появления видимого помутнения и изменения цвета на желтый.
      7. Выполните шаги 1–5, используя штамм N. meningitidis , N. lactamica и штамм N. sicca QC, чтобы убедиться, что сахара CTA работают правильно.
    2. Чтение результатов анализа сахара CTA. Появление видимой мутности и желтого цвета в верхней части среды указывает на рост бактерий и выработку кислоты и интерпретируется как положительный тест (рис. 5). Хотя реакции могут возникать уже через 24 часа после инокуляции, некоторые реакции отсрочены, и отрицательные результаты не следует интерпретировать до 72 часов инкубации. Изменение цвета на желтый без помутнения обычно не является положительной реакцией. Результаты использования углеводов для дифференциации N.meningitidis из других Neisseria spp. и бактерии перечислены в таблице 1.

      Рисунок 5. Реакции CTA сахара для N. meningitidis с использованием глюкозы (декстрозы) и мальтозы, на что указывает образование кислоты (изменение цвета на желтый), и без использования лактозы или сахарозы

      Таблица 1. Использование углеводов некоторыми видами Neisseria и Moraxella spp.

      Производство кислоты из:
      Таблица 1. Использование углеводов некоторыми видами Neisseria и Moraxella spp.
      Организм Глюкоза 1 Мальтоза Лактоза Сахароза
      Neisseria meningitidis + +
      Neisseria lactamica + + +
      Neisseria gonorrhoeae + 2
      Нейссерия сухая + + +
      Moraxella catarrhalis

      Сноски

      • 1 Глюкозу также называют декстрозой.
      • 2 Некоторые штаммы N. gonorrhoeae являются продуцентами слабой кислоты и могут оказаться глюкозотрицательными в среде СТА.
  3. Идентификация N. meningitidis серогруппы В настоящее время выделяют двенадцать серогрупп, основанных на биохимическом составе капсулярных полисахаридов: A, B, C, H, I, K, L, W135, X, Y, Z и 29E (Z ‘). Серогруппа D больше не признается серогруппой. Серогруппы A, B, C, W135 и Y являются 5 наиболее распространенными причинами бактериального менингита.Серогруппа А была наиболее частой причиной эпидемий в Африке и Азии. Серогруппы C, W135 и X также были зарегистрированы как причины эпидемий в некоторых частях Африки. Специфичные для серогрупп антисыворотки для этих основных серогрупп имеются в продаже. Не всегда практично тестировать все серогруппы, для которых имеются антисыворотки в лаборатории. Алгоритмы тестирования могут быть созданы в лабораториях с предварительными знаниями о преобладании или отсутствии серогрупп в этом конкретном географическом регионе, чтобы сначала проверить наиболее распространенные серогруппы.В алгоритм тестирования для любой лаборатории могут быть внесены изменения на основании информации о текущих штаммах, циркулирующих в регионе. Например, в Африке тестирования с антисыворотками к серогруппам A и W135 (и X в некоторых регионах), а также с контрольным физиологическим раствором для выявления неспецифической аутоагглютинации должно быть достаточно для характеристики большинства изолятов. Штаммы, отрицательно реагирующие на антисыворотки A, W135 и X, должны быть протестированы с другими доступными антисыворотками, особенно C, Y и B.Почти все изоляты случаев поддаются серогруппировке, если они тестируются на комплексной панели антисывороток и используются надлежащие контроли. В редких случаях изолят, который не реагирует ни с одной из специфичных к серогруппе антисывороток или реагирует более чем с одной специфичной к серогруппе антисывороткой, считается негруппируемым (НГ). Также могут использоваться поливалентные антисыворотки, содержащие комбинации серогрупп (например, A, B и C или X, Y, W135 и Z). Очень важно, чтобы референс-лаборатории имели возможность выделять, идентифицировать и характеризовать серогруппы изолятов. Н.менингитид . Эти ценные данные предоставляют лабораториям и органам общественного здравоохранения инструменты для выявления вспышек, контролируемых кампаниями вакцинации, распознавания серогрупп, вызывающих спорадические заболевания, и выявления появления новых штаммов, вызывающих вспышки.
    1. Тест серогруппировки с агглютинацией на слайде (SASG) для определения серогруппы Изоляты N. meningitidis Для тестирования SASG следует использовать убитые формалином менингококковые суспензии, а не физиологические суспензии живых организмов, чтобы обеспечить безопасную рабочую среду.Раствор 5% формалинизированного физиологического раствора достаточен для уничтожения бактерий. Однако формалин является канцерогеном и требует очень осторожного хранения и обращения с ним. В качестве альтернативы, работа должна выполняться под колпаком биобезопасности, если не используется формалин. Антисыворотки следует хранить в холодильнике при температуре 4°С и нагревать до комнатной температуры (25°С) перед использованием. Как только тестирование будет завершено, его необходимо снова поместить в холодильник, чтобы предотвратить потерю связывающей активности антитела.
    2. Выполнение теста SASG
      1. Выращивайте тестируемый(е) изолят(ы) в течение 18-24 часов на BAP при 35-37°C с ~5% CO 2 (или в банке со свечой).
      2. Очистите предметное стекло спиртом (необязательно, если предметное стекло предварительно очищено).
      3. Разделите предметное стекло на равные части (например, двенадцать частей 11 X 22 мм на стандартном предметном стекле 50 X 75 мм) с помощью непроницаемой для жидкости ручки или воскового карандаша.
        • Для каждого изолята потребуется столько секций на предметном стекле, сколько будет тестироваться индивидуальная антисыворотка, специфичная для серогруппы, а также отрицательный контроль в физиологическом растворе.
      4. В нижнюю часть каждой секции предметного стекла, описанной в шаге (2), добавьте микропипеткой по 10 мкл 5% формалинового физиологического раствора.
        • В инструкциях указано использование микропипетки со стерилизованными наконечниками с фильтром для измерения 10 мкл 5% формалинового физиологического раствора для взвешивания бактерий. Микропипетка будет передавать точные и одинаковые измерения для правильной реакции SASG.
        • Если микропипетка и наконечники недоступны, можно использовать стерильные одноразовые петли для посева объемом 10 мкл для переноса 10 мкл 5% формалинизованного физиологического раствора, но часто они не дают точного количества (от 5 до 10 мкл).
      5. Используйте стерильную одноразовую инокуляционную петлю на 10 мкл для сбора нескольких колоний с поверхности ночной культуры, инкубированной на BAP.
      6. Суспендировать бактерии в 5% формалинизованном солевом растворе в нижней части каждой секции предметного стекла. Суспензия должна быть умеренно непрозрачной (см. солевой контроль на рисунке 6). Не позволяйте клеточной суспензии высохнуть перед добавлением антисыворотки.
        • Если бактерии трудно суспендировать непосредственно на предметном стекле, приготовьте умеренно молочную суспензию (сравнимую со стандартом McFarland 6) из тест-культуры в маленьком флаконе с 250 мкл 5% формалинового физиологического раствора и быстро встряхните суспензию, чтобы перемешать и разбить любые гранулы.Добавьте 10 мкл этой суспензии в нижнюю часть предметного стекла.
      7. В верхнюю часть каждой секции предметного стекла, описанной в шаге (2), добавьте 10 мкл серогрупп-специфичной антисыворотки для тестирования, а также неформалинизированный солевой раствор или фосфатно-солевой буфер (PBS) для отрицательного контроля с микропипетка.
        • НЕ ИСПОЛЬЗУЙТЕ пипетку, поставляемую с антисывороткой, поскольку она обычно вводит большее количество, чем необходимо, и может легко загрязняться.
        • Если микропипетка и наконечники недоступны, можно использовать стерильные одноразовые петли для посева объемом 10 мкл для переноса 10 мкл антисыворотки, но часто они не обеспечивают точного количества (от 5 до 10 мкл).
        • Выбрасывайте наконечник или петлю, используемые для переноса антисыворотки на предметное стекло, в контейнер для отходов после каждого использования, чтобы избежать загрязнения антисыворотки. Если источник антисыворотки контаминирован, необходимо использовать новый флакон.
      8. Аккуратно наклоните предметное стекло, чтобы смешать клеточные суспензии с антисыворотками в каждой секции.Продолжайте осторожно покачивать предметное стекло в течение 1–2 минут, чтобы нижняя и верхняя части полностью смешались. Не делайте круговых движений при раскачивании, так как это может привести к тому, что срезы с различными антисыворотками, специфичными для серогруппы, будут сталкиваться друг с другом и загрязнять друг друга.
      9. Через 2 минуты изучите реакции SASG при ярком свете и на черном фоне. Используйте рейтинговую систему на рисунке 6, чтобы определить интенсивность реакции агглютинации в каждом разделе предметного стекла.Не принимайте во внимание любую агглютинацию, которая происходит после 2-минутного периода времени.
      10. Запишите результаты SASG в лабораторный журнал.
    3. Чтение результатов SASG
      1. Оценка интенсивности реакции агглютинацииАгглютинация происходит, когда антисыворотка связывается с бактериальными клетками, вызывая агглютинацию или слипание клеток, что делает клеточную суспензию более прозрачной. Интенсивность реакции агглютинации может варьировать в зависимости от плотности клеточной суспензии или используемой антисыворотки.Описание оценок интенсивности, показанных на рис. 6, приведено ниже.4+ Все клетки агглютинируют, и клеточная суспензия становится прозрачной
        3+ 75% клеток агглютинируют, а клеточная суспензия остается слегка мутной
        2+ 50% клетки агглютинируют, и клеточная взвесь остается слегка мутной
        1+ 25% клеток агглютинируют, а клеточная взвесь остается слегка мутной
        +/- Менее 25% клеток агглютинируют, и возникает мелкозернистое вещество
        0 Нет видимой агглютинации; подвеска остается мутной и гладкой

        Рис. 6.Рейтинг интенсивности реакции агглютинации

      2. Определение серогруппы
        • Положительный результат обозначается 3+ или 4+ (сильная агглютинация) в течение 1-2 минут, за исключением серогруппы В, которая считается положительной при оценке 2+ и выше.
        • Отрицательный результат обозначается 0 (физиологический раствор), +/-, 1+ или 2+ (слабая агглютинация).
        • Серогруппа определяется, когда положительный результат наблюдается только с одной из антисывороток, а не с физиологическим раствором.
        • Если серогруппа не определена, изолят считается НГ. Все следующие комбинации результатов указываются как NG:
          • Агглютинация в физиологическом растворе, независимо от сильных реакций с другими антисыворотками, характеризует культуру как аутоагглютинирующую.
          • Агглютинация более чем одной серогруппоспецифичной антисывороткой при отсутствии агглютинации в физиологическом растворе характеризует культуру как полиагглютинирующую или перекрестно-реактивную.
          • Отсутствие агглютинации с какой-либо антисывороткой или физиологическим раствором характеризует штамм как нереактивный.
    4. Процедуры устранения неполадок Изоляты N. meningitidis подвержены вариабельности (инкапсулированные и неинкапсулированные, малые и большие колонии, медленно растущие и быстрорастущие, тяжелые агглютинаторы и легкие агглютинаторы) и могут быть неясными или трудными для интерпретации. Некоторые процедуры устранения неполадок перечислены ниже:
      1. Повторите тест непосредственно на предметном стекле, используя рост из другого участка той же чашки.
      2. Сделайте клеточную суспензию в небольшой пробирке и встряхните, если результат SASG непосредственно на предметном стекле неясен, и повторите тест.
      3. Добавьте 20 мкл антисыворотки прямо на предметное стекло, а затем добавьте петлю, полную микроорганизмов, не разбавляя образец 5% формалиновым солевым раствором.
      4. Пересев и повторно протестируйте свежий рост на следующий день.
      5. Если исходная чашка содержит колонии разного размера, сделайте пересев для каждого типа колоний и протестируйте обе культуры на следующий день. Более крупные колонии обычно указывают на лучшее образование капсул и, следовательно, на лучшую реактивность. Тем не менее, небольшие колонии иногда дают лучший результат.
        • Если расхождения не устраняются немедленно, любые последующие повторы SASG следует использовать вместе с контрольными штаммами.
    5. Контроль качества (КК) антисывороток для тестирования SASG Набор эталонных штаммов для N. meningitidis серогрупп A, B, C, W135, X, Y, Z, 29E (по одному на серогруппу) и негруппируемого штамма N. meningitidis штамм следует использовать для контроля качества антисыворотки перед тестированием каких-либо неизвестных изолятов. Контроль качества антисыворотки должен быть:
      • Выполняется для каждой новой партии антисыворотки, поступающей в лабораторию.
      • Выполняется раз в два года после начального контроля качества.
      • Повторяется, если флакон подвергался воздействию температуры выше 4°C или если есть основания подозревать, что флакон был контаминирован после проведения первоначального контроля качества.

      Следуйте процедуре тестирования SASG для контроля качества каждой партии антисыворотки с использованием всех эталонных штаммов, имеющихся в лаборатории. Запишите результаты, приведенные в образце листа контроля качества на рисунке 7.

      Чтение результатов теста контроля качества

      Прохождение теста:

      • Антисыворотка должна давать агглютинацию 3+ или 4+ с гомологичными антигенами в течение 1-2 минут.
      • Антисыворотка не должна реагировать с гетерологичными серогруппами N. meningitidis , с эталонным штаммом NG или в физиологическом растворе.

      Неудачный тест:

      • Антисыворотка агглютинирует с одним или несколькими эталонными штаммами и/или с эталонным штаммом NG и/или в физиологическом растворе.
      Рисунок 7. Пример листа контроля качества для тестирования антисыворотки против всех серогрупп N. meningitidis
      A
      (номер штамма)
      B
      (номер штамма)
      C
      (номер штамма)
      W135
      (номер штамма)
      X
      (номер штамма)
      Y
      (номер штамма)
      Z
      (номер штамма)
      29E (Z’)
      (номер штамма)
      NG
      (номер штамма)
      А
      Лот №
      ++++
      B
      Лот №
      ++++
      C
      Лот №
      ++++
      W135
      Лот №
      ++++
      X
      Лот №
      ++++
      Z
      Лот №
      ++++
      29E
      Лот №
      ++++
      Солевой раствор

       

      Рис. 7.Пример листа контроля качества для тестирования антисыворотки против всех серогрупп N. meningitidis

  4. Коммерческие наборы для идентификацииДля идентификации Neisseria spp. доступно несколько коммерческих систем идентификации, использующих биохимические или ферментативные субстраты. Иногда для этих систем могут потребоваться дополнительные тесты, и необходимо учитывать дополнительные характеристики, такие как микроскопия и морфология колоний. Как правило, каждая система автономна, но может потребоваться добавление одного или нескольких реагентов для завершения определенных реакций.При использовании этих наборов необходимо точно следовать инструкциям производителя. Для получения подробных инструкций и использования соответствующих контрольных штаммов обратитесь к Руководству по клиническим микробиологическим процедурам (2).
  5. Серотипирование и серосубтипирование N. meningitidis с помощью моноклональных антител (МАТ)Дифференциация и классификация бактериальных штаммов на подвидовом уровне требуют высоковоспроизводимых методов, мало зависящих от экспериментальных условий и позволяющих эффективно различать эпидемиологически неродственные штаммы .Дальнейшая характеристика бактерий, вызывающих менингит, особенно важна для документирования распространения особенно патогенных клонов. Многие иммуноанализы были разработаны для серологической характеристики антигенов N. meningitidis . Иммунологическая детекция специфических эпитопов двух основных белков наружной мембраны, PorB и PorA, является основой системы серологической классификации, определяющей, соответственно, серотипы и сероподтипы видов 1, 3-7). Ниже описан простой недорогой метод серотипирования и серосубтипирования менингококков — дот-блоттинг с Mab.
    1. Приготовление суспензий цельных клеток
      • Суспензии цельных клеток не следует использовать для ПЦР-тестирования.
      1. Выращивайте изолят N. meningitidis для тестирования вместе с соответствующим эталонным изолятом для контроля качества на BAP в течение 18–24 часов при 35–37°C с ~5% CO 2 (или в банка).
      2. Соберите 3–5 колоний с помощью стерильной одноразовой петли или стерильного тампона и суспендируйте в 1 мл PBS (pH = 7,2) с 0,02% азида натрия.
      3. Инактивируйте бактерии, нагревая суспензию при 60°C в течение 30 минут.
      4. Доведите оптическую плотность с помощью PBS до 0,2 при измерении при 650 нм (эквивалентно McFarland 1,5).
      5. Храните суспензии цельных клеток при температуре 4°C до использования.
    2. Проведение дот-блоттинга серотипа/серосубтипа
      1. Нарезанные полоски (0,5 x 10 см) из нитроцеллюлозной бумаги (поры 0,45 мкм). Разделите каждую полоску на 10 частей длиной 1 см с помощью воскового карандаша и выровняйте их на стеклянной или твердой пластиковой пластине.
        • Используйте перчатки и/или щипцы при работе с нитроцеллюлозной бумагой.
      2. Пометьте полоски перманентной ручкой в ​​левой части.
      3. Нанесите точки 2 мкл цельноклеточной суспензии соответствующего эталонного изолята в середине следующего отмеченного среза и по 2 мкл тестируемых изолятов последовательно на каждый из следующих срезов, как показано на рисунке 8.
      4. Высушите полоски в течение 15 минут или более.
      5. Добавьте 2 мл блокирующего буфера (PBS с добавлением 3% бычьего сывороточного альбумина [BSA]) в каждую лунку 8-луночного инкубационного планшета (8-луночные планшеты с крышками имеются в продаже).
      6. Поместите тестируемые полоски с одними и теми же Mab в лунку (максимум 4 полоски на лунку). Аккуратно перемешивайте в течение 30 минут. Полоски должны быть полностью смочены блокирующим буфером.
        • Минимальный инкубационный объем блокирующего буфера для 1 стрипа составляет 0,5 мл. Можно инкубировать до 4 полосок с примерно 40 точечными образцами в общем объеме 2 мл. Рассмотрите возможность оставления пустой лунки в инкубационных лотках между каждым набором полосок, которые инкубируются с разными Mab.
      7. Добавьте Mab в соответствующие лунки.В зависимости от поставщика Mab конечное разведение может варьироваться от 1:10 до 1:500000.
      8. Накройте инкубационный лоток крышкой и инкубируйте в течение ночи при осторожном перемешивании.
      9. Осторожно удалите растворы антител с полосок с помощью наконечника пипетки, подсоединенного к аспиратору или аналогичному устройству. Промывайте наконечник водой между каждым набором полосок, инкубированных с разными Mab, чтобы предотвратить перенос Mab.
      10. Промойте полоски 3 раза не более чем 2 мл PBS непосредственно в лунках.Удалите PBS таким же образом, как были удалены растворы антител.
      11. Добавьте 2 мл PBS с добавлением 3% BSA с кроличьим антимышиным антителом, меченным пероксидазой хрена (обычно используется в разведении 1:2000), и инкубируйте в течение 2 часов при осторожном перемешивании. Убедитесь, что полоски полностью смочены.
      12. Промойте полоски в 2 мл PBS в течение 5 минут дважды, как на шаге 9.
      13. Промойте полоски в течение нескольких минут в 0,05 М буфере ацетата натрия, рН 5,0, а затем выбросьте раствор.
      14. Поместите полоски в пластиковую коробку и добавьте 10 мл ацетатно-натриевого буфера с 0,4 мл 3-амино-9-этилкарбазола (АЭК) в диметилформамиде (ДМФА). Перемешивайте 2-3 минуты.
      15. Добавьте 10 мкл H 2 O 2 при концентрации 30 % и окрашивайте каждую точку до появления четких красных точек для эталонного изолята (2–10 минут).
    3. Чтение результатов дот-блоттинга серотипирования/серосубтипирования
      1. Промойте полоски под проточной водой, выровняйте их на стеклянной пластине и соберите избыток воды фильтровальной бумагой или слегка наклоните пластину, чтобы высушить полоски при комнатной температуре (25°C).
      2. Оцените интенсивность окрашивания каждой точки (положительное, слабое или отрицательное) визуально относительно эталонного штамма.
      3. После высыхания полоски можно приклеить скотчем к листу бумаги и хранить в защищенном от света пластиковом кармане.

Каталожные номера

  1. Архин, Ф. Ф., Ф. Моро, Дж. В. Коултон и Э. Л. Миллс. Белки наружной мембраны и серосубтипирование с везикулами наружной мембраны из клинических изолятов Neisseria meningitidis. Современная микробиология . 1997;34:18-22.
  2. Справочник по процедурам клинической микробиологии, 3-е издание. АСМ . Вашингтон, округ Колумбия, 2010 г.; 2540 страниц.
  3. Frasch, C.E., W.D. Zollinger и J.T. Poolman. Антигены серотипов Neisseria meningitidis и предлагаемая схема обозначения серотипов. Rev Infect Dis . 1985;7:504-510.
  4. Poolman, JT, P. Kriz-Kuzemenska, F. Ashton, W. Bibb, Dankert J, Demina A, et al. Серотипы и подтипы Neisseria meningitidis: результаты международного исследования по сравнению чувствительности и специфичности моноклональных антител. Клинико-диагностическая лаборатория иммунологии . 1995;2:69-72.
  5. Sacchi, C.T., A.P.Lemos, M.E.Brandt, A.M.Whitney, C.E.Melles, C.A.Solari, et al. Предлагаемая стандартизация номенклатуры типирования вариабельной области Neisseria meningitidis PorA. Клинико-диагностическая лаборатория иммунологии . 1998;5:845-855.
  6. Sacchi, C.T., A.P. Lemos, A.M. Whitney, C.A. Solari, M.E. Brandt, C.E. Melles, et al. Корреляция между серологическим анализом и анализом секвенирования белка наружной мембраны PorB в системе серотипирования Neisseria meningitidis. Клинико-диагностическая лаборатория иммунологии . 1998;5:348-354.
  7. Сваминатан Б., Г. М. Матар, М. В. Ривз, Л. М. Грейвс, Г. В. Аджелло, В. Ф. Бибб и др. Молекулярный подтип Neisseria meningitidis серогруппы B: сравнение пяти методов. Журнал клинической микробиологии . 1996; 34:1468-1473.

 В начало страницы

Вернуться к Руководству по лабораторным методам

Зажигание свечи с обоих концов


ИНФОРМАЦИОННАЯ ЛИНИЯ ИТЭР 279

Майкл Кин, отдел диагностики

Горение свечи с обоих концов

Подпись представляет собой ключевую веху как для Японского внутреннего агентства, так и для организации ИТЭР, а также важную веху для графика проекта.

Недавно между Организацией ИТЭР и Японским агентством Японии было заключено важное соглашение о закупке четырех ключевых диагностических систем для ИТЭР.

Монитор примесей в диверторе представляет собой окно для работы дивертора, контролирующее потоки примесей и позволяющее оптимизировать работу. Диверторная термография дает подробное представление о профиле тепловой нагрузки целей дивертора, что является ключевой диагностикой для защиты компонентов дивертора. Краевое рассеяние Томсона используется для измерения профиля температуры и плотности края плазмы ИТЭР, предоставляя полезную информацию при изучении удерживающих свойств края плазмы и для оптимизации характеристик термоядерного синтеза.

И, наконец, полоидальный поляриметр будет измерять плотность тока плазмы в поперечном сечении плазмы (профиль тока). Детали этого профиля влияют на стабильность и перенос тепла в активной зоне и должны быть тщательно измерены и отрегулированы для достижения длинных импульсов ИТЭР.


Дистанционное согласование подписи прошло гладко — документ был сначала подписан генеральным директором ИТЭР, а затем с курьером проехал полмира, чтобы его подписал Т.Ойкава, директор JAEA по международным делам.

Подпись представляет собой ключевую веху как для Японского внутреннего агентства, так и для организации ИТЭР, а также важную веху для графика проекта. Удаленное согласование подписания Соглашения о закупках прошло гладко: сначала документ был подписан Генеральным директором ИТЭР Мотодзимой, а затем курьер переправил его через полмира для подписания Т. Ойкавой, директором по международным делам Японии. Агентство по атомной энергии (JAEA).

Было несколько поздних ночей и ранних утр для команд во Франции и Японии. «Это правда, что свеча должна была гореть с обоих концов, чтобы уложиться в сжатые сроки, — прокомментировал глава диагностического отдела Майк Уолш, — но в конце концов это стоило всех затраченных усилий».

Киёси Итами, руководитель группы диагностики плазмы в Наке, добавил: «Я очень рад завершению этой критической фазы проекта и благодарю всех участников за хороший совместный подход к достижению этой стадии.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.

*